- ￥290
- 普利莱
- E2009 (100次)
- 北京
- 2025年12月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
无
- CAS号：
无
- 保质期：
12个月
- 供应商：
普利莱APPLYGEN
- 保存条件：
根据说明书具体操作
- 规格：
100次
描述：液体样本丙二醛（MDA）检测试剂盒是一种灵敏简单的检测脂质过氧化产物丙二醛的试剂盒。丙二醛（Malondialdehyde, MDA）是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，通过检测MDA的水平可评价脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。
本试剂盒是一种基于MDA和硫代......酸（thiobarbituric acid, TBA）在较高温度和酸性环境中反应生成红色MDA-TBA加和物，MDA-TBA加和物在535nm波长具有最大吸收，据此可以通过比色法进行检测。另外MDA-TBA受535nm波长激发光激发，在553nm波长发出荧光，因此，可以通过荧光法检测MDA浓度。荧光法相对比色法灵敏度提高一个数量级。
反应示意图如下：
试剂盒以比色法检测线性范围为1.56-50μM，灵敏度≤1.56μM；荧光法检测线性范围为0.156-5μM，灵敏度≤0.156μM
适用：本试剂盒能够检测动物血浆、血清、尿液等液体样本中MDA含量。
组成：
| 组份名称 | 规格 | 数量 |
| MDA标准品(1mM) | 200μl/管 | 1 |
| TBA | 50mg/管 | 1 |
| TBA配制液 | 7.5ml/瓶 | 1 |
| SDS溶液 | 12ml/瓶 | 1 |
| BHT溶液（100×） | 1ml/管 | 1 |
储存条件：-20℃储存，一年有效。TBA配制成溶液后，可4℃避光储存一周。SDS溶液使用前，请恢复至室温并彻底溶解后使用，首次使用后4℃储存即可。
需要而未提供的试剂及器材
1. 超纯水
2. 0.1M PBS(PH7.0-7.4)和EDTA
3. 系列可调节量程移液器及吸头
4. 干净的试管、离心管及96孔板
5. 酶标仪
操作步骤：
1. 样品的准备
血浆样品的准备：取新鲜抗凝血液，4℃，1000g离心10分钟，上清为血浆。取上清用于MDA的测定不立即测定的样品可以-70℃保存。
血清样品的准备：取新鲜血液，室温凝固30min，2000g离心10分钟，上清为血清。取上清用于MDA测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。
尿液样品的准备：取新鲜尿液，4℃静置30min去除不溶物，取上清用于MDA的测定。不立即测定的样可以-70℃保存。
2. 试剂盒的准备
2.1 TBA溶液的配制：将本试剂盒提供的1管50mg TBA倒入50ml离心管中，再加入7.5ml TBA配置震荡2分钟溶解TBA，然后加入17.5ml的纯水，彻底溶解TBA，可以超声助溶，即为TBA溶液，浓度为2mg/ml。
3. 标准品的准备
比色法标准品的配制：在1.5ml离心管中，加入950μl纯水，再取50μl的1 mM浓度MDA标准品加入离心管中配制50μM浓度MDA标准品；然后取另外5根1.5ml离心管，分别加入500 μl纯水，再吸取500μl的 50μM浓度MDA标准品依次倍倍稀释为25、12.5、6.25、3.12、1.56μM浓度。
荧光法标准品的配制：在1.5ml离心管中，加入1ml纯水，再取5μl的1mM浓度MDA标准品加入离心管中配制5μM浓度MDA标准品；然后取另外5根1.5ml离心管，分别加入500μl纯水，再将500μl的5μM浓度MDA标准品依次倍倍稀释为2.5、1.25、0.625、0.312、0.156μM浓度。
测定方法
1. 在1.5ml离心管中，按下表进行配制：
| 空白管 | 标准品管 | 样品管 | 对照管 | |
| 纯水 | 100μl | 200μl | ||
| 标准品 | 100μl | |||
| 待测样品 | 100μl | 100μl | ||
| SDS溶液 | 100μl | 100μl | 100μl | 100μl |
| TBA溶液 | 200μl | 200μl | 200μl |
2. 将离心管置于95℃水浴或金属浴反应30分钟，然后冰浴冷却至室温。
3. 10000g离心10min，取200 μl上清溶液，测定吸光度（535nm）或发射的荧光强度（ex535nm-em553nm）。
数据处理
利用MDA标准品浓度为横坐标，吸光度值或发射荧光值为纵坐标制作标准曲线，并获得横纵坐标之间的函数关系式，然后利用标准曲线和各样品的吸光度值或发射荧光值计算样品的MDA浓度。MDA标曲测定结果如下图所示：
参考文献
1. Armstrong, D., and Browne, R. (1994). Free Radicals in Diagnostic Medicine. 366: 43-58.
2. Armstrong, D., et al. (1998). Free Radicals and Antioxidant Protocols. 108:315-324.
3. Yagi, K. (1998). Free Radicals and Antioxidant Protocols. 108: 101-106.
注意事项
1. 血红蛋白对测定有一定干扰，请尽量避免血浆和血清制备过程中的溶血。
2. TBA配制成溶液后不够稳定，要在4℃避光储存，一周内用完。
3. 初次使用试剂盒时，粉末试剂和小体积液体试剂请适当离心后使用。
4. 本产品仅限专业人员用于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
近日，北京普利莱基因技术有限公司获得“国家高新技术企业”证书，高新技术企业的认定，是对企业的核心自主知识产权、科技成果转化能力、研发实力、团队建设、成长性指标和人才结构等综合能力的全方位考评。
此项认定不仅是科研企业在业内的最高荣誉之一，也是目前国内对企业在科技综合实力方面最权威的评价。这一殊荣的获得，是国家对普利莱在研发和技术创新能力的充分肯定和认可。
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