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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0065-100T/48S
- 规格：
100管/48样
Na+ K+-ATP酶活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC0065
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五 | 液体3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂七 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂八 | 液体5 mL×1瓶 | 常温保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
- 试剂三：临用前取1支加1 mL蒸馏水溶解，现用现配。用不完的试剂-20℃分装保存一周。
- 试剂六：用时加入5 mL蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
- 试剂七：用时加入5 mL蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
- 标准品：10 μmol/mL标准磷贮备液。将标准品20倍稀释，即取 0.1 mL标准品加1.9 mL蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/mL标准磷应用液，现用现配。
- 定磷剂的配制：按H2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1（体积比）的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据实验用量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：
Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
1、由于每一个样都必须做对照，本试剂盒100管保证测 48份Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
实验实例：
- 取0.1g小鼠心脏加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清置冰上，之后用96孔板按照测定步骤操作，测得计算A测定=0.741，A对照=0.509，A标准=0.280，A空白=0.043，按样本质量计算酶活得：
Na+K+-ATP酶活力(U/g 质量)=7.5×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）÷W=73.42 U/g质量。
- 取0.1g稗草加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清置冰上，之后用96孔板按照测定步骤操作，测得计算A测定=0.275，A对照=0.239，A标准=0.280，A空白=0.043，按样本质量计算酶活得：
Na+K+-ATP酶活力(U/g质量)=7.5×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）÷W=11.39 U/g质量。
- 取100μL小鼠血浆检测，用96孔板测得A测定=1.114，A对照=1.054，A标准=0.280，A空白=0.043，按液体体积计算酶活得：
Na+K+-ATP酶活力（U/mL）=7.5×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）=1.90 U/mL。
相关发表文献：
- Fangzhou Chen,Ying Zhao,Huizhao Chen,et aL. MicroRNA-98 reduces amyLoid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondriaL dysfunction through the Notch signaLing pathway via HEY2 in ALzheimer's disease mice. InternationaL JournaL of MoLecuLar Medicine. October 2018;(IF2.928)
[2] Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,et aL. Transcriptomic anaLysis reveaLs effects of fucoxanthin on intestinal gLucose transport. JournaL of FunctionaL Foods. October 2018;(IF3.197)
[3] Li M, Jiang C, Zhang Y, et al. Activities of Amphioxus GH-like protein in osmoregulation: insight into origin of vertebrate GH family[J]. International journal of endocrinology, 2017, 2017.
参考文献：
[1] Luo L G, MacLean D B. Effects of thyroid hormone on food intake, hypothalamic Na/K ATPase activity and ATP content[J]. Brain research, 2003, 973(2): 233-239.
[2] Cornelius F. Modulation of Na, K-ATPase and Na-ATPase activity by phospholipids and cholesterol. I. Steady-state kinetics[J]. Biochemistry, 2001, 40(30): 8842-8851.
相关系列产品：
BC0960/BC0965 Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒
BC0300/BC0305 ATP含量检测试剂盒
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文献和实验Engineered Biomimetic Nanovesicles Based on Neutrophils for Hierarchical Targeting Therapy of Acute Respiratory Distress Syndrome
| AuthorXiaonan Li, Qi Qiao, Xiong Liu, Qian Hu, Yulin Yu, Xianya Qin, Tianyi Tian, Yinmei Tian, Xiangjun Ou, Boning Niu, Conglian Yang, Li Kong, Zhiping Zhang | Publish_toACS Nano |
| IF17.1000 | PMID38166370 |
。 6. 双链DNA探针和靶DNA的变性： 杂交反应进行时，探针和靶核酸都必须是单链的。如果用双链DNA探针进行杂交（包括检测RNA时），双链DNA探针在杂交前必须进行变性。探针变性后要立即进行杂交反应，不然解链的探针又会重新复性。杂交液： 杂交液内除含一定浓度的标记探针外，还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血清白蛋白及载体DNA或RNA等。 杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加，可以减低探针与组织标本之间的静电结合。甲酰胺可使Tm降低，杂交液中含每1%的甲酰胺可分
