- ￥1800
- YLKBIO
- YLK-XB692
- 进口传代
- 2025年12月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞
- 细胞类型：
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
3D4/21
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞
- 规格：
T25培养瓶
母细胞3D4来源于pSV3neo质粒转染猪原代肺泡巨噬细胞得到的。该克隆通过G418筛选得到。
| 细胞英文名称 | 3D4/21 | 细胞中文名称 | 猪肺泡巨噬细胞 | |
| 形态特性 | 上皮样 | 生长特性 | 巨噬细胞样 | |
| 培养体系 | RPMI-1640+10%FBS；+ 酮酸钠 ，1mM；+ NEAA，0.1mM；+ Hepes，10mM；+ L-GLU，2mM；+ 葡萄糖，2.2g/l； | |||
| 传代方法 |
|
传代情况 | ||
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | |||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | |||
STR：
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
3D4/21 猪肺泡巨噬细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验1、细胞培养所用溶液及其配制 1×RPMI1640及：按照产品说明配制，过滤除菌，4℃保存备用。 新生牛血清：56℃灭活30min，-20℃保存备用。 2×104U/ml青、链霉素液（双抗）：青链霉素各2×106 U溶于100ml灭菌双蒸水中，过滤除菌，分装，-20℃保存备用。 10×Na2EDTA-胰酶溶液（2.5%）：Na2EDTA 0.2g，NaCl 8.0g，KCl 0.2g ，Na2HPO4.12H2O 2.89g，KH2PO
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