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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc
- 细胞类型:
小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
B16-F10/luc
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc
- 规格:
T25培养瓶
该细胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤,可以产生黑色素,同基因小鼠体内移植可成瘤
| 细胞英文名称 | B16-F10/luc | 细胞中文名称 | 小鼠黑色素瘤带荧光素酶 |
| 形态特性 | 梭形 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | 1640+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:3传代;2~3天1次。 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


小鼠黑色素瘤带荧光素酶;B16-F10/luc收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验基因MYC在小鼠自发性肝癌形成过程中的作用。 5. 病毒载体基因治疗 Systemic tumor targeting and killing by Sindbis viral vectors NATURE BIOTECHNOLOGY 2004, 22(1):70-77 本文依据Sindbis病毒对癌细胞表面超量表达的LAMR的识别的机理,以荧光素酶基因分别标记病毒和癌细胞, 观察标记的病毒在体内对癌细胞的靶向识别和特异性杀伤。 6. 免疫治疗 Revealing
量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
基因标记。标记细胞的方法基本上是通过分子生物学克隆技术,将荧光素酶的基因插到预期观察的细胞的染色体内,通过单克隆细胞技术的筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。目前,常用的细胞株基本上都已标记好,市场上已有销售。将标记好的细胞注入小鼠体内后,观测前需要注射荧光素酶的底物—荧光素,为约280道尔顿的小分子。荧光素脂溶性非常好,很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光素酶标记的细胞发光30~45分钟。每次荧光素酶催化反应只产生一个光子,这是肉眼无法观察到的,精诺真公司(Xenogen Corp










