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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
EBV转化淋巴细胞系 Akata
- 细胞类型:
EBV转化淋巴细胞系 Akata
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
Akata
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
EBV转化淋巴细胞系 Akata
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
EBV转化淋巴细胞系 Akata
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
EBV转化淋巴细胞系 Akata
- 规格:
T25培养瓶
从一名患有伯基特淋巴瘤的日本患者身上建立的爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)产生细胞系。其他名称为Akata EC
| 细胞英文名称 | Akata | 细胞中文名称 | EBV转化淋巴细胞系 |
| 形态特性 | 形态淋巴细胞样 | 生长特性 | 悬浮生长 |
| 培养体系 | RPMI-1640+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


EBV转化淋巴细胞系 Akata收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验淋巴细胞系 淋巴细胞是具有特异免疫识别功能的细胞系,人和哺乳类动物的淋巴细胞系是由形态相似、功能各异的不均一细胞群所组成。按其个体发生、表面分子和功能的不同,可将淋巴细胞系分为T细胞和B细胞二个亚群,每个亚群又可分为不同的亚类。另外还有一群单核细胞,其来源可能与淋巴细胞相关,但不具有特别识别功能,称为天然杀伤细胞(natural killer cell,NK)可归类为第三群淋巴细胞。 成熟的T和B细胞均为单核的小淋巴细胞。在光学显微镜下,单纯
佚名 淋巴细胞是具有特异免疫识别功能的细胞系,人和哺乳类动物的淋巴细胞系是由形态相似、功能各异的不均一细胞群所组成。按其个体发生、表面分子和功能的不同,可将淋巴细胞系分为T细胞和B细胞二个亚群,每个亚群又可分为不同的亚类。另外还有一群单核细胞,其来源可能与淋巴细胞相关,但不具有特别识别功能,称为天然杀伤细胞(natural killer cell,NK)可归类
实验步骤采血:需要在严格无菌条件下采血。肝素抗凝,室温保存,24hr-72hr转化效率高。也有保存更长时间,采血后不要将血液置冰箱中,长途运输也不要冷藏。分离淋巴细胞:采集血液4-5mL,与2mL1640(含1%双抗)在离心管内混合,然后缓慢沿管壁注入淋巴分离液(已37℃预热),3000rpm离心30min。收集白细胞层,转移至另一离心管中,加入10mL1640(含1%双抗),轻轻吹打均匀,1500 rpm离心15min。弃上清,如此反复洗涤3次,收集白细胞。转化取1 mL全培











