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文献和实验梭菌。PCR 反应体系和参数见附表 2 和表 3。反应体系中各试剂的量可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当的调整。PCR 检测时反应体系应设置阳性对照、阴性对照和空白对照。用 A、B、E、F 型肉毒梭菌的基因组 DNA 作阳性对照,用非肉毒梭菌基因组 DNA 作阴性对照,用无菌超纯水作空白对照。5. 凝胶电泳检测 PCR 产物 用 0.5 X TBE Buffer 制备 1.2%~1.5% 的琼脂糖凝胶(凝胶加热融化后冷却至 60 ℃ 左右加入 EB 至 0.5 μg/ ml),将 10 μL
:主要由微滴板载盒、滑板、传动带、滑轨和走板电机等组成。磁力传动可提高整机的密封性,微滴板载盒与其驱动机构之间由机壳左部的导板完全隔离。在磁力作用下,微滴板载盒在机壳左部的导板内来回运动,完成微滴板载盒的进退功能。 (3)压力和真空单元:主要由真空/压力泵、真空管路、压力管路、电磁阀、洗液瓶和废液瓶等组成。 (4)电源开关、处理器控制单元及外设:电源开关为电磁阀、升降电机,提供直流电源。处理器系统由单片机、程序存储器、数据存储器及相应的锁存译码芯片构成,通过I/O接口来控制键盘和显示屏等外设
原理】 1.DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶作用下,可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点,可用于PCR产物的克隆和测序。
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