DEAE葡聚糖凝胶A-50/二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A-5

DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化免疫球蛋白

(一)　原理 　　DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85～7.5)，其余均属酸性蛋白。在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通过柱层析γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG

凝胶过滤填料的分离范围表

-50 中 分离范围 1500-30000Sephadex G-50 Medium 葡聚糖凝胶 G-50 中 分离范围 1500-30000Sephadex G-75 葡聚糖凝胶 G-75 分离范围 3000-80000Sephadex G-75 葡聚糖凝胶 G-75 分离范围 3000-80000DEAE Sepharose FF DEAE琼脂糖凝胶 FF 分离范围：3000-80,000Sephadex G-100 葡聚糖凝胶 G-100 分离范围 4000

层析技术概念、原理、分类（凝胶层析和离子交换层析）

等。 葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。最常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列，不同型号的凝胶用G表示，G代表交联度，从G10到G100。“G”后面的数字表示每10g干胶的吸水量，可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。 2.  分离过程： 样品随洗脱液的流动下移 3.  影响凝胶柱层析的主要因素 （1）层析柱的选择与装填 层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀