- ￥1680
- YLKBIO
- YLK-XB141
- 进口传代
- 2025年12月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
人乳腺导管癌细胞；BT474
- 细胞类型：
人乳腺导管癌细胞；BT474
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
BT474
- 生长状态：
贴壁
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
人乳腺导管癌细胞；BT474
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人乳腺导管癌细胞；BT474
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
人乳腺导管癌细胞；BT474
- 规格：
T25培养瓶
该细胞系由LasfarguesE和CoutinhoWG建立，源于一名60岁患有浸润性乳腺导管癌的白人女性的实体瘤。
| 细胞英文名称 | BT474 | 细胞中文名称 | 人乳腺导管癌细胞 |
| 形态特性 | 上皮样；圆形、成团 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | RPMI1640+10%FBS(GIBCO) | ||
| 传代方法 | 1:2~1:3传代；2~3天换液1次。 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR：Amelogenin：X；CSF1PO：10，11；D13S317：11；D16S539：9，11；D18S51：13，18；D19S433：14，17；D21S11：28，32.2；D2S1338：19；D3S1358：17；D5S818：11，13；D7S820：9，12；D8S1179：10，12；FGA：22，25；TH01：7；TPOX：8；vWA：15，1
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
人乳腺导管癌细胞；BT474细胞操作步骤参考
1.首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。 若有，请拍照， 并及
时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2. 用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会
有少量从瓶壁脱落； 先不要打开培养瓶盖， 将细胞置于细胞培养箱内静置培养 4 小时以
上，以便稳定细胞状态。
3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮） 、 细胞形态、 所用
基础培养基、血清比例、所需细胞因子、 传代比例、换液频率等。
4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依
据） ； 建议细胞传代培养后， 定期拍照、 记录细胞生长状态。
5. 贴壁细胞：若细胞生长密度超过 80%，可正常传代；若未超过 80%， 移除细胞培养瓶内培
养基， 预留 5ml 左右继续培养，直至细胞密度达 80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧
松。
6. 悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管内， 1200rpm 离心 5min，
离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入 5ml 培养基吹打、重悬。镜检时， 若细
胞密度超过 80%，可将细胞悬液分至 2 个细胞培养瓶内培养，补加培养基至 5ml；若细胞
密度未超过 80%， 将细胞悬液移至原瓶继续培养， 直至细胞密度达 80%左右时再进行传代
操作。
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【思路解读】一篇 10 分 SCI 文章，教你入手「铁死亡」的国自然课题设计思路
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