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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
猪
- 应用:
科研
- 检测方法:
酶联免疫法
- 检测范围:
详询
- 规格:
96T/48T
96T
猪蓝耳病毒(PRRS)酶联免疫分析试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中猪蓝耳病毒(PRRS)表达。


实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪蓝耳病毒(PRRS)表达。用纯化的猪蓝耳病毒(PRRS)
抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中蓝耳病毒(PRRS)相结合,经洗涤除去未结合
的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的蓝耳病毒(PRRS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸
的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF
值相比较,从而判定标本中猪蓝耳病毒(PRRS)的存在与否。
猪蓝耳病毒(PRRS)酶联免疫分析试剂盒组成
| 1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml× 1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml× 1 瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml× 1 瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml× 1 瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12 孔× 8 条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml× 1 瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml× 1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
| 5 | 显色剂 A 液 | 6ml× 1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
| 6 | 显色剂 B 液 | 6ml× 1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

猪蓝耳病毒(PRRS)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不
触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

猪蓝耳病毒(PRRS)酶联免疫分析试剂盒计算和结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值( CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品 OD 值< 临界值( CUT OFF)者为猪蓝耳病毒(PRRS)阴性
阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值( CUT OFF)者为猪蓝耳病毒(PRRS)阳性。
猪蓝耳病毒(PRRS)酶联免疫分析试剂盒注意事项
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须
注意安全。
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文献和实验猪蓝耳病抗体(PRRS-Ab ) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中蓝耳病抗体(PRRS-Ab)含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗 原 夹心法测定 标本 中 猪 蓝耳病抗体(PRRS-Ab ) 水平。用纯化的 猪 蓝耳病 抗 原 包被微孔板,制成固相抗 原 ,往包被单抗的微孔中依次加入 蓝耳病抗体 ,再与HRP 标记
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猪口蹄疫病毒(FMDV ) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中 猪口蹄疫病毒(FMDV) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 猪口蹄疫病毒(FMDV ) 水平。用纯化的 猪口蹄疫病毒(FMDV ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 口蹄疫病毒(FMDV ) ,再与HRP 标记
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