流式线粒体膜电位检测

线粒体跨膜电位DYmt的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。　　

线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3，3-Dihexyloxacarbocyanine iodide[DiOC6（3）]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1]、Tetramethyl rhodamine methyl ester（TMRM）等可结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。　　

一、方法

将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine 123（1mM）或终浓度为DiOC6（25nM），JC-1（1mM），TMRM（100nM），37°C平衡30min，流式细胞计检测细胞的荧光强度。　　

二、注意事项

1、始终保持平衡染液中pH值的一致性，因为pH值的变化将影响膜电位。　　

2、与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低染料的浓度，引起假去极化。

荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料，能够自由穿过细胞膜，随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低，主要以单体形式存在，488nm激发时最大发射波长为527nm，呈绿色荧光，胞浆相对线粒体为低电位，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性；膜电位高时浓度高形成聚集体，488nm激发时的最大发射波长为590nm，红色荧光。活细胞线粒体膜电位高，线粒体内JC-1聚集体的浓度高，红色荧光很强，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性，而凋亡细胞则大多为FL1单阳性。
 

公司简介
广东文华氏生物科技有限公司
Guangdong Venvars Bio-Technology Co., Ltd

广东文华氏生物科技有限公司成立以来，一直致力于医学领域的高端学术服务，以“依托真实数据，缔造科研之梦”为宗旨，致力打造医学科研服务机构。

公司总部位于总投资500亿元的广州南沙区粤港澳大湾区精准医学产业基地，依托多家三甲医院、高水平大学及科学院，为临床科研及基础科研的展开提供支撑。拥有多个大型实验中心和生物资源库，提供包括基因组学、细胞生物学、蛋白鉴定及分析、病理组化、动物造模等多个实验平台服务。由来自哈佛大学、新南威尔士大学、皇家墨尔本理工大学、中山大学、中国科学院、广州中医药大学等知名科研院校的科学研究人员及教授组成的学术带头人队伍，以及由数十名实操经验丰富、理论知识过硬的实验人员组成的技术骨干团队，致力打造更先进、更专业的生物医学科研技术服务平台。

文华氏专注于生物医学课题研究、生物科研分析、临床研究、医学成果转化等服务，从基础研究到数据搜集、临床数据统计分析,服务全面,涵盖您的整个项目。目前已服务医药几十个细分学科的众多客户，成功协助他们开展严谨的科学研究，并帮助其在第一时间将临床发现与科研成果展现给世界。

为了让更多的科研学者拥有更多精力投入到学习和工作中去，让更多的科研成果展示在国际学术舞台，文华氏一直在努力。



 

实验服务

Experimental Services

文华氏拥有近3000m²生化实验室，包括分子生物学分析室、流式分析室、细胞工程操作室、共聚焦显微镜室、电泳凝胶成像室、解剖室、SPF动物房等，可为您提供包括组织病理切片、免疫组化、ELISA检测、PCR检测、western blot检测、流式分析、流式分选、细胞培养、动物造模多个实验服务，提供详细精准的实验数据。

同时，研究人员均熟练掌握LC-MS/MS质谱仪、分子生物学分析室、细胞工程操作室、电泳凝胶成像室，拥有用于细胞培养、核酸和蛋白质提取与纯化、分子杂交（Southern杂交、Northern杂交、Western杂交）、PCR扩增、分子克隆、细胞亚定位、极微量分光光度计、冷冻高速和超速离心机、双向电泳系统、冷水循环系统、实时荧光定量PCR仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、基因表达研究所需的基本实验操作，为各项目顺利展开提供保障。

实验服务囊括实验方向评估、实验方案设计、专业实验操作以及实验数据分析等。我们会基于提供的课题、研究思路及方向，进行实验方案设计，由专业研究人员按照每一个实验的标准SOP进行操作，记录原始实验数据，确保数据真实。



公司拥有实力雄厚、经验丰富的跨学科技术团队，保证您实验结果的真实性。技术骨干汇集来自哈佛大学、新南威尔士大学、皇家墨尔本理工大学、中山大学、中国科学院、广州中医药大学等知名科研院校的科学研究人员。其中多名博士分别主修肿瘤免疫及其他自身免疫疾病、干细胞分子材料、药理机制方向。

实验室实拍图

科研服务

Scientific Research Service 

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