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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
仕诺达生物
- 库存:
999
- 样本:
血清,血浆,组织匀浆等
- 标记物:
单纯疱疹病毒1型抗体IgG
- 适应物种:
人
- 应用:
高校,中科院,研发单位等
- 检测方法:
ELISA
- 检测范围:
临界值=阴性对照孔平均值+0.15
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2.0 |


使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被单纯疱疹病毒1型IgG抗原的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人单纯疱疹病毒1型抗体IgG(HSV1-IgG)的存在与否。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
- 预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 阴性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
| 阳性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
| 检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
- 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;
- 待测样本孔加待测样本50μL;
- 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性
4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性
试剂盒性能
- 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。
- 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
- 有效期:6个月
- 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
- 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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滁州仕诺达生物科技有限公司(Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.)是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司,公司主要研发销售生物试剂,为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。
公司主营产品包括:ELISA试剂盒、动物血制品、标准品、染色液、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等 经销品牌:Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁(未提及品牌,本公司也可以代买) 公司以“产品质量第一,服务至上”为企业宗旨,秉承友好共赢的合作理念,立志给科研界老师提供我们力所能及的帮助。如果您对我公司的产品及服务有兴趣,期待您给我们个机会在线留言或者来电咨询。
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文献和实验IgM时多采用捕获ELISA。 抗体捕获法为ELISA方法中的一种,用固相包被抗IgM (μ链)抗体和抗原特异性“捕获”待测的IgM抗体。 避免了间接ELISA在方法学上的缺陷,消除了特异性IgG和类风湿因子(RF)对实验结果的干扰。 捕获法特异性更强、灵敏度更高。 捕获法ELISA试剂盒: 经大量实验摸索,优化各个实验条件,我们研制了高质量的检测血清中HSV1 IgM抗体的捕获法ELISA试剂盒。 捕获法对选材要求更高:试剂中的抗原、酶联物等试剂具有
ELISA;货号:RE57361) (2)BE病毒壳抗原IgG抗体ELISA检测试剂盒(EBV VCA IgG ELISA;货号:RE56281) (3)BE病毒壳抗原IgA抗体ELISA检测试剂盒(EBV VCA IgA ELISA;货号:RE56271) (4)BE病毒早期抗原IgA抗体ELISA检测试剂盒(EBV EA IgA ELISA;货号:RE56211) (5)BE病毒早期抗原IgG抗体ELISA检测试剂盒(EBV VCA IgG ELISA;货号:RE56221
效应。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定簇的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体
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