- ￥184
- mlBio/酶联生物
- ml2757
- 国内
- 2025年07月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶GPT/ALT测试盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光 , 低温保存
- 规格：
100管/48样
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶GPT/ALT测试盒
微量法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标。
测定原理
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙tong酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
试验中所需的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液：60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体2.5 mL×1瓶， 4℃保存；
试剂二：液体2.5 mL×1瓶， 4℃保存；
试剂三：液体25 mL×1瓶，4℃保存；
样品测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。
2、在EP管或在96孔板中加入下列试剂
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 待测样本 | 10 | |
| 煮沸10min的待测样本 | 10 | |
| 试剂一 | 25 | |
| 蒸馏水 | 25 |
| 试剂二 | 25 | 25 |
| 试剂三 | 240 | 240 |
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶GPT/ALT测试盒
计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.4228x+0.0003 (x为标准品浓度，umol/mL；y为ΔA)。
2、血清（浆）GPT活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/mL）=（ΔA-0.0003）÷0.4228÷T×103=118.26×（ΔA-0.0003）
3、细胞、细菌和组织中GPT活力的计算
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1 nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/mg prot）=[（ΔA-0.0003）÷0.4228×V1]÷(V1×Cpr)÷T×103 =118.26×（ΔA-0.0003）÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2） 按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/g鲜重）=[（ΔA-0.0003）÷0.4228×V1]÷(W×V1÷V2)÷T×103 =118.26×（ΔA-0.0003）÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/104 cell）=[（ΔA-0.0003）÷0.4228×V1]÷(500×V1÷V2)÷T×103 =0.236×（ΔA-0.0003）
V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，20min；Cpr：蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万；103：1umol/mL=103 nmol/mL。
b.使用96孔板测定的计算公式如下：
1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.2114x+0.0003 (x为标准品浓度，umol/mL；y为ΔA)。
2、血清（浆）GPT活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/mL）=（ΔA-0.0003）÷0.2114÷T×103=236.5×（ΔA-0.0003）
3、细胞、细菌和组织中GPT活力的计算
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1 nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/mg prot）=[（ΔA-0.0003）÷0.2114×V1]÷(V1×Cpr)÷T×103 =236.5×（ΔA-0.0003）÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2） 按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/g鲜重）=[（ΔA-0.0003）÷0.2114×V1]÷(W×V1÷V2)÷T×103 =236.5×（ΔA-0.0003）÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol丙tong酸定义为一个酶活力单位。
GPT（nmol/min/104 cell）=[（ΔA-0.0003）÷0.2114×V1]÷(500×V1÷V2)÷T×103 =0.473×（ΔA-0.0003）
V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，20 min；Cpr：蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万；103：1umol/mL=103 nmol/mL。
1、标准曲线线性范围为：0.01 umol/mL -2 umol/mL。
2、ΔA线性范围为：0.01 -1。
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文献和实验临床上可根据酶浓度的变化用以辅助诊断。若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引起，表示脏器或组织损伤；若为细胞内酶合成增加所致，提示组织再生、修复、成骨或异位分泌，或提示有恶性肿瘤的可能；若为酶排泄障碍引起者说明有梗阻存在。同工酶的分析与鉴定则能反应疾病的部位、性质和程度。 一、转氨酶及其同工酶 （一）生物化学特性 转氨酶或称氨基转移酶是一组催化氨基在氨基酸与a-酮酸间转移的酶类，丙氨酸氨基转移酶（ALT）和（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）是其中最重
一系列检查肝脏功能的试验，是最常用的实验室检查项目之一。迄今已提出的肝功能试验达数百种，灵敏度与特异性各异。每个试验大多数情况下，仅反映肝功能一个方面，故常需数个试验联合应用，以尽量全面了解肝功能情况。目前，临床常用的试验有：（ 1）酶学检查：许多种酶活性测定均可用于肝病检查，但以血清转氨酶测定应用最广。转氨酶是一类催化氨基酸上的氨基向酮酸转移的酶，有专一性。体内有数十种之多，其中与肝关系密切、应用最广的是谷氨酸丙酮酸转氨酶（谷丙转氨酶 GPT，现又称丙氨酸氨基移换酶 ALT）及谷氨
丙氨酸氨基转移酶（ALT）：又称为谷丙转氨酶（GPT）是衡量肝功能的重要指标，许多低端医疗机构在做体检时仅测此一项生化项目。正常人一般在40U/L以内。干粉试剂复溶后为单试剂，液体试剂一般为双试剂，应用动力学法可计算结果。 蛋白：通常测白蛋白（ALB）和总蛋白（TP），终点法。一般用单试剂，有的TP试剂为双试剂，可用两点终点法测。蛋白质是血清的主要成份，大部份由肝细胞合成。通过蛋白的测定可以协助某些疾病的诊断。 血糖：血液中的葡萄糖简称血糖（GLU）。常用于糖尿病的诊断。正常
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