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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
高铁还原酶ferric-chelate reductase,FCR试剂盒
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光 , 低温保存
- 规格:
50管/48样
高铁还原酶ferric-chelate reductase,FCR试剂盒
分光光度法
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)催化高价铁螯合物中的Fe3+还原为Fe2+,在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。
测定原理:
FCR催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+和ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体15mL×1瓶,4℃避光保存;
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存;
试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):水mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至562nm,蒸馏水调零。
2、工作液配制:将试剂一、二、三以1:1:1的比例混合。临用前配制,用多少配多少
3、在1mL玻璃比色皿中,加入250μL样本上清和750μL工作液,混匀,记录初始吸光值A1和30min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。
高铁还原酶ferric-chelate reductase,FCR试剂盒
FCR活性计算公式:
标准曲线:y = 8.0014x + 0.0011,R2 = 0.9997;
(1)按样本质量计算
单位定义:每g样本每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR(nmol/min/g 鲜重)=(△A-0.0011)÷ 8.0014×1000×V标÷(V样÷V样总×W)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR(nmol/min/mg prot)=(△A-0.0011)÷8.0014×1000×V标÷(V样÷V样总×Cpr)÷T=4.166×(△A-0.0011)÷Cpr
V样总:加入提取液体积,1 mL;V样:反应中样品体积,250μL;V标:加入标准品体积 ,250μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol到nmol的转换系数。
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文献和实验血红蛋白的氧化物。亦称正铁血红蛋白。血铁为三价的衍生物,呈赤褐色。在弱酸性条件下具有 60纳米长的特异的吸收而呈现微绿色(酸性高铁血红蛋白),但在碱性条件下,这种特异的吸收消失,而呈现较深的红色(碱性高铁血红蛋白)。与二价铁的衍生物不同,不能与 O2 、 CO2 结合,但可以与 CN- 、 N- 3、 F- 、过氧化物等结合。在红细胞内氧血红蛋白可通过自氧化而产生,但主要是由于被 NADH——高铁血红蛋白还原酶所还原,生理的含量被控制在总血红蛋白的 1%以下。患有高铁
高铁血红蛋白定量测定简介-血液检验 【参考值】 正常人的高铁血红蛋白占血红蛋白的1%~3%. 【临床意义】 高铁血红蛋白血症分获得性和先天性两种。获得性多由于药物中毒所致,其中最主要的是氧化剂如亚硝酸盐、苯胺衍生物、磺胺等。先天性高铁血红蛋白血症主要包括先天缺乏高铁血红蛋白还原酶和含有血红蛋白M的病人。高铁血红蛋白含量如高至10%以上时,临床上可有青紫表现。
【参考值】正常人的高铁血红蛋白占血红蛋白的1%~3%. 【临床意义】 高铁血红蛋白血症分获得性和先天性两种。获得性多由于药物中毒所致,其中最主要的是氧化剂如亚硝酸盐、苯胺衍生物、磺胺等。先天性高铁血红蛋白血症主要包括先天缺乏高铁血红蛋白还原酶和含有血红蛋白M的病人医学教育网搜|索整理。高铁血红蛋白含量如高至10%以上时,临床上可有青紫表现。











