- ￥598
- mlBio/酶联生物
- mlE3530
- 国内
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
葡萄糖氧化酶glucose oxidase，GOD试剂盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光 , 低温保存
- 规格：
50管/24样
分光光度法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
GOD（EC 1.1.3.4）广泛存在于动物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生H2O2，是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
测定原理：
GOD催化产生H2O2，过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在500 nm有特征吸收峰，颜色深浅与GOD活性成线性关系。
试验中所需的仪器和设备：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
缓冲液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入20mL缓冲液充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存一个月；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入20mL缓冲液充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存一个月；
样品测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。
2、试剂一和试剂二的配制：参见试剂的组成和配制。
3、煮沸样本的准备：取500μL样本至新的EP管中，95℃水浴10min，冷却至室温后，8000g 4℃离心10min，取上清作为对照管的煮沸样本待测。
4、测定操作表
| 试剂（μL） | 对照管 | 测定管 |
| 样本 | 250 | |
| 煮沸样本 | 250 | |
| 试剂一 | 375 | 375 |
| 试剂二 | 375 | 375 |
葡萄糖氧化酶glucose oxidase，GOD试剂盒
GOD活力单位的计算
1、标准条件下测定回归方程为y = 2.8348x - 0.0169；x为H2O2标准品浓度（μmol/mL），y为ΔA。
1、血清（浆）GOD活力的计算
单位定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1nmol H2O2为一个酶活力单位。
GOD（nmol/min/mL）= (ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反总÷V样÷T×1000=58.8×(ΔA+0.0169)
2、细菌、细胞或组织GOD活力的计算
（1）按蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2为一个酶活力单位。
GOD（nmol/min/mg prot）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反总÷(V样×Cpr) ×1000÷T=58.8×(ΔA+0.0169)÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟催化产生1nmol H2O2为一个酶活力单位。
GOD（nmol/min/g鲜重）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反总÷(W×V样÷V样总) ×1000÷T=58.8×(ΔA+0.0169)÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位定义：每一万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol H2O2为一个酶活力单位。
GOD（nmol/min/104 cell）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反总÷(500×V样÷V样总) ×1000÷T=0.118×(ΔA+0.0169)
V反总：反应体系总体积，0.625mL； V样：加入样本体积，0.25mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，15 min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
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文献和实验从特异青霉（Penicillium notatum）等霉菌和蜂蜜中发现的酶。它能催化 D-葡萄糖 O2 D-葡糖酸（的δ -内酯） H2 O2 的反应。 EC1． 1． 3． 4．特异青霉（ P． notatum）的酶以其显有抗菌性而引入注意。因此，也有葡糖氧化酶（ notatin）的称呼，现已清楚，抗菌性是由于反应生成的 H2 O2 具灭菌作用。提纯物含有 2分子的 FAD，作为电子受体，除 O2 外，也能与 2， 6，二氯酚、靛酚反应。该酶对葡萄糖具有特异性。米氏
高等动物（牛、羊、狗、猫等）的肝脏及弱氧化醋杆菌（ Acetobacter subaxydans等）中存在的一种酶。催化 D-葡萄糖 NAD（ P） D-葡糖酸（的内酯） NAD（ P） H的反应。来源于动物的酶（ EC． 1． 1． 1． 47）既能利用 NAD，也能利用 NADP。虽然对 D-木糖也显有 25％的活性，但对其他天然己糖和戊糖则几乎没有作用（动物）。醋酸杆菌属（ Acetobacter）的酶（ EC1． 1． 1． 119）对 NADP具有是特异的作用，但也能作用
Assays of Glucose Entry, Glucose Transporter Amount, and Translocation
Glucose enters the cell by a carrier-mediated, facilitated diffusion mechanism, which, in most tissues, exhibits no energy or counter-ion requirements. In adipose tissues and skeletal muscle, glucose entry is acutely regulated by insulin
