类胡萝卜素carotenoid含量试剂盒

类胡萝卜素carotenoid含量试剂盒
分光光度法 
注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物，给植物和动物提供天然色素，是重要的抗氧化剂，并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞，组织和基因损毁，增强身体免疫系统，抵御感染，减少癌症风险，保护心脏。

测定原理：
样品通过混合有机溶剂萃取，类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离，在448nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：
天平、烘箱，100目筛、三角瓶或烧杯、漏斗，纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、正己烷



试剂组成和配制：
试剂一：液体100mL×3瓶，4℃保存。
试剂二：液体100mL×1瓶。4℃保存。
试剂三：液体80mL×1瓶。4℃保存。
试剂四：自备。（正己烷）

样本处理：
提取：称取0.5g样本，加入1.5mL试剂一 ，冰浴匀浆，超声破萃取15min(可改用振荡金属浴），15000g 25℃离心5min，取上层液转入10mL离心管中，沉淀用1.5mL试剂一重复提取2次，并将上层液并入上述10mL离心管中作为提取出的非皂化类胡萝卜素样品。
皂化：向上述非皂化类胡萝卜素样品中加入2mL试剂二，混匀，25℃室温避光皂化过夜，皂化完成后，加入3mL试剂三，混匀后，5000g 25℃离心5min，将上层类胡萝卜素提取相转入5mL离心管，用正己烷定容到5mL，置冰上待测。

测定操作表：

	空白管	测定管
样本（μL）		1000
正己烷（μL）	1000
于1mL玻璃比色皿，迅速测定450nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管

注意：空白管只需测定一次。

类胡萝卜素carotenoid含量试剂盒
计算公式：
类胡萝卜素含量（μg/g鲜重）= △A×V样总÷（ε×d）÷W= 31.25×△A÷W
V样总：提取液总体积，5mL；ε：类胡萝卜素消光系数，0.16；d：比色皿光径，1cm； W：样本质量，g

注意事项：
1.提取液易挥发，有毒性，操作时做防护措施。
2.测定必须能迅速，防止挥发造成误差。