果糖fructose ，FT含量试剂盒

果糖fructose ，FT含量试剂盒
分光光度法 
注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义：
果糖是一种为常见的己酮糖，是葡萄糖的同分异构体，以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中，能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是甜的单糖，广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

测定原理：
果糖与间苯二酚反应，生成有色物质，在480nm下有特征吸收峰。

所需的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水



试剂的组成和配制：
提取液：液体 100ml×1瓶，4℃保存；
试剂一：1mg/mL标准液10mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体 40ml×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体 15ml×1瓶，4℃避光保存；
试剂四：粉剂0.5g×1瓶，常温保存。

果糖提取：
称取0.1~0.2g样本，常温研碎；加入1mL提取液，适当研磨后快速转移到有盖离心管中；置于80℃水浴锅中10min（盖紧，以防止水分散失），振荡3~5次，冷却后，4000g，25℃离心10min，取上清；加入少量（约2mg）试剂四，80℃脱色30min（盖紧，以防止水分散失）；再加入1mL提取液，4000g，25℃离心10min，取上清液测定。

测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：

试剂（μL）	空白管	标准管	测定管
样本			100
试剂一		100
蒸馏水	100
试剂二	700	700	700
试剂三	200	200	200

混匀，95℃水浴反应30min（盖紧，以防止水分散失），冷却后测定480nm处光吸收值，空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。

果糖fructose ，FT含量试剂盒
果糖含量计算：
1、果糖含量（mg/mg prot）=（C标准管×V1）×(A3－A1)÷(A2－A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷（A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
2、果糖含量(mg/g鲜重）=（C标准管×V1）×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C标准管：标准管浓度，1mg/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，2mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。
注意：低检测限为100ng/g鲜重或1ng/mg prot