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卡梅德生物科技(天津)有限公司
- 服务名称:
鸡多克隆抗体制备服务
卡梅德生物能够为客户提供鸡多克隆抗体定制服务。鸡IgY抗体与一般哺乳动物IgG相比,具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶解能力,可作为理想的诊断试剂。卡梅德生物采用SPF级试验专用鸡,保证了抗体的产生背景纯正,产量更高;拥有成熟的多克隆抗体生产技术,保证制备的鸡源多抗效价满足要求。我们可以根据客户的需求,完成包括个性化的免疫程序、血清收集到抗体纯化、抗体标记、免疫学检测以及其他下游相关服务等一站式抗体定制服务。
鸡多克隆抗体简介:
鸡多克隆抗体主要成分为IgY,主要分布在鸡血清和鸡蛋中。类似于IgG, IgY包含两条重链和两条轻链,成“Y”字形结构,但含有两个抗原结合位点。IgY与IgG的不同在于两者之间几乎不存在交叉反应,这一特点让鸡多克隆抗体具有良好的免疫学效果,例如可以有效降低免疫学实验背景,使鸡源多抗成为更方便的实验工具。
鸡IgY多克隆抗体制备是使用鸡抗原对鸡进行免疫,激活其B淋巴细胞,并在其分泌的抗体转移到卵黄后,通过每月其产的鸡蛋进行纯化获取纯化的抗体。相比于其他物种的抗体,鸡多克隆抗体具有以下优势:
* 哺乳动物高度保守的基因产物能够引起鸡强烈的免疫反应并产生抗体;
* 鸡抗体适用于多重免疫标记实验,由于IgY与IgG不会产生同源交叉反应,并且IgY缺少Fc片段,不会结合细胞的Fc受体;
* 鸡多克隆抗体的生产便捷,只需收集免疫之后的母鸡鸡蛋,从鸡蛋中进行抗体纯化,消耗成本低;
* 所需抗原量小,单位产量高,特异性好,性质稳定易储存。
卡梅德生物能够为您提供一套完整的鸡多克隆抗体定制服务,包括抗原设计与合成、修饰,个性化免疫程序以及抗体纯化、标记等服务。同时,我们也可根据您的特殊需求,为您量身制定个性化的实验方案。
项目流程:
--采用120 d(也可以要求更短的免疫时间)免疫方法,ELISA法监控血清抗体滴度,制备得到的抗体保证满足效价要求和稳定性要求;
--严格的质控体系,标准化的操作流程,经验丰富的实验技术人员,GMP级操作水平,保证结果可靠;
--抗原免疫多样化:可接受蛋白,多肽以及各种小分子抗原,我们会对这些抗原做出综合评估,例如免疫原性等;
--多种抗体纯化技术:离子交换树脂,抗原亲和层析和密度梯度离心等方案可供选择;
--抗体检测平台多样化:ELISA,WB,IHC,质谱等多种抗体质量检测平台以评估抗体质量;
--抗体修饰多样化:酶修饰(HRP, AP, biotinylation),荧光标记(FITC,FAM等),融合标签(GST,His),磁珠标记,量子点标记等多种方式可供选择;
--服务可定制:标准型、保证型等多类型定制服务满足客户的实际需求。
不同物种的多克隆抗体比较:
公司介绍:
卡梅德生物科技(天津)有限公司作为国家高新技术企业,专注于为全球科学家和研究机构提供天然蛋白提取与发酵、重组蛋白定制表达服务,单、多克隆抗体开发,噬菌体文库构建与筛选服务;同时,基于我公司成熟的五大核心技术服务平台,成功研发了众多用于科学研究的重组蛋白、抗体、抗体药物靶点蛋白、工业酶、诊断原料等相关试剂。
核心平台:
---噬菌体抗体展示技术平台
卡梅德生物科技有限公司利用自有的噬菌体(M13,T7噬菌体)展示技术平台,能够为客户提供高性价比的重组VHH抗体(纳米抗体/驼类纳米抗体)制备方案,包括动物免疫,文库建立,文库筛选以及重组抗体的体外表达等。
---抗体工程技术平台
卡梅德生物科技的抗体工程平台包含单克隆抗体制备服务平台,多克隆抗体制备服务平台,抗体测序与改造平台。 单克隆抗体制备平台:基于杂交瘤技术的小鼠单抗技术平台,能够在2-3个月获得高亲和力与高特异性的单克隆抗体,同时基于噬菌体展示技术,我司能够制备多物种的重组单克隆抗体,包括小鼠,兔子,骆驼,羊驼以及人单抗。
多克隆抗体制备服务平台:能够为客户提供兔多抗,羊多抗,骆驼类多抗,牛多抗等多物种的抗体制备服务,根据不同的抗原类型,来自卡梅德生物的抗体专家会为您量身定做适合您需求的方案,以满足您的项目要求并节省您的宝贵时间。
抗体一级序列测序平台:为满足大量客户对抗体基因序列与氨基酸序列信息的需求,我们为客户提供De Novo抗体全长氨基酸序列解析和N端测序服务;同时我们设计积累多达80种杂交瘤抗体基因测序引物。
抗体改造技术平台:卡梅德生物技术的抗体改造平台包括嵌合抗体制备,抗体亲和力成熟以及抗体人源化服务。目前我们已经成功制备十几例嵌合抗体与人源化抗体,均成功交付。
---蛋白表达与纯化服务技术平台
卡梅德生物科技目前拥有四大蛋白表达平台,能为客户提供优质的蛋白表达技术服务。
哺乳动物表达平台: 目前公司拥有Freestyle CHO,Expi CHO,CHO-DG44,HEK293F,Vero等细胞系用于蛋白表达制备。公司秉承质量优先原则,全部统一采用Gibco细胞培养基和相关转染配套试剂,以保证每个批次的哺乳动物细胞蛋白表达产品高质量、高表达水平的交付。同时公司拥有的表达载体体系,相比市面常用蛋白表达载体,能够为客户提供更高纯度的蛋白。
昆虫细胞表达平台:目前公司常采用的昆虫表达细胞为SF9,配套使用的是来自Gibco的培养基,只为更快、更好地为客户提供高质量的产品。利用该蛋白表达平台,我们已经成功制备了多种人源跨膜蛋白,包括多种GPCR家族成员蛋白。
原核蛋白表达平台:大肠杆菌(E.coli)重组蛋白表达技术经过多年的发展,已经积累了很多的经验。但如果要在大肠杆菌表达体系获得不错的可溶以及高产量的蛋白表达,一个全方位设计的表达策略必不可少。卡梅德生物科技的专家团队在蛋白表达和抗体制备方面具有丰富的经验和知识储备,针对每位客户的需求,我们的都会提供具体的方案设计。
酵母蛋白表达平台:毕赤酵母,酿酒酵母等蛋白表达体系,适用于需要真核表达蛋白,同时兼具产量与性价比的项目需求特点。
植物表达平台:为了提供更好的服务,卡梅德生物携手国内重点科研单位共同为客户提供基因烟草瞬时转染技术的植物蛋白表达服务,项目从设计构建到蛋白表达只需要4-6周。该技术平台能够为客户在较短的时间内获得高纯度,高质量的植物来源的蛋白,已解决大部分植物蛋白在上述几大蛋白表达系统中不溶或不表达的难题。
---蛋白批量发酵平台
超高密度发酵技术:卡梅德生物科技能够为客户提供5L,10L,30L,80L体积的贴壁细胞高密度发酵技术服务(微载体贴壁培养技术),人源细胞贴壁细胞培养密度高达4x106个/ml,适用于病毒转染类型的蛋白高产量表达发酵,能够做到1g/L发酵水平。利用该技术平台,我们目前完成的重组抗体发酵表达记录高达4.7g/L发酵水平。
同时,借助有氧发酵技术,我们能够为客户提供原核和酵母的超高密度发酵服务,采用有氧发酵类型的原核发酵技术,蛋白产量比传统的原核发酵要高(相差接近100倍蛋白产量和得率)。
---蛋白纯化技术平台:
我司分别配制了Akta和BioRad Biological的蛋白纯化仪,同时拥有GE全套填料,包括Sphedax 75/200,500, G25,G100,CMFF,Q-FF,DEAE以及不同规格的预装柱等,能够在1-2周内为客户完成一套蛋白纯化的工艺开发小试方案。我司的科研团队成员均来自国内生物制药企业,硕士博士学历占比98%,因此有能力为客户提供快速,高质量天然蛋白和跨膜蛋白的纯化等优质服务。
---稳定细胞系筛选平台与基础分子生物平台
稳定细胞系构建平台:卡梅德生物可为客户定制不同类型的稳定细胞系构建与筛选服务,如利用Crisper/Cas9的多物种、多细胞系来源的细胞沉默,敲除,过表达等稳定细胞系;同时我们也为客户提供基于电转或脂质体转染(Lipofectin2000/3000)的稳定转染细胞系构建服务,如CHO细胞蛋白高表达细胞株等。
卡梅德生物的基础分子生物学平台承担了包括基因克隆,蛋白定量,免疫印迹检测(SDS-PAGE、WB),宿主核酸检测,蛋白抗体亲和纯化,ELISA操作,内毒素检测,HPLC分析,免疫组化,IP,免疫浊度,流式细胞术等服务。
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文献和实验【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体
、rSh28GST抗原加空质粒和rSh28GST编码质粒分别免疫小鼠,发现应用DNA免疫比蛋白质免疫可以得到较长时间稳定抗体免疫反应,其原因是质粒骨架具有佐剂作用。 DNA 免疫鸡制备IgY抗体 鸡作为实验动物已有很多年的历史,而近年来其已经成为一种发展很快的生产抗体的动物,其中IgY是鸡蛋黄及鸡血中的主要抗体。
制备多克隆抗体的佐剂 如用可溶性蛋白质抗原免疫家兔或山羊,在加用佐剂时一次注入量一般为0.5~1mg/kg。如不加佐剂,则抗原剂量应加大10~20倍。佐剂有福氏(Freund’s)佐剂、脂质体佐剂、氢氧化铝佐剂、明矾佐剂以及免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ICOM)等。 其中最常用的是福氏佐剂,根据其组成分为完全福氏佐剂(CFA)和不完全福氏佐剂(IFA)两种。IFA通常由羊毛脂1份、石腊油5份组成,每毫升IFA中
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