eSpCas9-LentiCRISPR v2

[名称首字母] P
[载体宿主] 哺乳细胞
[高拷贝/低拷贝] 高拷贝
[筛选标记] 嘌呤霉素（Puromycin）
eSpCas9LentiCRISPRv2载体基本信息
质粒名称:eSpCas9-lentiCRISPR v2，eSpCas9-LentiCrisprV2
载体抗性:氨苄霉素
完整质粒大小:14873 bp
载体类型:哺乳细胞表达，Lentiviral, CRISPR
筛选标记:嘌呤霉素
高拷贝/低拷贝:高拷贝
生长条件:37 ℃
插入基因信息
插入基因名称:eSpCas9
物种来源:Synthetic
插入大小:4200 bp
基因又名:S. pyogenes CRISPR-Cas9， enhanced specificity SpCas9 (eSpCas9)
启动子EFS-NS
标签/融合蛋白:FLAG (C terminal on insert)
克隆方法:限制性内切酶
5' 克隆位点:AgeI, XbaI, AfeI(未破坏)
3' 克隆位点:BamHI(未破坏)
5' 测序引物hEF1aprom-F
3' 测序引物WPRE-R
备注:Enhanced specificity SpCas9 (eSpCas9),增强特异性SpCas9（eSpCas9）也称为SpCas9（K848A/K1003A/R1060A），提高了Cas9蛋白对靶点基因的特异性，由Broad研究所张峰实验室构建（Slaymaker et al。2016年）。eSpCas9能够减少超过10倍的对目的基因的脱靶效应，同时保持对靶基因强大的编辑效率。