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- 2025年07月15日
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文献和实验Expression of a cDNA in E.coli in order to prepare an antiserum
an antiserum. As an alternative, the cDNA can be expressed in E.coli as a translational fusion and the expressed protein used to prepare the antiserum. This is normally done as fusion constructs with e.g. -galactosidase ( LacZ
Maxiprep of plasmid DNA from E.coli protocol
Solutions/reagents: LB broth + selective marker 50% sterile glycerol TEG (25mM Tris-Cl, 10mM EDTA, 50mM dextrose) 20 mg/ml lysozyme 10% SDS 4M NaOH autoclaved water Solution 3 (3M potassium-acetate, 2M acetic acid
E.coli genomic library construct 求教
最近我在做一个E.coli genomic library construct，遇到一些问题，向论坛上的大侠请教。请帮忙看看问题出在哪里。万分感谢！ 我的方法流程如下： 1。用SDS和蛋白酶K提取E.coli genomic DNA (用的是E.coli的一个突变菌株) 2。insert: Sau3AI digest E.coli genomic DNA, partail digestion, to get 2kb-5kb, 这一步我摸过酶切时间梯度，用0.1unit Sau3AI
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