D-Hank's缓冲液

利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化

kinases activate the serine/threonine kinases M n k l and M n k 2 . EMBO J.  16,  1909-1920. 13.  Fujita, H., Fujita, H., Takemura, M., et al. (2003) A n  ArabidopsisM A D S - b o x protein, A G L 2 4 , is specifically bound to and phosphorylated

家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法

Material and method：Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清，转换生长因子（TGF-β1）(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒（10ug/mL胰岛素，5ug/mL转铁蛋白，和0.5ng/mL亚硒酸盐）青霉素100U/Ml，链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

) 为标准 样品，发现这种方法比被动洗脱的效果好。当凝胶上样量为5jug 时，回收效率分别为： BSA   8 9 % 和 PhosB 5 8 % ^ 被 动 洗 脱 （ 将捻碎的蛋白质条带浸泡在I X 电泳缓冲液过夜） 无法回收到磷酸酶B ，并且只能回收加样的 B S A 的 39 %   ( 表 27-1)。在 进 行 MALDITOF  M S 之前，将浓缩蛋白质与基质共结晶，进一步去除残留杂质。混合蛋白质溶液 和基质溶液[芥子酸，l 〇 mg/m L 溶于乙腈/水 （3  :  7)]，置