- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1118
- 2025年07月10日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pART27
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pART27地杆菌表达质粒
别称: pART27
质粒属性
质粒简介
pART27地杆菌质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 11667 bp ds-DNA circular SYN 20-JUN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pART27
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 11667)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..11667
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 477..501
/note="RB T-DNA repeat"
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
promoter 793..823
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
CDS 867..1217
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITPSYLGDTIEYSSYASNALGALPYRPAGGRTSDIPRPWRPG
ACDVGPNSPYSESYYNSLAVVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEARTDRPS
QQLRSLNGEWKL"
promoter 889..907
/note="SP6 promoter"
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
misc_feature 925..1019
/note="MCS"
promoter complement(1027..1045)
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 1226..1409
/function="NOS promoter"
/note="NOS promoter"
/note="nopaline synthase promoter"
CDS 1410..2231
/codon_start=1
/gene="nos-nptII"
/product="fusion between an N-terminal peptide of nopaline
synthase and Tn5 aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin"
/translation="MAITLSATSLPISARIRAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAV
FRLSAQGRPVLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLG
EVPGQDLLSSHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVD
QDDLDEEHQGLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLG
VADRYQDIALATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
terminator 2856..3108
/note="NOS terminator"
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
misc_feature 3230..3254
/note="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
oriT 3808..3917
/note="incP origin of transfer"
mobile_element 3977..4744
/mobile_element_type="insertion sequence:IS1"
/note="IS1"
/note="prokaryotic transposable element"
CDS 5369..6517
/codon_start=1
/product="trans-acting replication protein that binds to
and activates oriV"
/note="trfA"
/translation="MNRTFDRKAYRQELIDAGFSAEDAETIASRTVMRAPRETFQSVGS
MVQQATAKIERDSVQLAPPALPAPSAAVERSRRLEQEAAGLAKSMTIDTRGTMTTKKRK
TAGEDLAKQVSEAKQAALLKHTKQQIKEMQLSLFDIAPWPDTMRAMPNDTARSALFTTR
NKKIPREALQNKVIFHVNKDVKITYTGVELRADDDELVWQQVLEYAKRTPIGEPITFTF
YELCQDLGWSINGRYYTKAEECLSRLQATAMGFTSDRVGHLESVSLLHRFRVLDRGKKT
SRCQVLIDEEIVVLFAGDHYTKFIWEKYRKLSPTARRMFDYFSSHREPYPLKLETFRLM
CGSDSTRVKKWREQVGEACEELRGSGLVEHAWVNDDLVHCKR"
rep_origin complement(7877..8465)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS 9562..10350
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/note="Spe"
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 11033..11646
/note="oriV"
/note="origin of replication for the bacterial F plasmid"
ORIGIN
1 tcgacatctt gctgcgttcg gatattttcg tggagttccc gccacagacc cggattgaag
61 gcgagatcca gcaactcgcg ccagatcatc ctgtgacgga actttggcgc gtgatgactg
121 gccaggacgt cggccgaaag agcgacaagc agatcacgat tttcgacagc gtcggatttg
181 cgatcgagga tttttcggcg ctgcgctacg tccgcgaccg cgttgaggga tcaagccaca
241 gcagcccact cgaccttcta gccgacccag acgagccaag ggatcttttt ggaatgctgc
301 tccgtcgtca ggctttccga cgtttgggtg gttgaacaga agtcattatc gtacggaatg
361 ccagcactcc cgaggggaac cctgtggttg gcatgcacat acaaatggac gaacggataa
421 accttttcac gcccttttaa atatccgtta ttctaataaa cgctcttttc tcttaggttt
481 acccgccaat atatcctgtc aaacactgat agtttaaact gaaggcggga aacgacaatc
541 tgatcatgag cggagaatta agggagtcac gttatgaccc ccgccgatga cgcgggacaa
601 gccgttttac gtttggaact gacagaaccg caacgattga aggagccact cagccccaat
661 acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt
721 tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtgagttagc tcactcatta
781 ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc ggctcgtatg ttgtgtggaa ttgtgagcgg
841 ataacaattt cacacaggaa acagctatga ccatgattac gccaagctat ttaggtgaca
901 ctatagaata ctcaagctat gcatccaacg cgttgggagc tctcccatat cgacctgcag
961 gcggccgcac tagtgatatc ccgcggccat ggcggccggg agcatgcgac gtcgggccca
1021 attcgcccta tagtgagtcg tattacaatt cactggccgt cgttttacaa cgtcgtgact
1081 gggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct ttcgccagct
1141 ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc agcctgaatg
1201 gcgaatggaa attgtaaacg ttaatgggtt tctggagttt aatgagctaa gcacatacgt
1261 cagaaaccat tattgcgcgt tcaaaagtcg cctaaggtca ctatcagcta gcaaatattt
1321 cttgtcaaaa atgctccact gacgttccat aaattcccct cggtatccaa ttagagtctc
1381 atattcactc tcaatccaaa taatctgcaa tggcaattac cttatccgca acttctttac
1441 ctatttccgc ccggatccgg gcaggttctc cggccgcttg ggtggagagg ctattcggct
1501 atgactgggc acaacagaca atcggctgct ctgatgccgc cgtgttccgg ctgtcagcgc
1561 aggggcgccc ggttcttttt gtcaagaccg acctgtccgg tgccctgaat gaactgcagg
1621 acgaggcagc gcggctatcg tggctggcca cgacgggcgt tccttgcgca gctgtgctcg
1681 acgttgtcac tgaagcggga agggactggc tgctattggg cgaagtgccg gggcaggatc
1741 tcctgtcatc tcaccttgct cctgccgaga aagtatccat catggctgat gcaatgcggc
1801 ggctgcatac gcttgatccg gctacctgcc cattcgacca ccaagcgaaa catcgcatcg
1861 agcgagcacg tactcggatg gaagccggtc ttgtcgatca ggatgatctg gacgaagagc
1921 atcaggggct cgcgccagcc gaactgttcg ccaggctcaa ggcgcgcatg cccgacggcg
1981 aggatctcgt cgtgacccat ggcgatgcct gcttgccgaa tatcatggtg gaaaatggcc
2041 gcttttctgg attcatcgac tgtggccggc tgggtgtggc ggaccgctat caggacatag
2101 cgttggctac ccgtgatatt gctgaagagc ttggcggcga atgggctgac cgcttcctcg
2161 tgctttacgg tatcgccgct cccgattcgc agcgcatcgc cttctatcgc cttcttgacg
2221 agttcttctg agcgggactc tggggttcga aatgaccgac caagcgacgc ccaacctgcc
2281 atcacgagat ttcgattcca ccgccgcctt ctatgaaagg ttgggcttcg gaatcgtttt
2341 ccgggacgcc ggctggatga tcctccagcg cggggatctc atgctggagt tcttcgccca
2401 ccccgatcca acacttacgt ttgcaacgtc caagagcaaa tagaccacga acgccggaag
2461 gttgccgcag cgtgtggatt gcgtctcaat tctctcttgc aggaatgcaa tgatgaatat
2521 gatactgact atgaaacttt gagggaatac tgcctagcac cgtcacctca taacgtgcat
2581 catgcatgcc ctgacaacat ggaacatcgc tatttttctg aagaattatg ctcgttggag
2641 gatgtcgcgg caattgcagc tattgccaac atcgaactac ccctcacgca tgcattcatc
2701 aatattattc atgcggggaa aggcaagatt aatccaactg gcaaatcatc cagcgtgatt
2761 ggtaacttca gttccagcga cttgattcgt tttggtgcta cccacgtttt caataaggac
2821 gagatggtgg agtaaagaag gagtgcgtcg aagcagatcg ttcaaacatt tggcaataaa
2881 gtttcttaag attgaatcct gttgccggtc ttgcgatgat tatcatataa tttctgttga
2941 attacgttaa gcatgtaata attaacatgt aatgcatgac gttatttatg agatgggttt
3001 ttatgattag agtcccgcaa ttatacattt aatacgcgat agaaaacaaa atatagcgcg
3061 caaactagga taaattatcg cgcgcggtgt catctatgtt actagatcga attaattcca
3121 ggcggtgaag ggcaatcagc tgttgcccgt ctcactggtg aaaagaaaaa ccaccccagt
3181 acattaaaaa cgtccgcaat gtgttattaa gttgtctaag cgtcaatttg tttacaccac
3241 aatatatcct gccaccagcc agccaacagc tccccgaccg gcagctcggc acaaaatcac
3301 cactcgatac aggcagccca tcagtccggg acggcgtcag cgggagagcc gttgtaaggc
3361 ggcagacttt gctcatgtta ccgatgctat tcggaagaac ggcaactaag ctgccgggtt
3421 tgaaacacgg atgatctcgc ggagggtagc atgttgattg taacgatgac agagcgttgc
3481 tgcctgtgat caaatatcat ctccctcgca gagatccgaa ttatcagcct tcttattcat
3541 ttctcgctta accgtgacag gctgtcgatc ttgagaacta tgccgacata ataggaaatc
3601 gctggataaa gccgctgagg aagctgagtg gcgctatttc tttagaagtg aacgttgacg
3661 atgtcgacgg atcttttccg ctgcataacc ctgcttcggg gtcattatag cgattttttc
3721 ggtatatcca tcctttttcg cacgatatac aggattttgc caaagggttc gtgtagactt
3781 tccttggtgt atccaacggc gtcagccggg caggataggt gaagtaggcc cacccgcgag
3841 cgggtgttcc ttcttcactg tcccttattc gcacctggcg gtgctcaacg ggaatcctgc
3901 tctgcgaggc tggccggcta ccgccggcgt aacagatgag ggcaagcgga tggctgatga
3961 aaccaagcca accaggggtg atgctgccaa cttactgatt tagtgtatga tggtgttttt
4021 gaggtgctcc agtggcttct gtttctatca gctgtccctc ctgttcagct actgacgggg
4081 tggtgcgtaa cggcaaaagc accgccggac atcagcgcta tctctgctct cactgccgta
4141 aaacatggca actgcagttc acttacaccg cttctcaacc cggtacgcac cagaaaatca
4201 ttgatatggc catgaatggc gttggatgcc gggcaacagc ccgcattatg ggcgttggcc
4261 tcaacacgat tttacgtcac ttaaaaaact caggccgcag tcggtaacct cgcgcataca
4321 gccgggcagt gacgtcatcg tctgcgcgga aatggacgaa cagtggggct atgtcggggc
4381 taaatcgcgc cagcgctggc tgttttacgc gtatgacagt ctccggaaga cggttgttgc
4441 gcacgtattc ggtgaacgca ctatggcgac gctggggcgt cttatgagcc tgctgtcacc
4501 ctttgacgtg gtgatatgga tgacggatgg ctggccgctg tatgaatccc gcctgaaggg
4561 aaagctgcac gtaatcagca agcgatatac gcagcgaatt gagcggcata acctgaatct
4621 gaggcagcac ctggcacggc tgggacggaa gtcgctgtcg ttctcaaaat cggtggagct
4681 gcatgacaaa gtcatcgggc attatctgaa cataaaacac tatcaataag ttggagtcat
4741 tacccaacca ggaagggcag cccacctatc aaggtgtact gccttccaga cgaacgaaga
4801 gcgattgagg aaaaggcggc ggcggccggc atgagcctgt cggcctacct gctggccgtc
4861 ggccagggct acaaaatcac gggcgtcgtg gactatgagc acgtccgcga gctggcccgc
4921 atcaatggcg acctgggccg cctgggcggc ctgctgaaac tctggctcac cgacgacccg
4981 cgcacggcgc ggttcggtga tgccacgatc ctcgccctgc tggcgaagat cgaagagaag
5041 caggacgagc ttggcaaggt catgatgggc gtggtccgcc cgagggcaga gccatgactt
5101 ttttagccgc taaaacggcc ggggggtgcg cgtgattgcc aagcacgtcc ccatgcgctc
5161 catcaagaag agcgacttcg cggagctggt attcgtgcag ggcaagattc ggaataccaa
5221 gtacgagaag gacggccaga cggtctacgg gaccgacttc attgccgata aggtggatta
5281 tctggacacc aaggcaccag gcgggtcaaa tcaggaataa gggcacattg ccccggcgtg
5341 agtcggggca atcccgcaag gagggtgaat gaatcggacg tttgaccgga aggcatacag
5401 gcaagaactg atcgacgcgg ggttttccgc cgaggatgcc gaaaccatcg caagccgcac
5461 cgtcatgcgt gcgccccgcg aaaccttcca gtccgtcggc tcgatggtcc agcaagctac
5521 ggccaagatc gagcgcgaca gcgtgcaact ggctccccct gccctgcccg cgccatcggc
5581 cgccgtggag cgttcgcgtc gtctcgaaca ggaggcggca ggtttggcga agtcgatgac
5641 catcgacacg cgaggaacta tgacgaccaa gaagcgaaaa accgccggcg aggacctggc
5701 aaaacaggtc agcgaggcca agcaggccgc gttgctgaaa cacacgaagc agcagatcaa
5761 ggaaatgcag ctttccttgt tcgatattgc gccgtggccg gacacgatgc gagcgatgcc
5821 aaacgacacg gcccgctctg ccctgttcac cacgcgcaac aagaaaatcc cgcgcgaggc
5881 gctgcaaaac aaggtcattt tccacgtcaa caaggacgtg aagatcacct acaccggcgt
5941 cgagctgcgg gccgacgatg acgaactggt gtggcagcag gtgttggagt acgcgaagcg
6001 cacccctatc ggcgagccga tcaccttcac gttctacgag ctttgccagg acctgggctg
6061 gtcgatcaat ggccggtatt acacgaaggc cgaggaatgc ctgtcgcgcc tacaggcgac
6121 ggcgatgggc ttcacgtccg accgcgttgg gcacctggaa tcggtgtcgc tgctgcaccg
6181 cttccgcgtc ctggaccgtg gcaagaaaac gtcccgttgc caggtcctga tcgacgagga
6241 aatcgtcgtg ctgtttgctg gcgaccacta cacgaaattc atatgggaga agtaccgcaa
6301 gctgtcgccg acggcccgac ggatgttcga ctatttcagc tcgcaccggg agccgtaccc
6361 gctcaagctg gaaaccttcc gcctcatgtg cggatcggat tccacccgcg tgaagaagtg
6421 gcgcgagcag gtcggcgaag cctgcgaaga gttgcgaggc agcggcctgg tggaacacgc
6481 ctgggtcaat gatgacctgg tgcattgcaa acgctagggc cttgtggggt cagttccggc
6541 tgggggttca gcagccagcg ctttactggc atttcaggaa caagcgggca ctgctcgacg
6601 cacttgcttc gctcagtatc gctcgggacg cacggcgcgc tctacgaact gccgataaac
6661 agaggattaa aattgacaat tgtgattaag gctcagattc gacggcttgg agcggccgac
6721 gtgcaggatt tccgcgagat ccgattgtcg gccctgaaga aagctccaga gatgttcggg
6781 tccgtttacg agcacgagga gaaaaagccc atggaggcgt tcgctgaacg gttgcgagat
6841 gccgtggcat tcggcgccta catcgacggc gagatcattg ggctgtcggt cttcaaacag
6901 gaggacggcc ccaaggacgc tcacaaggcg catctgtccg gcgttttcgt ggagcccgaa
6961 cagcgaggcc gaggggtcgc cggtatgctg ctgcgggcgt tgccggcggg tttattgctc
7021 gtgatgatcg tccgacagat tccaacggga atctggtgga tgcgcatctt catcctcggc
7081 gcacttaata tttcgctatt ctggagcttg ttgtttattt cggtctaccg cctgccgggc
7141 ggggtcgcgg cgacggtagg cgctgtgcag ccgctgatgg tcgtgttcat ctctgccgct
7201 ctgctaggta gcccgatacg attgatggcg gtcctggggg ctatttgcgg aactgcgggc
7261 gtggcgctgt tggtgttgac accaaacgca gcgctagatc ctgtcggcgt cgcagcgggc
7321 ctggcggggg cggtttccat ggcgttcgga accgtgctga cccgcaagtg gcaacctccc
7381 gtgcctctgc tcacctttac cgcctggcaa ctggcggccg gaggacttct gctcgttcca
7441 gtagctttag tgtttgatcc gccaatcccg atgcctacag gaaccaatgt tctcggcctg
7501 gcgtggctcg gcctgatcgg agcgggttta acctacttcc tttggttccg ggggatctcg
7561 cgactcgaac ctacagttgt ttccttactg ggctttctca gccgggatgg cgctaagaag
7621 ctattgccgc cgatcttcat atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat
7681 accgcatcag gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc
7741 tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg
7801 ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg
7861 ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac
7921 gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg
7981 gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct
8041 ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc aatgctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg
8101 tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct
8161 gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac
8221 tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt
8281 tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaaggac agtatttggt atctgcgctc
8341 tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca
8401 ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat
8461 atcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac
8521 gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt
8581 aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc
8641 aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg
8701 cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg
8761 ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca ataaaccagc
8821 cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta
8881 ttaaacaagt ggcagcaacg gattcgcaaa cctgtcacgc cttttgtgcc aaaagccgcg
8941 ccaggtttgc gatccgctgt gccaggcgtt aggcgtcata tgaagatttc ggtgatccct
9001 gagcaggtgg cggaaacatt ggatgctgag aaccatttca ttgttcgtga agtgttcgat
9061 gtgcacctat ccgaccaagg ctttgaacta tctaccagaa gtgtgagccc ctaccggaag
9121 gattacatct cggatgatga ctctgatgaa gactctgctt gctatggcgc attcatcgac
9181 caagagcttg tcgggaagat tgaactcaac tcaacatgga acgatctagc ctctatcgaa
9241 cacattgttg tgtcgcacac gcaccgaggc aaaggagtcg cgcacagtct catcgaattt
9301 gcgaaaaagt gggcactaag cagacagctc cttggcatac gattagagac acaaacgaac
9361 aatgtacctg cctgcaattt gtacgcaaaa tgtggcttta ctctcggcgg cattgacctg
9421 ttcacgtata aaactagacc tcaagtctcg aacgaaacag cgatgtactg gtactggttc
9481 tcgggagcac aggatgacgc ctaacaattc attcaagccg acaccgcttc gcggcgcggc
9541 ttaattcagg agttaaacat catgagggaa gcggtgatcg ccgaagtatc gactcaacta
9601 tcagaggtag ttggcgtcat cgagcgccat ctcgaaccga cgttgctggc cgtacatttg
9661 tacggctccg cagtggatgg cggcctgaag ccacacagtg atattgattt gctggttacg
9721 gtgaccgtaa ggcttgatga aacaacgcgg cgagctttga tcaacgacct tttggaaact
9781 tcggcttccc ctggagagag cgagattctc cgcgctgtag aagtcaccat tgttgtgcac
9841 gacgacatca ttccgtggcg ttatccagct aagcgcgaac tgcaatttgg agaatggcag
9901 cgcaatgaca ttcttgcagg tatcttcgag ccagccacga tcgacattga tctggctatc
9961 ttgctgacaa aagcaagaga acatagcgtt gccttggtag gtccagcggc ggaggaactc
10021 tttgatccgg ttcctgaaca ggatctattt gaggcgctaa atgaaacctt aacgctatgg
10081 aactcgccgc ccgactgggc tggcgatgag cgaaatgtag tgcttacgtt gtcccgcatt
10141 tggtacagcg cagtaaccgg caaaatcgcg ccgaaggatg tcgctgccga ctgggcaatg
10201 gagcgcctgc cggcccagta tcagcccgtc atacttgaag ctaggcaggc ttatcttgga
10261 caagaagatc gcttggcctc gcgcgcagat cagttggaag aatttgttca ctacgtgaaa
10321 ggcgagatca ccaaggtagt cggcaaataa tgtctaacaa ttcgttcaag ccgacgccgc
10381 ttcgcggcgc ggcttaactc aagcgttaga gagctgggga agactatgcg cgatctgttg
10441 aaggtggttc taagcctcgt acttgcgatg gcatcggggc aggcacttgc tgacctgcca
10501 attgttttag tggatgaagc tcgtcttccc tatgactact ccccatccaa ctacgacatt
10561 tctccaagca actacgacaa ctccataagc aattacgaca atagtccatc aaattacgac
10621 aactctgaga gcaactacga taatagttca tccaattacg acaatagtcg caacggaaat
10681 cgtaggctta tatatagcgc aaatgggtct cgcactttcg ccggctacta cgtcattgcc
10741 aacaatggga caacgaactt cttttccaca tctggcaaaa ggatgttcta caccccaaaa
10801 ggggggcgcg gcgtctatgg cggcaaagat gggagcttct gcggggcatt ggtcgtcata
10861 aatggccaat tttcgcttgc cctgacagat aacggcctga agatcatgta tctaagcaac
10921 tagcctgctc tctaataaaa tgttaggagc ttggctgcca tttttggggt gaggccgttc
10981 gcggccgagg ggcgcagccc ctggggggat gggaggcccg cgttagcggg ccgggagggt
11041 tcgagaaggg ggggcacccc ccttcggcgt gcgcggtcac gcgccagggc gcagccctgg
11101 ttaaaaacaa ggtttataaa tattggttta aaagcaggtt aaaagacagg ttagcggtgg
11161 ccgaaaaacg ggcggaaacc cttgcaaatg ctggattttc tgcctgtgga cagcccctca
11221 aatgtcaata ggtgcgcccc tcatctgtca gcactctgcc cctcaagtgt caaggatcgc
11281 gcccctcatc tgtcagtagt cgcgcccctc aagtgtcaat accgcagggc acttatcccc
11341 aggcttgtcc acatcatctg tgggaaactc gcgtaaaatc aggcgttttc gccgatttgc
11401 gaggctggcc agctccacgt cgccggccga aatcgagcct gcccctcatc tgtcaacgcc
11461 gcgccgggtg agtcggcccc tcaagtgtca acgtccgccc ctcatctgtc agtgagggcc
11521 aagttttccg cgaggtatcc acaacgccgg cggccggccg cggtgtctcg cacacggctt
11581 cgacggcgtt tctggcgcgt ttgcagggcc atagacggcc gccagcccag cggcgagggc
11641 aaccagcccg gtgagcgtcg gaaaggg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pART27地杆菌表达质粒
别称: pART27
| 原核抗性: | Str |
|---|---|
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 广宿主 |
|---|---|
| 载体用途： | |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Str |
| 筛选标记： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pART27地杆菌质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 11667 bp ds-DNA circular SYN 20-JUN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pART27
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 11667)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..11667
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 477..501
/note="RB T-DNA repeat"
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
promoter 793..823
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
CDS 867..1217
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITPSYLGDTIEYSSYASNALGALPYRPAGGRTSDIPRPWRPG
ACDVGPNSPYSESYYNSLAVVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEARTDRPS
QQLRSLNGEWKL"
promoter 889..907
/note="SP6 promoter"
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
misc_feature 925..1019
/note="MCS"
promoter complement(1027..1045)
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 1226..1409
/function="NOS promoter"
/note="NOS promoter"
/note="nopaline synthase promoter"
CDS 1410..2231
/codon_start=1
/gene="nos-nptII"
/product="fusion between an N-terminal peptide of nopaline
synthase and Tn5 aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin"
/translation="MAITLSATSLPISARIRAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAV
FRLSAQGRPVLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLG
EVPGQDLLSSHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVD
QDDLDEEHQGLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLG
VADRYQDIALATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
terminator 2856..3108
/note="NOS terminator"
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
misc_feature 3230..3254
/note="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
oriT 3808..3917
/note="incP origin of transfer"
mobile_element 3977..4744
/mobile_element_type="insertion sequence:IS1"
/note="IS1"
/note="prokaryotic transposable element"
CDS 5369..6517
/codon_start=1
/product="trans-acting replication protein that binds to
and activates oriV"
/note="trfA"
/translation="MNRTFDRKAYRQELIDAGFSAEDAETIASRTVMRAPRETFQSVGS
MVQQATAKIERDSVQLAPPALPAPSAAVERSRRLEQEAAGLAKSMTIDTRGTMTTKKRK
TAGEDLAKQVSEAKQAALLKHTKQQIKEMQLSLFDIAPWPDTMRAMPNDTARSALFTTR
NKKIPREALQNKVIFHVNKDVKITYTGVELRADDDELVWQQVLEYAKRTPIGEPITFTF
YELCQDLGWSINGRYYTKAEECLSRLQATAMGFTSDRVGHLESVSLLHRFRVLDRGKKT
SRCQVLIDEEIVVLFAGDHYTKFIWEKYRKLSPTARRMFDYFSSHREPYPLKLETFRLM
CGSDSTRVKKWREQVGEACEELRGSGLVEHAWVNDDLVHCKR"
rep_origin complement(7877..8465)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS 9562..10350
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/note="Spe"
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 11033..11646
/note="oriV"
/note="origin of replication for the bacterial F plasmid"
ORIGIN
1 tcgacatctt gctgcgttcg gatattttcg tggagttccc gccacagacc cggattgaag
61 gcgagatcca gcaactcgcg ccagatcatc ctgtgacgga actttggcgc gtgatgactg
121 gccaggacgt cggccgaaag agcgacaagc agatcacgat tttcgacagc gtcggatttg
181 cgatcgagga tttttcggcg ctgcgctacg tccgcgaccg cgttgaggga tcaagccaca
241 gcagcccact cgaccttcta gccgacccag acgagccaag ggatcttttt ggaatgctgc
301 tccgtcgtca ggctttccga cgtttgggtg gttgaacaga agtcattatc gtacggaatg
361 ccagcactcc cgaggggaac cctgtggttg gcatgcacat acaaatggac gaacggataa
421 accttttcac gcccttttaa atatccgtta ttctaataaa cgctcttttc tcttaggttt
481 acccgccaat atatcctgtc aaacactgat agtttaaact gaaggcggga aacgacaatc
541 tgatcatgag cggagaatta agggagtcac gttatgaccc ccgccgatga cgcgggacaa
601 gccgttttac gtttggaact gacagaaccg caacgattga aggagccact cagccccaat
661 acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt
721 tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtgagttagc tcactcatta
781 ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc ggctcgtatg ttgtgtggaa ttgtgagcgg
841 ataacaattt cacacaggaa acagctatga ccatgattac gccaagctat ttaggtgaca
901 ctatagaata ctcaagctat gcatccaacg cgttgggagc tctcccatat cgacctgcag
961 gcggccgcac tagtgatatc ccgcggccat ggcggccggg agcatgcgac gtcgggccca
1021 attcgcccta tagtgagtcg tattacaatt cactggccgt cgttttacaa cgtcgtgact
1081 gggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct ttcgccagct
1141 ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc agcctgaatg
1201 gcgaatggaa attgtaaacg ttaatgggtt tctggagttt aatgagctaa gcacatacgt
1261 cagaaaccat tattgcgcgt tcaaaagtcg cctaaggtca ctatcagcta gcaaatattt
1321 cttgtcaaaa atgctccact gacgttccat aaattcccct cggtatccaa ttagagtctc
1381 atattcactc tcaatccaaa taatctgcaa tggcaattac cttatccgca acttctttac
1441 ctatttccgc ccggatccgg gcaggttctc cggccgcttg ggtggagagg ctattcggct
1501 atgactgggc acaacagaca atcggctgct ctgatgccgc cgtgttccgg ctgtcagcgc
1561 aggggcgccc ggttcttttt gtcaagaccg acctgtccgg tgccctgaat gaactgcagg
1621 acgaggcagc gcggctatcg tggctggcca cgacgggcgt tccttgcgca gctgtgctcg
1681 acgttgtcac tgaagcggga agggactggc tgctattggg cgaagtgccg gggcaggatc
1741 tcctgtcatc tcaccttgct cctgccgaga aagtatccat catggctgat gcaatgcggc
1801 ggctgcatac gcttgatccg gctacctgcc cattcgacca ccaagcgaaa catcgcatcg
1861 agcgagcacg tactcggatg gaagccggtc ttgtcgatca ggatgatctg gacgaagagc
1921 atcaggggct cgcgccagcc gaactgttcg ccaggctcaa ggcgcgcatg cccgacggcg
1981 aggatctcgt cgtgacccat ggcgatgcct gcttgccgaa tatcatggtg gaaaatggcc
2041 gcttttctgg attcatcgac tgtggccggc tgggtgtggc ggaccgctat caggacatag
2101 cgttggctac ccgtgatatt gctgaagagc ttggcggcga atgggctgac cgcttcctcg
2161 tgctttacgg tatcgccgct cccgattcgc agcgcatcgc cttctatcgc cttcttgacg
2221 agttcttctg agcgggactc tggggttcga aatgaccgac caagcgacgc ccaacctgcc
2281 atcacgagat ttcgattcca ccgccgcctt ctatgaaagg ttgggcttcg gaatcgtttt
2341 ccgggacgcc ggctggatga tcctccagcg cggggatctc atgctggagt tcttcgccca
2401 ccccgatcca acacttacgt ttgcaacgtc caagagcaaa tagaccacga acgccggaag
2461 gttgccgcag cgtgtggatt gcgtctcaat tctctcttgc aggaatgcaa tgatgaatat
2521 gatactgact atgaaacttt gagggaatac tgcctagcac cgtcacctca taacgtgcat
2581 catgcatgcc ctgacaacat ggaacatcgc tatttttctg aagaattatg ctcgttggag
2641 gatgtcgcgg caattgcagc tattgccaac atcgaactac ccctcacgca tgcattcatc
2701 aatattattc atgcggggaa aggcaagatt aatccaactg gcaaatcatc cagcgtgatt
2761 ggtaacttca gttccagcga cttgattcgt tttggtgcta cccacgtttt caataaggac
2821 gagatggtgg agtaaagaag gagtgcgtcg aagcagatcg ttcaaacatt tggcaataaa
2881 gtttcttaag attgaatcct gttgccggtc ttgcgatgat tatcatataa tttctgttga
2941 attacgttaa gcatgtaata attaacatgt aatgcatgac gttatttatg agatgggttt
3001 ttatgattag agtcccgcaa ttatacattt aatacgcgat agaaaacaaa atatagcgcg
3061 caaactagga taaattatcg cgcgcggtgt catctatgtt actagatcga attaattcca
3121 ggcggtgaag ggcaatcagc tgttgcccgt ctcactggtg aaaagaaaaa ccaccccagt
3181 acattaaaaa cgtccgcaat gtgttattaa gttgtctaag cgtcaatttg tttacaccac
3241 aatatatcct gccaccagcc agccaacagc tccccgaccg gcagctcggc acaaaatcac
3301 cactcgatac aggcagccca tcagtccggg acggcgtcag cgggagagcc gttgtaaggc
3361 ggcagacttt gctcatgtta ccgatgctat tcggaagaac ggcaactaag ctgccgggtt
3421 tgaaacacgg atgatctcgc ggagggtagc atgttgattg taacgatgac agagcgttgc
3481 tgcctgtgat caaatatcat ctccctcgca gagatccgaa ttatcagcct tcttattcat
3541 ttctcgctta accgtgacag gctgtcgatc ttgagaacta tgccgacata ataggaaatc
3601 gctggataaa gccgctgagg aagctgagtg gcgctatttc tttagaagtg aacgttgacg
3661 atgtcgacgg atcttttccg ctgcataacc ctgcttcggg gtcattatag cgattttttc
3721 ggtatatcca tcctttttcg cacgatatac aggattttgc caaagggttc gtgtagactt
3781 tccttggtgt atccaacggc gtcagccggg caggataggt gaagtaggcc cacccgcgag
3841 cgggtgttcc ttcttcactg tcccttattc gcacctggcg gtgctcaacg ggaatcctgc
3901 tctgcgaggc tggccggcta ccgccggcgt aacagatgag ggcaagcgga tggctgatga
3961 aaccaagcca accaggggtg atgctgccaa cttactgatt tagtgtatga tggtgttttt
4021 gaggtgctcc agtggcttct gtttctatca gctgtccctc ctgttcagct actgacgggg
4081 tggtgcgtaa cggcaaaagc accgccggac atcagcgcta tctctgctct cactgccgta
4141 aaacatggca actgcagttc acttacaccg cttctcaacc cggtacgcac cagaaaatca
4201 ttgatatggc catgaatggc gttggatgcc gggcaacagc ccgcattatg ggcgttggcc
4261 tcaacacgat tttacgtcac ttaaaaaact caggccgcag tcggtaacct cgcgcataca
4321 gccgggcagt gacgtcatcg tctgcgcgga aatggacgaa cagtggggct atgtcggggc
4381 taaatcgcgc cagcgctggc tgttttacgc gtatgacagt ctccggaaga cggttgttgc
4441 gcacgtattc ggtgaacgca ctatggcgac gctggggcgt cttatgagcc tgctgtcacc
4501 ctttgacgtg gtgatatgga tgacggatgg ctggccgctg tatgaatccc gcctgaaggg
4561 aaagctgcac gtaatcagca agcgatatac gcagcgaatt gagcggcata acctgaatct
4621 gaggcagcac ctggcacggc tgggacggaa gtcgctgtcg ttctcaaaat cggtggagct
4681 gcatgacaaa gtcatcgggc attatctgaa cataaaacac tatcaataag ttggagtcat
4741 tacccaacca ggaagggcag cccacctatc aaggtgtact gccttccaga cgaacgaaga
4801 gcgattgagg aaaaggcggc ggcggccggc atgagcctgt cggcctacct gctggccgtc
4861 ggccagggct acaaaatcac gggcgtcgtg gactatgagc acgtccgcga gctggcccgc
4921 atcaatggcg acctgggccg cctgggcggc ctgctgaaac tctggctcac cgacgacccg
4981 cgcacggcgc ggttcggtga tgccacgatc ctcgccctgc tggcgaagat cgaagagaag
5041 caggacgagc ttggcaaggt catgatgggc gtggtccgcc cgagggcaga gccatgactt
5101 ttttagccgc taaaacggcc ggggggtgcg cgtgattgcc aagcacgtcc ccatgcgctc
5161 catcaagaag agcgacttcg cggagctggt attcgtgcag ggcaagattc ggaataccaa
5221 gtacgagaag gacggccaga cggtctacgg gaccgacttc attgccgata aggtggatta
5281 tctggacacc aaggcaccag gcgggtcaaa tcaggaataa gggcacattg ccccggcgtg
5341 agtcggggca atcccgcaag gagggtgaat gaatcggacg tttgaccgga aggcatacag
5401 gcaagaactg atcgacgcgg ggttttccgc cgaggatgcc gaaaccatcg caagccgcac
5461 cgtcatgcgt gcgccccgcg aaaccttcca gtccgtcggc tcgatggtcc agcaagctac
5521 ggccaagatc gagcgcgaca gcgtgcaact ggctccccct gccctgcccg cgccatcggc
5581 cgccgtggag cgttcgcgtc gtctcgaaca ggaggcggca ggtttggcga agtcgatgac
5641 catcgacacg cgaggaacta tgacgaccaa gaagcgaaaa accgccggcg aggacctggc
5701 aaaacaggtc agcgaggcca agcaggccgc gttgctgaaa cacacgaagc agcagatcaa
5761 ggaaatgcag ctttccttgt tcgatattgc gccgtggccg gacacgatgc gagcgatgcc
5821 aaacgacacg gcccgctctg ccctgttcac cacgcgcaac aagaaaatcc cgcgcgaggc
5881 gctgcaaaac aaggtcattt tccacgtcaa caaggacgtg aagatcacct acaccggcgt
5941 cgagctgcgg gccgacgatg acgaactggt gtggcagcag gtgttggagt acgcgaagcg
6001 cacccctatc ggcgagccga tcaccttcac gttctacgag ctttgccagg acctgggctg
6061 gtcgatcaat ggccggtatt acacgaaggc cgaggaatgc ctgtcgcgcc tacaggcgac
6121 ggcgatgggc ttcacgtccg accgcgttgg gcacctggaa tcggtgtcgc tgctgcaccg
6181 cttccgcgtc ctggaccgtg gcaagaaaac gtcccgttgc caggtcctga tcgacgagga
6241 aatcgtcgtg ctgtttgctg gcgaccacta cacgaaattc atatgggaga agtaccgcaa
6301 gctgtcgccg acggcccgac ggatgttcga ctatttcagc tcgcaccggg agccgtaccc
6361 gctcaagctg gaaaccttcc gcctcatgtg cggatcggat tccacccgcg tgaagaagtg
6421 gcgcgagcag gtcggcgaag cctgcgaaga gttgcgaggc agcggcctgg tggaacacgc
6481 ctgggtcaat gatgacctgg tgcattgcaa acgctagggc cttgtggggt cagttccggc
6541 tgggggttca gcagccagcg ctttactggc atttcaggaa caagcgggca ctgctcgacg
6601 cacttgcttc gctcagtatc gctcgggacg cacggcgcgc tctacgaact gccgataaac
6661 agaggattaa aattgacaat tgtgattaag gctcagattc gacggcttgg agcggccgac
6721 gtgcaggatt tccgcgagat ccgattgtcg gccctgaaga aagctccaga gatgttcggg
6781 tccgtttacg agcacgagga gaaaaagccc atggaggcgt tcgctgaacg gttgcgagat
6841 gccgtggcat tcggcgccta catcgacggc gagatcattg ggctgtcggt cttcaaacag
6901 gaggacggcc ccaaggacgc tcacaaggcg catctgtccg gcgttttcgt ggagcccgaa
6961 cagcgaggcc gaggggtcgc cggtatgctg ctgcgggcgt tgccggcggg tttattgctc
7021 gtgatgatcg tccgacagat tccaacggga atctggtgga tgcgcatctt catcctcggc
7081 gcacttaata tttcgctatt ctggagcttg ttgtttattt cggtctaccg cctgccgggc
7141 ggggtcgcgg cgacggtagg cgctgtgcag ccgctgatgg tcgtgttcat ctctgccgct
7201 ctgctaggta gcccgatacg attgatggcg gtcctggggg ctatttgcgg aactgcgggc
7261 gtggcgctgt tggtgttgac accaaacgca gcgctagatc ctgtcggcgt cgcagcgggc
7321 ctggcggggg cggtttccat ggcgttcgga accgtgctga cccgcaagtg gcaacctccc
7381 gtgcctctgc tcacctttac cgcctggcaa ctggcggccg gaggacttct gctcgttcca
7441 gtagctttag tgtttgatcc gccaatcccg atgcctacag gaaccaatgt tctcggcctg
7501 gcgtggctcg gcctgatcgg agcgggttta acctacttcc tttggttccg ggggatctcg
7561 cgactcgaac ctacagttgt ttccttactg ggctttctca gccgggatgg cgctaagaag
7621 ctattgccgc cgatcttcat atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat
7681 accgcatcag gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc
7741 tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg
7801 ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg
7861 ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac
7921 gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg
7981 gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct
8041 ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc aatgctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg
8101 tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct
8161 gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac
8221 tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt
8281 tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaaggac agtatttggt atctgcgctc
8341 tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca
8401 ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat
8461 atcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac
8521 gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt
8581 aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc
8641 aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg
8701 cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg
8761 ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca ataaaccagc
8821 cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta
8881 ttaaacaagt ggcagcaacg gattcgcaaa cctgtcacgc cttttgtgcc aaaagccgcg
8941 ccaggtttgc gatccgctgt gccaggcgtt aggcgtcata tgaagatttc ggtgatccct
9001 gagcaggtgg cggaaacatt ggatgctgag aaccatttca ttgttcgtga agtgttcgat
9061 gtgcacctat ccgaccaagg ctttgaacta tctaccagaa gtgtgagccc ctaccggaag
9121 gattacatct cggatgatga ctctgatgaa gactctgctt gctatggcgc attcatcgac
9181 caagagcttg tcgggaagat tgaactcaac tcaacatgga acgatctagc ctctatcgaa
9241 cacattgttg tgtcgcacac gcaccgaggc aaaggagtcg cgcacagtct catcgaattt
9301 gcgaaaaagt gggcactaag cagacagctc cttggcatac gattagagac acaaacgaac
9361 aatgtacctg cctgcaattt gtacgcaaaa tgtggcttta ctctcggcgg cattgacctg
9421 ttcacgtata aaactagacc tcaagtctcg aacgaaacag cgatgtactg gtactggttc
9481 tcgggagcac aggatgacgc ctaacaattc attcaagccg acaccgcttc gcggcgcggc
9541 ttaattcagg agttaaacat catgagggaa gcggtgatcg ccgaagtatc gactcaacta
9601 tcagaggtag ttggcgtcat cgagcgccat ctcgaaccga cgttgctggc cgtacatttg
9661 tacggctccg cagtggatgg cggcctgaag ccacacagtg atattgattt gctggttacg
9721 gtgaccgtaa ggcttgatga aacaacgcgg cgagctttga tcaacgacct tttggaaact
9781 tcggcttccc ctggagagag cgagattctc cgcgctgtag aagtcaccat tgttgtgcac
9841 gacgacatca ttccgtggcg ttatccagct aagcgcgaac tgcaatttgg agaatggcag
9901 cgcaatgaca ttcttgcagg tatcttcgag ccagccacga tcgacattga tctggctatc
9961 ttgctgacaa aagcaagaga acatagcgtt gccttggtag gtccagcggc ggaggaactc
10021 tttgatccgg ttcctgaaca ggatctattt gaggcgctaa atgaaacctt aacgctatgg
10081 aactcgccgc ccgactgggc tggcgatgag cgaaatgtag tgcttacgtt gtcccgcatt
10141 tggtacagcg cagtaaccgg caaaatcgcg ccgaaggatg tcgctgccga ctgggcaatg
10201 gagcgcctgc cggcccagta tcagcccgtc atacttgaag ctaggcaggc ttatcttgga
10261 caagaagatc gcttggcctc gcgcgcagat cagttggaag aatttgttca ctacgtgaaa
10321 ggcgagatca ccaaggtagt cggcaaataa tgtctaacaa ttcgttcaag ccgacgccgc
10381 ttcgcggcgc ggcttaactc aagcgttaga gagctgggga agactatgcg cgatctgttg
10441 aaggtggttc taagcctcgt acttgcgatg gcatcggggc aggcacttgc tgacctgcca
10501 attgttttag tggatgaagc tcgtcttccc tatgactact ccccatccaa ctacgacatt
10561 tctccaagca actacgacaa ctccataagc aattacgaca atagtccatc aaattacgac
10621 aactctgaga gcaactacga taatagttca tccaattacg acaatagtcg caacggaaat
10681 cgtaggctta tatatagcgc aaatgggtct cgcactttcg ccggctacta cgtcattgcc
10741 aacaatggga caacgaactt cttttccaca tctggcaaaa ggatgttcta caccccaaaa
10801 ggggggcgcg gcgtctatgg cggcaaagat gggagcttct gcggggcatt ggtcgtcata
10861 aatggccaat tttcgcttgc cctgacagat aacggcctga agatcatgta tctaagcaac
10921 tagcctgctc tctaataaaa tgttaggagc ttggctgcca tttttggggt gaggccgttc
10981 gcggccgagg ggcgcagccc ctggggggat gggaggcccg cgttagcggg ccgggagggt
11041 tcgagaaggg ggggcacccc ccttcggcgt gcgcggtcac gcgccagggc gcagccctgg
11101 ttaaaaacaa ggtttataaa tattggttta aaagcaggtt aaaagacagg ttagcggtgg
11161 ccgaaaaacg ggcggaaacc cttgcaaatg ctggattttc tgcctgtgga cagcccctca
11221 aatgtcaata ggtgcgcccc tcatctgtca gcactctgcc cctcaagtgt caaggatcgc
11281 gcccctcatc tgtcagtagt cgcgcccctc aagtgtcaat accgcagggc acttatcccc
11341 aggcttgtcc acatcatctg tgggaaactc gcgtaaaatc aggcgttttc gccgatttgc
11401 gaggctggcc agctccacgt cgccggccga aatcgagcct gcccctcatc tgtcaacgcc
11461 gcgccgggtg agtcggcccc tcaagtgtca acgtccgccc ctcatctgtc agtgagggcc
11521 aagttttccg cgaggtatcc acaacgccgg cggccggccg cggtgtctcg cacacggctt
11581 cgacggcgtt tctggcgcgt ttgcagggcc atagacggcc gccagcccag cggcgagggc
11641 aaccagcccg gtgagcgtcg gaaaggg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3128/pECMV-3×FLAG-SSR3人源基因质粒 |
| P3129/pECMV-3×FLAG-MRPS33人源基因质粒 |
| P3130/pECMV-3×FLAG-CLDN18-2人源基因质粒 |
| P3211/pECMV-3×FLAG-TRAF6人源基因质粒 |
| P3212/pLVML-3×FLAG-SLCO1B3-IRES-Puro人源基因质粒 |
| P3213/pLVML-3×FLAG-SLCO1B1-IRES-Puro人源基因质粒 |
| P3214/pCAGGS-HA-TRIM21人源基因质粒 |
| P4842/pCAGGS-HA-TRIM14人源基因质粒 |
| P3215/pECMV-3×FLAG-PTEN人源基因质粒 |
| P3411/pmCherry-SNAI2人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
刷新认知！Nature Genetics 报道血型是如何决定肠道微生物组成的
据分析。 图 3：染色体与微生物特征 meta 分析的 P 值图中显示的是每个位置最小 P 值。不同颜色代表不同分析类型。黄色：丰度分析；蓝色: logistic 回归分析；红色：β 多样性分析 需要提醒的是，大多数基因组关联显示出较低的异质性 (I22因此应谨慎看待该结果。 ABO 血型及其分泌状态对不同肠道菌群存在特定影响研究人员随后鉴定出两个与 ABO 血型基因位点相关联的突变。一个具有差异丰度的是拟杆菌 OTU97_27 的 rs8176632 突变，另一个是费氏杆菌 OTU99_16 的 rs
Cell：双歧杆菌再显奇效！促进免疫系统发育，就在出生后的这
低丰度的婴儿还表现出肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、肠道炎症的关键介质 IL-17A 和细胞因子 IL-13 水平的升高。而双歧杆菌高丰度的婴儿，Treg 相关细胞因子 IL-27 和 IL-10 以及内源性 IL-1 抑制剂 IL1RA 水平升高。通过上述差异发现，在生命最初几个月里，双歧杆菌如果不能在肠道定植或增殖的情况下，婴儿出现全身或肠道炎症，激活的免疫细胞频率在增加，说明全身免疫失调的调节细胞水平降低。图片来源：Cell而 HMO 的代谢又会怎样影响我们免疫系统的发育呢？研究发现，双歧杆菌
pART27地杆菌表达质粒
￥100 - 1000
