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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pSE100
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pSE100分枝杆菌表达质粒
别称: pSE100
| 复制子: | pBR322 |
|---|---|
| 终止子: | rrnB T2 terminator |
| 质粒分类: | 分枝杆菌质粒 |
| 质粒大小: | 5538bp |
| 原核抗性: | Hyg |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 分枝杆菌 |
| 5'测序引物: | 根据全序列设计 |
| 备注: | 高拷贝 |
质粒属性
| 载体宿主: | |
|---|---|
| 载体用途: | |
| 基因种属: | |
| 基因类型: | |
| 原核抗性: | Hyg |
| 筛选标记: | |
| 荧光蛋白: |
质粒简介:详询
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5538 bp ds-DNA circular SYN 11-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pSE100
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5538)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sunday, September 11, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5538
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 14..41
/note="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
protein_bind 242..259
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
primer_bind complement(481..497)
/note="KS primer"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
rep_origin 4703..5291
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tgattagcta agcagaaggc catcctgacg gatggccttt ttgcgtttaa tactgtttaa
61 acctctagaa atattggatc gtcggcaccg tcacggccgt gggaggcggc acgatccgcg
121 acgtgatgat cggccgcatc cccacggtgc tgcgcagtga gctctacgcc atcccggcgt
181 tgatctgtgc gttcgcacgc acaggcccgg tgtgagaagg gtctctgacg agcgggagaa
241 ctccctatca gtgatagagt ttgtcctccc tatcagtgat agataggctc tgggagtacc
301 cgtgtgtacg accagcacgg catacatcat ttcgacgccg agagattcgc cgcccgaaat
361 gagcacgatc cgcatgctta attaacagct gatttaaatg gatcccccgg gctgcaggaa
421 ttcgatatca agctttagct aattaattgg ggaccctaga ggtccccttt tttattttat
481 cgataccgtc gacctcgagg gggggcccgc cggggatcat cgagccgaga acgttatcga
541 agttggtcat gtgtaatccc ctcgtttgaa ctttggatta agcgtagata cacccttgga
601 caagccagtt ggattcggag acaagcaaat tcagccttaa aaagggcgag gcctgcggtg
661 gtggaacacc gcagggcctc taaccgctcg acgcgctgca ccaaccagcc cgcgaacggc
721 tggcagccag cgtaaggcgc ggctcatcgg gcggcgttcg ccacgatgtc ctgcacttcg
781 agccaagcct cgaacacctg ctggtgtgca cgactcaccc ggttgttgac accgcgcgcg
841 gccgtgcggg ctcggtgggg cggctgtgtc gcccttgcca gcgtgagtag cgcgtacctc
901 acctcgccca acaggtcgca cacagccgat tcgtacgcca taaagccagg tgagcccacc
961 agctccgtaa gttcgggcgc tgtgtggctc gtacccgcgc attcaggcgg cagggggtct
1021 aacgggtcta aggcggcgtg tacggccgcc acagcggctc tcagcggccc ggaaacgtcc
1081 tcgaaacgac gcatgtgttc ctcctggttg gtacaggtgg ttgggggtgc tcggctgtcg
1141 ctggtgttcc accaccaggg ctcgacggga gagcggggga gtgtgcagtt gtggggtggc
1201 ccctcagcga aatatctgac ttggagctcg tgtcggacca tacaccggtg attaatcgtg
1261 gtctactacc aagcgtgagc cacgtcgccg acgaatttga gcagctctgg ctgccgtact
1321 ggccgctggc aagcgacgat ctgctcgagg ggatctaccg ccaaagccgc gcgtcggccc
1381 taggccgccg gtacatcgag gcgaacccaa cagcgctggc aaacctgctg gtcgtggacg
1441 tagaccatcc agacgcagcg ctccgagcgc tcagcgcccg ggggtcccat ccgctgccca
1501 acgcgatcgt gggcaatcgc gccaacggcc acgcacacgc agtgtgggca ctcaacgccc
1561 ctgttccacg caccgaatac gcgcggcgta agccgctcgc atacatggcg gcgtgcgccg
1621 aaggccttcg gcgcgccgtc gacggcgacc gcagttactc aggcctcatg accaaaaacc
1681 ccggccacat cgcctgggaa acggaatggc tccactcaga tctctacaca ctcagccaca
1741 tcgaggccga gctcggcgcg aacatgccac cgccgcgctg gcgtcagcag accacgtaca
1801 aagcggctcc gacgccgcta gggcggaatt gcgcactgtt cgattccgtc aggttgtggg
1861 cctatcgtcc cgccctcatg cggatctacc tgccgacccg gaacgtggac ggactcggcc
1921 gcgcgatcta tgccgagtgc cacgcgcgaa acgccgaatt cccgtgcaac gacgtgtgtc
1981 ccggaccgct accggacagc gaggtccgcg ccatcgccaa cagcatttgg cgttggatca
2041 caaccaagtc gcgcatttgg gcggacggga tcgtggtcta cgaggccaca ctcagtgcgc
2101 gccagtcggc catctcgcgg aagggcgcag cagcgcgcac ggcggcgagc acagttgcgc
2161 ggcgcgcaaa gtccgcgtca gccatggagg cattgctatg agcgacggct acagcgacgg
2221 ctacagcgac ggctacaacc ggcagccgac tgtccgcaaa aagcggcgcg tgaccgccgc
2281 cgaaggcgct cgaatcaccg gactatccga acgccacgtc gtccggctcg tggcgcagga
2341 acgcagcgag tggctcgccg agcaggctgc acgccgcgaa cgcatccgcg cctatcacga
2401 cgacgagggc cactcttggc cgcaaacggc caaacatttc gggctgcatc tggacaccgt
2461 taagcgactc ggctatcggg cgaggaaaga gcgtgcggca gaacaggaag cggctcaaaa
2521 ggcccacaac gaagccgaca atccaccgct gttctaacgc aattggggag cgggtgtcgc
2581 gggggttccg tggggggttc cgttgcaacg ggtcggacag gtaaaagtcc tggtagacgc
2641 tagttttctg gtttgggcca tgcctgtctc gttgcgtgtt tcgttgcgcc cgttttgaat
2701 accagccaga cgagacgggg ttctacgaat cttggtcgat accaagccat ttccgctgaa
2761 tatcggggag ctcaccgcca gaatcggtgg ttgtggtgat gtacgtggcg aactccgttg
2821 tagtgcctgt ggtggcatcc gtggccactc tcgttgcacg gttcgttgtg ccgttacagg
2881 ccccgttgac agctcaccga acgtagttaa aacatgctgg tcaaactagg tttaccaacg
2941 atacgagtca gctcatctag ggccagttct aggcgttgtt cgttgcgcgg ttcgttgcgc
3001 atgtttcgtg tggttgctag atggctccgc aaccacacgc ttcgaggttg agtgcttcca
3061 gcacgggcgc gatccagaag aacttcgtcg tgcgactgtc ctcgttgatc cttgccgagc
3121 tgggatggaa gctcggccga ccaccctgga ggagatgatc gaggatgcca gggcctttca
3181 cgcccgccgc tgctgagcgt ccgccgccgg gcccgcaccg ccgtcggccg gcccgctccg
3241 ggctcgcagc agcgggcttc ggcgcgggcc cggggctccc gagcgcgggc ggggctccgg
3301 gcggccgccg ggggccgggg gcggcgccgg gcggcccggg gcgtcaggcg ccgggggcgg
3361 tgtccggcgg cccccagagg aactgcgcca gttcctccgg atcggtgaag ccggagagat
3421 ccagcggggt ctcctcgaac acctcgaagt cgtgcaggaa ggtgaaggcg agcagttcgc
3481 gggcgaagtc ctcggtccgc ttccactgcg ccccgtcgag cagcgcggcc aggatctcgc
3541 ggtcgccccg gaaggcgttg agatgcagtt gcaccaggct gtagcgggag tctcccgcat
3601 agacgtcggt gaagtcgacg atcccggtga cctcggtcgc ggccaggtcc acgaagatgt
3661 tggtcccgtg caggtcgccg tggacgaacc ggggttcgcg gccggccagc agcgtgtcca
3721 cgtccggcag ccagtcctcc aggcggtcca gcagccgggg cgagaggtag ccccacccgc
3781 ggtggtcctc gacggtcgcc gcgcggcgtt cccgcagcag ttccgggaag acctcggaat
3841 ggggggtgag cacggtgttc ccggtcagcg gcaccctgtg cagccggccg agcacccggc
3901 cgagttcgcg ggccagggcg agcagcgcgt tccggtcggt cgtgccgtcc atcgcggacc
3961 gccaggtggt gccggtcatc cggctcatca ccaggtaggg ccacggccag gctccggtgc
4021 cgggccgcag ctcgccgcgg ccgaggaggc ggggcaccgg caccggggcg tccgccagga
4081 ccgcgtacgc ctccgactcc gacgcgaggc tctccggacc gcaccagtgc tcgccgaaca
4141 gcttgatcac cgggtcgggc tcgccgacca gtacggggtt ggtgctctcg ccgggcaccc
4201 gcagcaccgg cggcaccggc agcccgagct cctccagggc tcggcgggcc agcggctccc
4261 agaattcctg gtcgttccgc aggctcgcgt aggaatcatc cgaatcaata cggtcgagaa
4321 gtaacaggga ttcttgtgtc acagcggacc tctattcaca gggtacgggc cggcttaatt
4381 ccgcacggcc ggtcgcgaca cggcctgtcc gcaccgcggt caggcgttga cgatgacggg
4441 ctggtcggcc acgtccgggg agtcaggcaa ctatggatga acgaaataga cagatcgctg
4501 agataggtgc ctcactgatt aagcattggt aactgtcaga ccaagtttac tcatatatac
4561 tttagattga tttaaaactt catttttaat ttaaaaggat ctaggtgaag atcctttttg
4621 ataatctcat gaccaaaatc ccttaacgtg agttttcgtt ccactgagcg tcagaccccg
4681 tagaaaagat caaaggatct tcttgagatc ctttttttct gcgcgtaatc tgctgcttgc
4741 aaacaaaaaa accaccgcta ccagcggtgg tttgtttgcc ggatcaagag ctaccaactc
4801 tttttccgaa ggtaactggc ttcagcagag cgcagatacc aaatactgtc cttctagtgt
4861 agccgtagtt aggccaccac ttcaagaact ctgtagcacc gcctacatac ctcgctctgc
4921 taatcctgtt accagtggct gctgccagtg gcgataagtc gtgtcttacc gggttggact
4981 caagacgata gttaccggat aaggcgcagc ggtcgggctg aacggggggt tcgtgcacac
5041 agcccagctt ggagcgaacg acctacaccg aactgagata cctacagcgt gagctatgag
5101 aaagcgccac gcttcccgaa gggagaaagg cggacaggta tccggtaagc ggcagggtcg
5161 gaacaggaga gcgcacgagg gagcttccag ggggaaacgc ctggtatctt tatagtcctg
5221 tcgggtttcg ccacctctga cttgagcgtc gatttttgtg atgctcgtca ggggggcgga
5281 gcctatggaa aaacgccagc aacgcggcct ttttacggtt cctggccttt tgctggcctt
5341 ttgctcacat gttctttcct gcgttatccc ctgattctgt ggataaccgt attaccgcct
5401 ttgagtgagc tgataccgct cgccgcagcc gaacgaccga gcgcagcgag tcagtgagcg
5461 aggaagcgga agagcgccca atacgcaaac cgcctctccc cgcgcgttgg ccgattcatt
5521 aatgcagcta gaactagt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P1722/pLVML-3×FLAG-N6AMT1人源基因质粒 |
| P4519/pLVML-3×FLAG-SOX4-IRES-Puro人源基因质粒 |
| P1723/pCDNA3-HA-CTNNB1人源基因质粒 |
| P1728/pCDNA3.1-EEF2-Myc-6×His人源基因质粒 |
| P1729/pCDNA3.1-BMI1-6×His人源基因质粒 |
| P1760/pCDNA3.1-GNE-Myc-His人源基因质粒 |
| P4835/pCDNA3.1-3×Myc-CXCL14人源基因质粒 |
| P0712/pIkB-EGFP人源基因质粒 |
| P1780/pLenti6/V5-p53_R175H人源基因质粒 |
| P1797/pCDNA3.1-RHEB-Q60K-Myc人源基因质粒 |
| P1798/pCDNA3.1-RHEB-Q64L-Myc 人源基因质粒 |
| P1799/pCMV-Myc-VPS34人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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