pIAβ8质粒菌种

基本信息
名称：pIAβ8质粒菌种
别称: NM_017460.6;CP33; CP34; CYP3A; CYP3A

复制子:	pUC
克隆菌株:	DH5a
培养条件:	37度
备注:	1512bp

质粒属性

载体宿主：	大肠杆菌
载体用途：
基因种属：	人
基因类型：	cDNA
原核抗性：	Amp
筛选标记：
荧光蛋白：

质粒简介
 pCR4-TOPO-CYP3A4(human)

质粒图谱


质粒序列：详询


质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片

P3653/pCMV-SPORT6-WBP2人源基因质粒

P3654/pCMV-SPORT6-CDK18(1点突变）人源基因质粒

P3655/pCMV-SPORT6-CREB1人源基因质粒

P3656/pCMV-SPORT6-STK3人源基因质粒

P3657/pCMV-SPORT6-GTF3C5人源基因质粒

P3658/pCMV-SPORT6-CHI3L2(1点突变）人源基因质粒

P3659/pCMV-SPORT6-STMN4人源基因质粒

P3660/pCMV-SPORT6-FAM104A人源基因质粒

P3661/pCMV-SPORT6-B3GAT1人源基因质粒

P3662/pCMV-SPORT6-BAALC（1同义突变）人源基因质粒

P3663/pCMV-SPORT6-PLCD3（516-2370bp1同义突变）人源基因质粒

P3664/pCMV-SPORT6-EFEMP2（1点突变）人源基因质粒

P3665/pCMV-SPORT6-LPL（点突变）人源基因质粒