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- 上海
- P1178
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#65459
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：HBV 1.3-mer WT replicon病毒基因质粒
别称: Plasmid#65459
复制子: ori
质粒分类: 基因文库质粒；其它基因质粒；其它种源质粒
质粒大小：6821bp
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：病毒
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
HBV 1.3-mer WT replicon质粒的原始参考文献：DDX3 DEAD-Box RNA helicase inhibits hepatitis B virus reverse transcription by incorporation into nucleocapsids.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6821 bp ds-DNA circular SYN 15-AUG-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6821
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 843..1688
/codon_start=1
/product="middle (pre-S2/S) envelope protein of hepatitis B
virus"
/label=HBsAg (pre-S2/S)
/note="hepatitis B surface antigen"
/translation="MQWNSTTFHQTLQDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVLTTASPLSSI
FSRIGDPALNMENITSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGTTVCL
GQNSQSPTSNHSPTSCPPTC-PGYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCP
LIPGSSTTSTGPCRTCMTTAQGTSMYPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFGKFLWEWAS
ARFSWLSLLVPFVQWFVGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYSILSPFLPLLPIFFCLWVYI
"
promoter complement(2866..2884)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
primer_bind complement(2903..2919)
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 2927..2943
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(2951..2981)
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 2996..3017
/label=CAP binding site
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(3305..3893)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4064..4924)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4925..5029)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
primer_bind 5503..5519
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 5527..5545
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
ORIGIN
1 ccggagacta ctgttgttag acgacgaggc aggtccccta gaagaagaac tccctcgcct
61 cgcagacgaa ggtctcaatc gccgcgtcgc agaagatctc aatctcggga atctcaatgt
121 tagtattcct tggactcata aggtggggaa ctttactggg ctttattctt ctactgtacc
181 tgtctttaat cctcattgga aaacaccatc ttttcctaat atacatttac accaagacat
241 tatcaaaaaa tgtgaacagt ttgtaggccc actcacagtt aatgagaaaa gaagattgca
301 attgattatg cctgccaggt tttatccaaa ggttaccaaa tatttaccat tggataaggg
361 tattaaacct tattatccag aacatctagt taatcattac ttccaaacta gacactattt
421 acacactcta tggaaggcgg gtatattata taagagagaa acaacacata gcgcctcatt
481 ttgtgggtca ccatattctt gggaacaaga tctacagcat ggggcagaat ctttccacca
541 gcaatcctct gggattcttt cccgaccacc agttggatcc agccttcaga gcaaacaccg
601 caaatccaga ttgggacttc aatcccaaca aggacacctg gccagacgcc aacaaggtag
661 gagctggagc attcgggctg ggtttcaccc caccgcacgg aggccttttg gggtggagcc
721 ctcaggctca gggcatacta caaactttgc cagcaaatcc gcctcctgcc tccaccaatc
781 gccagtcagg aaggcagcct accccgctgt ctccaccttt gagaaacact catcctcagg
841 ccatgcagtg gaattccaca accttccacc aaactctgca agatcccaga gtgagaggcc
901 tgtatttccc tgctggtggc tccagttcag gaacagtaaa ccctgttctg actactgcct
961 ctcccttatc gtcaatcttc tcgaggattg gggaccctgc gctgaacatg gagaacatca
1021 catcaggatt cctaggaccc cttctcgtgt tacaggcggg gtttttcttg ttgacaagaa
1081 tcctcacaat accgcagagt ctagactcgt ggtggacttc tctcaatttt ctagggggaa
1141 ctaccgtgtg tcttggccaa aattcgcagt ccccaacctc caatcactca ccaacctctt
1201 gtcctccaac ttgtcctggt tatcgctgga tgtgtctgcg gcgttttatc atcttcctct
1261 tcatcctgct gctatgcctc atcttcttgt tggttcttct ggactatcaa ggtatgttgc
1321 ccgtttgtcc tctaattcca ggatcctcaa caaccagcac gggaccatgc cggacctgca
1381 tgactactgc tcaaggaacc tctatgtatc cctcctgttg ctgtaccaaa ccttcggacg
1441 gaaattgcac ctgtattccc atcccatcat cctgggcttt cggaaaattc ctatgggagt
1501 gggcctcagc ccgtttctcc tggctcagtt tactagtgcc atttgttcag tggttcgtag
1561 ggctttcccc cactgtttgg ctttcagtta tatggatgat gtggtattgg gggccaagtc
1621 tgtacagcat cttgagtccc tttttaccgc tgttaccaat tttcttttgt ctttgggtat
1681 acatttaaac cctaacaaaa caaagagatg gggttactct ctaaatttta tgggttatgt
1741 cattggatgt tatgggtcct tgccacaaga acacatcata caaaaaatca aagaatgttt
1801 tagaaaactt cctattaaca ggcctattga ttggaaagta tgtcaacgaa ttgtgggtct
1861 tttgggtttt gctgcccctt ttacacaatg tggttatcct gcgttgatgc ctttgtatgc
1921 atgtattcaa tctaagcagg ctttcacttt ctcgccaact tacaaggcct ttctgtgtaa
1981 acaatacctg aacctttacc ccgttgcccg gcaacggcca ggtctgtgcc aagtgtttgc
2041 tgacgcaacc cccactggct ggggcttggt catgggccat cagcgcatgc gtggaacctt
2101 ttcggctcct ctgccgatcc atactgcgga actcctagcc gcttgttttg ctcgcagcag
2161 gtctggagca aacattatcg ggactgataa ctctgttgtc ctatcccgca aatatacatc
2221 gtttccatgg ctgctaggct gtgctgccaa ctggatcctg cgcgggacgt cctttgttta
2281 cgtcccgtcg gcgctgaatc ctgcggacga cccttctcgg ggtcgcttgg gactctctcg
2341 tccccttctc cgtctgccgt tccgaccgac cacggggcgc acctctcttt acgcggactc
2401 cccgtctgtg ccttctcatc tgccggaccg tgtgcacttc gcttcacctc tgcacgtcgc
2461 atggagacca ccgtgaacgc ccaccaaata ttgcccaagg tcttacataa gaggactctt
2521 ggactctcag caatgtcaac gaccgacctt gaggcatact tcaaagactg tttgtttaaa
2581 gactgggagg agttggggga ggagattagg ttaaaggtct ttgtactagg aggctgtagg
2641 cataaattgg tctgcgcacc agcaccatgc aactttttca cctctgccta atcatctctt
2701 gttcatgtcc tactgttcaa gcctccaagc tgtgccttgg gtggctttgg ggcatggaca
2761 tcgaccctta taaagaattc ggagctactg tggagttact ctcgtttttg ccttctgact
2821 tctttccttc agtacgagat cttctagata ccgcaagctt gtctccctat agtgagtcgt
2881 attagagctt ggcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca
2941 caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag
3001 tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt
3061 cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc
3121 gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg
3181 tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa
3241 agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg
3301 cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga
3361 ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg
3421 tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg
3481 gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc
3541 gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg
3601 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca
3661 ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt
3721 ggcctaacta cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag
3781 ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg
3841 gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc
3901 ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt
3961 tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt
4021 ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca
4081 gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg
4141 tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac
4201 cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg
4261 ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc
4321 gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta
4381 caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac
4441 gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc
4501 ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac
4561 tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact
4621 caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa
4681 tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt
4741 cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca
4801 ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa
4861 aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac
4921 tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg
4981 gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc
5041 gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata
5101 ggcgtatcac gaggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac
5161 acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag
5221 cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat
5281 cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa
5341 ggagaaaata ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc
5401 gatcggtgcg ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc
5461 gattaagttg ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg
5521 aattggattt aggtgacact atagaatacg aattcgagct cgtattcaat ctaagcaggc
5581 tttcactttc tcgccaactt acaaggcctt tctgtgtaaa caatacctga acctttaccc
5641 cgttgcccgg caacggccag gtctgtgcca agtgtttgct gacgcaaccc ccactggctg
5701 gggcttggtc atgggccatc agcgcatgcg tggaaccttt tcggctcctc tgccgatcca
5761 tactgcggaa ctcctagccg cttgttttgc tcgcagcagg tctggagcaa acattatcgg
5821 gactgataac tctgttgtcc tatcccgcaa atatacatcg tttccatggc tgctaggctg
5881 tgctgccaac tggatcctgc gcgggacgtc ctttgtttac gtcccgtcgg cgctgaatcc
5941 tgcggacgac ccttctcggg gtcgcttggg actctctcgt ccccttctcc gtctgccgtt
6001 ccgaccgacc acggggcgca cctctcttta cgcggactcc ccgtctgtgc cttctcatct
6061 gccggaccgt gtgcacttcg cttcacctct gcacgtcgca tggagaccac cgtgaacgcc
6121 cactaaatat tgcccaaggt cttacataag aggactcttg gactctcagc aatgtcaacg
6181 accgaccttg aggcatactt caaagactgt ttgtttaaag actgggagga gttgggggag
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6301 gcaccatgca actttttcac ctctgcctaa tcatctcttg ttcatgtcct actgttcaag
6361 cctccaagct gtgccttggg tggctttggg gcatggacat cgacccttat aaagaatttg
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6721 ttggaagaga aacagttata gagtatttgg tgtctttcgg agtgtggatt cgcactcctc
6781 cagcttatag accaccaaat gcccctatcc tatcaacact t
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：HBV 1.3-mer WT replicon病毒基因质粒
别称: Plasmid#65459
复制子: ori
质粒分类: 基因文库质粒；其它基因质粒；其它种源质粒
质粒大小：6821bp
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：病毒
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
HBV 1.3-mer WT replicon质粒的原始参考文献：DDX3 DEAD-Box RNA helicase inhibits hepatitis B virus reverse transcription by incorporation into nucleocapsids.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6821 bp ds-DNA circular SYN 15-AUG-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6821
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LIPGSSTTSTGPCRTCMTTAQGTSMYPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFGKFLWEWAS
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"
promoter complement(2866..2884)
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/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
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/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 2927..2943
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(2951..2981)
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 2996..3017
/label=CAP binding site
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(3305..3893)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4064..4924)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4925..5029)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
primer_bind 5503..5519
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 5527..5545
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
ORIGIN
1 ccggagacta ctgttgttag acgacgaggc aggtccccta gaagaagaac tccctcgcct
61 cgcagacgaa ggtctcaatc gccgcgtcgc agaagatctc aatctcggga atctcaatgt
121 tagtattcct tggactcata aggtggggaa ctttactggg ctttattctt ctactgtacc
181 tgtctttaat cctcattgga aaacaccatc ttttcctaat atacatttac accaagacat
241 tatcaaaaaa tgtgaacagt ttgtaggccc actcacagtt aatgagaaaa gaagattgca
301 attgattatg cctgccaggt tttatccaaa ggttaccaaa tatttaccat tggataaggg
361 tattaaacct tattatccag aacatctagt taatcattac ttccaaacta gacactattt
421 acacactcta tggaaggcgg gtatattata taagagagaa acaacacata gcgcctcatt
481 ttgtgggtca ccatattctt gggaacaaga tctacagcat ggggcagaat ctttccacca
541 gcaatcctct gggattcttt cccgaccacc agttggatcc agccttcaga gcaaacaccg
601 caaatccaga ttgggacttc aatcccaaca aggacacctg gccagacgcc aacaaggtag
661 gagctggagc attcgggctg ggtttcaccc caccgcacgg aggccttttg gggtggagcc
721 ctcaggctca gggcatacta caaactttgc cagcaaatcc gcctcctgcc tccaccaatc
781 gccagtcagg aaggcagcct accccgctgt ctccaccttt gagaaacact catcctcagg
841 ccatgcagtg gaattccaca accttccacc aaactctgca agatcccaga gtgagaggcc
901 tgtatttccc tgctggtggc tccagttcag gaacagtaaa ccctgttctg actactgcct
961 ctcccttatc gtcaatcttc tcgaggattg gggaccctgc gctgaacatg gagaacatca
1021 catcaggatt cctaggaccc cttctcgtgt tacaggcggg gtttttcttg ttgacaagaa
1081 tcctcacaat accgcagagt ctagactcgt ggtggacttc tctcaatttt ctagggggaa
1141 ctaccgtgtg tcttggccaa aattcgcagt ccccaacctc caatcactca ccaacctctt
1201 gtcctccaac ttgtcctggt tatcgctgga tgtgtctgcg gcgttttatc atcttcctct
1261 tcatcctgct gctatgcctc atcttcttgt tggttcttct ggactatcaa ggtatgttgc
1321 ccgtttgtcc tctaattcca ggatcctcaa caaccagcac gggaccatgc cggacctgca
1381 tgactactgc tcaaggaacc tctatgtatc cctcctgttg ctgtaccaaa ccttcggacg
1441 gaaattgcac ctgtattccc atcccatcat cctgggcttt cggaaaattc ctatgggagt
1501 gggcctcagc ccgtttctcc tggctcagtt tactagtgcc atttgttcag tggttcgtag
1561 ggctttcccc cactgtttgg ctttcagtta tatggatgat gtggtattgg gggccaagtc
1621 tgtacagcat cttgagtccc tttttaccgc tgttaccaat tttcttttgt ctttgggtat
1681 acatttaaac cctaacaaaa caaagagatg gggttactct ctaaatttta tgggttatgt
1741 cattggatgt tatgggtcct tgccacaaga acacatcata caaaaaatca aagaatgttt
1801 tagaaaactt cctattaaca ggcctattga ttggaaagta tgtcaacgaa ttgtgggtct
1861 tttgggtttt gctgcccctt ttacacaatg tggttatcct gcgttgatgc ctttgtatgc
1921 atgtattcaa tctaagcagg ctttcacttt ctcgccaact tacaaggcct ttctgtgtaa
1981 acaatacctg aacctttacc ccgttgcccg gcaacggcca ggtctgtgcc aagtgtttgc
2041 tgacgcaacc cccactggct ggggcttggt catgggccat cagcgcatgc gtggaacctt
2101 ttcggctcct ctgccgatcc atactgcgga actcctagcc gcttgttttg ctcgcagcag
2161 gtctggagca aacattatcg ggactgataa ctctgttgtc ctatcccgca aatatacatc
2221 gtttccatgg ctgctaggct gtgctgccaa ctggatcctg cgcgggacgt cctttgttta
2281 cgtcccgtcg gcgctgaatc ctgcggacga cccttctcgg ggtcgcttgg gactctctcg
2341 tccccttctc cgtctgccgt tccgaccgac cacggggcgc acctctcttt acgcggactc
2401 cccgtctgtg ccttctcatc tgccggaccg tgtgcacttc gcttcacctc tgcacgtcgc
2461 atggagacca ccgtgaacgc ccaccaaata ttgcccaagg tcttacataa gaggactctt
2521 ggactctcag caatgtcaac gaccgacctt gaggcatact tcaaagactg tttgtttaaa
2581 gactgggagg agttggggga ggagattagg ttaaaggtct ttgtactagg aggctgtagg
2641 cataaattgg tctgcgcacc agcaccatgc aactttttca cctctgccta atcatctctt
2701 gttcatgtcc tactgttcaa gcctccaagc tgtgccttgg gtggctttgg ggcatggaca
2761 tcgaccctta taaagaattc ggagctactg tggagttact ctcgtttttg ccttctgact
2821 tctttccttc agtacgagat cttctagata ccgcaagctt gtctccctat agtgagtcgt
2881 attagagctt ggcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca
2941 caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag
3001 tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt
3061 cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc
3121 gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg
3181 tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa
3241 agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg
3301 cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga
3361 ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg
3421 tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg
3481 gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc
3541 gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg
3601 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca
3661 ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt
3721 ggcctaacta cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag
3781 ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg
3841 gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc
3901 ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt
3961 tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt
4021 ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca
4081 gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg
4141 tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac
4201 cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg
4261 ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc
4321 gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta
4381 caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac
4441 gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc
4501 ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac
4561 tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact
4621 caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa
4681 tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt
4741 cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca
4801 ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa
4861 aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac
4921 tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg
4981 gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc
5041 gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata
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5161 acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag
5221 cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat
5281 cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa
5341 ggagaaaata ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc
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5461 gattaagttg ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg
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5821 gactgataac tctgttgtcc tatcccgcaa atatacatcg tttccatggc tgctaggctg
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5941 tgcggacgac ccttctcggg gtcgcttggg actctctcgt ccccttctcc gtctgccgtt
6001 ccgaccgacc acggggcgca cctctcttta cgcggactcc ccgtctgtgc cttctcatct
6061 gccggaccgt gtgcacttcg cttcacctct gcacgtcgca tggagaccac cgtgaacgcc
6121 cactaaatat tgcccaaggt cttacataag aggactcttg gactctcagc aatgtcaacg
6181 accgaccttg aggcatactt caaagactgt ttgtttaaag actgggagga gttgggggag
6241 gagattaggt taaaggtctt tgtactagga ggctgtaggc ataaattggt ctgcgcacca
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6541 ctcaccatac tgcactcagg caagcaattc tttgctgggg ggaactaatg actctagcta
6601 cctgggtggg tgttaatttg gaagatccag cgtctagaga cctagtagtc agttatgtca
6661 acactaatat gggcctaaag ttcaggcaac tcttgtggtt tcacatttct tgtctcactt
6721 ttggaagaga aacagttata gagtatttgg tgtctttcgg agtgtggatt cgcactcctc
6781 cagcttatag accaccaaat gcccctatcc tatcaacact t
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1902/pCMV-HA-Parkin人源基因质粒 |
| P0806/pCDH-CMV-CAMK2G人源基因质粒 |
| P0848/pTT3-CD109-bio-His人源基因质粒 |
| P0849/p3×FLAG-DDX6(有突变)人源基因质粒 |
| P0850/pEGFP-C3-DDX6人源基因质粒 |
| P0851/pCMV-FLAG-DDX21人源基因质粒 |
| P0852/pCMV-CTSD人源基因质粒 |
| P1056/pCDNA6-FLAG-CBX7人源基因质粒 |
| P1057/pRK5-EGFP-Tau人源基因质粒 |
| P1069/pRK5-EGFP-Tau-P301L人源基因质粒 |
| P1058/pCAX APP Swe Ind人源基因质粒 |
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HBV 1.3-mer WT replicon病毒基因质粒
￥100 - 1000
