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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
19393-94-3
- 规格:
5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验,1000,2000 bp 片段,以 pBS 质粒为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:pUC19 质粒 30 ng/50 μL or pBS 质粒 30 ng/50 μL PCR 扩增程序: 循环数 Step 温度 时间 1 1 94 ℃ 2 min 35 1 94 ℃ 45 sec 2 55 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 2 min 1 1 72 ℃ 5 min 2.质粒菌液直接扩增: 以 pUC19 菌液为模板扩增 100,250,500,750,1000
Buffer G2,最大速漩涡10-30s,充分重悬核酸沉淀物(时间要控制得很严格)。(10)加入25μl QIAGEN Protease,50℃保育30-60min(如有必要可延长保育时间)。2)DNA的提取二、基因组步行法扩增5’及3’侧翼序列1 材料基因组DNA2.仪器、用具 离心机、PCR仪 3.试剂 (1)30μl DraⅠ(10units/μl) (2)10μl T4 DNA Ligase (6units/μl) (3)10×Ligation Buffer (4)BD Genome
液、Mg2+等。二、PCR反应基本步骤:1、变性(denaturation):通过加热使模板DNA的双链之间的氢键断裂,双链分开而成单链的过程,高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。2、退火(annealling):当温度降低时,引物与模板DNA中互补区域结合成杂交分子,低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。3、延伸(extension):在DNA聚合酶、dNTPs、 Mg2+存在下,DNA聚合酶催化引物按5’→3’方向延伸,合成出与模板DNA链互补的DNA子链,中温延伸
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