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- Xybio
- 上海
- P1258
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pYES2-CT-α-Factor
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pYES2/CT-α-Factor酿酒酵母质粒
别称: pYES2-CT-α-Factor
| 启动子: | GAL1 |
|---|---|
| 复制子: | pUC,2U |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | URA3 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 酵母菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | URA3 |
| 荧光蛋白： |
pYES2/CT-α-Factor质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2957/YEPlac112酿酒酵母质粒 |
| P2958/YCPlac33酿酒酵母质粒 |
| P0460/pRS313酿酒酵母质粒 |
| P2959/pRS313-TEF-CYC1酿酒酵母质粒 |
| P0461/pRS314酿酒酵母质粒 |
| P0462/pRS315酿酒酵母质粒 |
| P2964/pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒 |
| P0463/pRS316酿酒酵母质粒 |
| P0225/pRS403酿酒酵母质粒 |
| P0457/pRS423酿酒酵母质粒 |
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文献和实验, we may find much more references regarding this issue. http://books.google.com/books?id=3mgPzNFjcWAC&pg=PA51&lpg=PA51&dq=gsk+tyrosine+phosphorylation+and+activity&source=bl&ots=x5ueTldpez&sig=CqRFJleXtEBn9OfelhODPAc28xs&hl=en&ei=KerNSu-XGcem8Abm-qmABA&sa=X&oi=book_result&ct
CD11a/CD11b/CD11c 分子 CDlla 常用单克隆抗体或代号：MHM24， 2F12； CRIS―3(LFA―lα链，整合素α1) 主要表达细胞：Leu[A5] 分子质量(kDa)和结构：spl80(整合素α) 功 能：与1CAM-l(CD54)、ICAM-2(CDl02)、ICAM-3(C1350)结合，介导细胞黏附；与JAMl结合，参与白细胞穿过内皮细胞
差，在本试验中所使用pPICZαA质粒，其信号肽来自酿酒酵母的α-交配因子（α-factor），能很好的达到以上的要求。并且作为新一代的毕赤酵母分泌表达质粒，它还拥有一个特点是其具有Zeocin抗性标记基因，给我们筛选转化子的工作带来很大的便利［1、9］。 pPICZαA质粒是作为新一代的毕赤酵母分泌表达质粒，它的主要特点简介如下： ⑴ 具有强效可调控启动子AOX1（alcohol oxidase，醇氧化酶）； ⑵ 具有Zeocin抗性筛选标记基因，重组转化子可直接用Zeocin进行筛选
