核酸去除剂,N

荧光的淬灭及抗淬灭

剂。如卤素离子、重金属离子、具有氧化性的有机化合物(硝基化合物、重氮化合物、羰基化合物和羟基化合物)及氧分子等。 2)荧光的抗淬灭：标记样品的荧光淬灭是在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察时遇到的主要问题。由于激光扫描共聚焦显微镜具有更强的功率和聚焦更准确的光束，与普通荧光显微镜相比，标本的光漂白作用更为明显，荧光素的荧光可在连续观察过程中逐渐减弱或消失。因此，应考虑使用抗荧光淬灭剂(抗荧光衰减剂)。常用抗荧光淬灭剂有P-苯二胺(Para-phenylene diamine，PPD)、n-丙基

领域奠基之作：Cell 重磅报道可胞外展示的糖基化修饰 RNA——glycoRNA

J2 可以结合 Y5 等 glycoRNA 的 RNA 成分后，研究人员建立了流式细胞术检测细胞表面 RNA。结果发现约 20% 的 HeLa 细胞在 J2 染色中是阳性，用 RNase A 预处理导致结合被清除，而添加 RNase A 蛋白抑制剂则恢复。进一步检测使用糖基化抑制剂处理细胞后，观察 J2 与细胞表面结合的量依赖性损失，这也之前结果一致，表明被 J2 抗体识别的细胞表面 RNA 依赖于 N - 糖基化进行细胞表面定位。为了进一步确定 glycoRNA 是否与多糖结合受体相互作用，研究

免疫共沉淀实验指南

原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体，孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠，若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N，就可以形成这样一种复合物：“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”，经 SDS