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pMD2.G慢病毒包装质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P0262
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Plasmid#12259;VSVG

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pMD2.G慢病毒包装质粒
    别称: Plasmid#12259;VSVG
    启动子: CMV
    复制子: pUC
    终止子: beta-globin poly(A)
    质粒分类: 病毒系列,慢病毒包装载体
    质粒大小: 5822bp
    质粒标签: VSV-G
    原核抗性: Amp
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    表达宿主: 哺乳细胞
    诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
    5'测序引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
    3'测序引物: 根据序列设计引物

    质粒属性
    载体宿主: 哺乳细胞,慢病毒
    载体用途: 包装辅助
    基因种属: 病毒
    基因类型: ORF
    原核抗性: Amp
    筛选标记:  
    荧光蛋白:


    质粒简介
    产品细节图片1

    质粒图谱
    产品细节图片2

    质粒序列
    LOCUS       Exported                5822 bp ds-DNA     circular SYN 24-OCT-2016
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    Untitled 3
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 5822)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Monday, October 24, 2016 from SnapGene Viewer 3.2.1
                http://www.snapgenemialingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..5822
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         polyA_site      1048..1442
                         /note="beta-globin poly(A)"
                         /note="human beta-globin polyadenylation signal"
         rep_origin      complement(1952..2540)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(2711..3571)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(3572..3676)
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
         enhancer        3867..4246
                         /note="CMV enhancer"
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        4247..4450
                         /note="CMV promoter"
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         intron          4584..5059
                         /note="beta-globin intron"
                         /note="internally truncated intron from human beta-globin"
         CDS             5134..847
                         /codon_start=1
                         /product="vesicular stomatitis virus G glycoprotein"
                         /note="VSV-G"
                         /note="Indiana strain"
                         /translation="MKCLLYLAFLFIGVNCKFTIVFPHNQKGNWKNVPSNYHYCPSSSD
                         LNWHNDLIGTALQVKMPKSHKAIQADGWMCHASKWVTTCDFRWYGPKYITHSIRSFTPS
                         VEQCKESIEQTKQGTWLNPGFPPQSCGYATVTDAEAVIVQVTPHHVLVDEYTGEWVDSQ
                         FINGKCSNYICPTVHNSTTWHSDYKVKGLCDSNLISMDITFFSEDGELSSLGKEGTGFR
                         SNYFAYETGGKACKMQYCKHWGVRLPSGVWFEMADKDLFAAARFPECPEGSSISAPSQT
                         SVDVSLIQDVERILDYSLCQETWSKIRAGLPISPVDLSYLAPKNPGTGPAFTIINGTLK
                         YFETRYIRVDIAAPILSRMVGMISGTTTERELWDDWAPYEDVEIGPNGVLRTSSGYKFP
                         LYMIGHGMLDSDLHLSSKAQVFEHPHIQDAASQLPDDESLFFGDTGLSKNPIELVEGWF
                         SSWKSSIASFFFIIGLIIGLFLVLRVGIHLCIKLKHTKKRQIYTDIEMNRLGK"
    ORIGIN
            1 tggaggcaag gcctgcaaaa tgcaatactg caagcattgg ggagtcagac tcccatcagg
           61 tgtctggttc gagatggctg ataaggatct ctttgctgca gccagattcc ctgaatgccc
          121 agaagggtca agtatctctg ctccatctca gacctcagtg gatgtaagtc taattcagga
          181 cgttgagagg atcttggatt attccctctg ccaagaaacc tggagcaaaa tcagagcggg
          241 tcttccaatc tctccagtgg atctcagcta tcttgctcct aaaaacccag gaaccggtcc
          301 tgctttcacc ataatcaatg gtaccctaaa atactttgag accagataca tcagagtcga
          361 tattgctgct ccaatcctct caagaatggt cggaatgatc agtggaacta ccacagaaag
          421 ggaactgtgg gatgactggg caccatatga agacgtggaa attggaccca atggagttct
          481 gaggaccagt tcaggatata agtttccttt atacatgatt ggacatggta tgttggactc
          541 cgatcttcat cttagctcaa aggctcaggt gttcgaacat cctcacattc aagacgctgc
          601 ttcgcaactt cctgatgatg agagtttatt ttttggtgat actgggctat ccaaaaatcc
          661 aatcgagctt gtagaaggtt ggttcagtag ttggaaaagc tctattgcct cttttttctt
          721 tatcataggg ttaatcattg gactattctt ggttctccga gttggtatcc atctttgcat
          781 taaattaaag cacaccaaga aaagacagat ttatacagac atagagatga accgacttgg
          841 aaagtaactc aaatcctgca caacagattc ttcatgtttg gaccaaatca acttgtgata
          901 ccatgctcaa agaggcctca attatatttg agtttttaat ttttatgaaa aaaaaaaaaa
          961 aaaacggaat tcaccccacc agtgcaggct gcctatcaga aagtggtggc tggtgtggct
         1021 aatgccctgg cccacaagta tcactaagct cgctttcttg ctgtccaatt tctattaaag
         1081 gttcctttgt tccctaagtc caactactaa actgggggat attatgaagg gccttgagca
         1141 tctggattct gcctaataaa aaacatttat tttcattgca atgatgtatt taaattattt
         1201 ctgaatattt tactaaaaag ggaatgtggg aggtcagtgc atttaaaaca taaagaaatg
         1261 aagagctagt tcaaaccttg ggaaaataca ctatatctta aactccatga aagaaggtga
         1321 ggctgcaaac agctaatgca cattggcaac agcccctgat gcctatgcct tattcatccc
         1381 tcagaaaagg attcaagtag aggcttgatt tggaggttaa agttttgcta tgctgtattt
         1441 tacattactt attgttttag ctgtcctcat gaatgtcttt tcactaccca tttgcttatc
         1501 ctgcatctct cagccttgac tccactcagt tctcttgctt agagatacca cctttcccct
         1561 gaagtgttcc ttccatgttt tacggcgaga tggtttctcc tcgcctggcc actcagcctt
         1621 agttgtctct gttgtcttat agaggtctac ttgaagaagg aaaaacaggg ggcatggttt
         1681 gactgtcctg tgagcccttc ttccctgcct cccccactca cagtgacccg gaatccctcg
         1741 acatggcagt ctagcactag tgcggccgca gatctgcttc ctcgctcact gactcgctgc
         1801 gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat
         1861 ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca
         1921 ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc
         1981 atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc
         2041 aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg
         2101 gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta
         2161 ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg
         2221 ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac
         2281 acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag
         2341 gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga agaacagtat
         2401 ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat
         2461 ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc
         2521 gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct gacgctcagt
         2581 ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt atcaaaaagg atcttcacct
         2641 agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat gagtaaactt
         2701 ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc tgtctatttc
         2761 gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac tacgatacgg gagggcttac
         2821 catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct ccagatttat
         2881 cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca actttatccg
         2941 cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg ccagttaata
         3001 gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt gtcacgctcg tcgtttggta
         3061 tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc cccatgttgt
         3121 gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt cagaagtaag ttggccgcag
         3181 tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg ccatccgtaa
         3241 gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag tgtatgcggc
         3301 gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat agcagaactt
         3361 taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg atcttaccgc
         3421 tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca gcatctttta
         3481 ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca aaaaagggaa
         3541 taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct ttttcaatat tattgaagca
         3601 tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag aaaaataaac
         3661 aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgacgtggat cccctgaggg
         3721 ggcccccatg ggctagagga tccggcctcg gcctctgcat aaataaaaaa aattagtcag
         3781 ccatgagctt ggcccattgc atacgttgta tccatatcat aatatgtaca tttatattgg
         3841 ctcatgtcca acattaccgc catgttgaca ttgattattg actagttatt aatagtaatc
         3901 aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc cgcgttacat aacttacggt
         3961 aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta
         4021 tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg
         4081 gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga
         4141 cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt
         4201 tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga tgcggttttg
         4261 gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc
         4321 cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg
         4381 taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat
         4441 aagcagagct cgtttagtga accgtcagat cgcctggaga cgccatccac gctgttttga
         4501 cctccataga agacaccggg accgatccag cctcccctcg aagcttacat gtggtaccga
         4561 gctcggatcc tgagaacttc agggtgagtc tatgggaccc ttgatgtttt ctttcccctt
         4621 cttttctatg gttaagttca tgtcatagga aggggagaag taacagggta cacatattga
         4681 ccaaatcagg gtaattttgc atttgtaatt ttaaaaaatg ctttcttctt ttaatatact
         4741 tttttgttta tcttatttct aatactttcc ctaatctctt tctttcaggg caataatgat
         4801 acaatgtatc atgcctcttt gcaccattct aaagaataac agtgataatt tctgggttaa
         4861 ggcaatagca atatttctgc atataaatat ttctgcatat aaattgtaac tgatgtaaga
         4921 ggtttcatat tgctaatagc agctacaatc cagctaccat tctgctttta ttttatggtt
         4981 gggataaggc tggattattc tgagtccaag ctaggccctt ttgctaatca tgttcatacc
         5041 tcttatcttc ctcccacagc tcctgggcaa cgtgctggtc tgtgtgctgg cccatcactt
         5101 tggcaaagca cgtgagatct gaattctgac actatgaagt gccttttgta cttagccttt
         5161 ttattcattg gggtgaattg caagttcacc atagtttttc cacacaacca aaaaggaaac
         5221 tggaaaaatg ttccttctaa ttaccattat tgcccgtcaa gctcagattt aaattggcat
         5281 aatgacttaa taggcacagc cttacaagtc aaaatgccca agagtcacaa ggctattcaa
         5341 gcagacggtt ggatgtgtca tgcttccaaa tgggtcacta cttgtgattt ccgctggtat
         5401 ggaccgaagt atataacaca ttccatccga tccttcactc catctgtaga acaatgcaag
         5461 gaaagcattg aacaaacgaa acaaggaact tggctgaatc caggcttccc tcctcaaagt
         5521 tgtggatatg caactgtgac ggatgccgaa gcagtgattg tccaggtgac tcctcaccat
         5581 gtgctggttg atgaatacac aggagaatgg gttgattcac agttcatcaa cggaaaatgc
         5641 agcaattaca tatgccccac tgtccataac tctacaacct ggcattctga ctataaggtc
         5701 aaagggctat gtgattctaa cctcatttcc atggacatca ccttcttctc agaggacgga
         5761 gagctatcat ccctgggaaa ggagggcaca gggttcagaa gtaactactt tgcttatgaa
         5821 ac
    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片3
    产品细节图片4
    P0136/pEGFP-C3哺乳荧光质粒
    P0945/pEGFP-N1-FLAG哺乳荧光质粒
    P0443/pEGFP-EcoRV哺乳荧光质粒
    P1331/pEGFP-N1-Myc-6×His-FLAG哺乳荧光质粒
    P0138/pACGFP1-N1哺乳荧光质粒
    P0959/pcDNA3 GFP LIC cloning vector (6D)哺乳荧光质粒
    P0916/pCMV-EGFP-HA-C哺乳荧光质粒
    P1254/pIRES-hrGFP-1a哺乳荧光质粒
    P0796/pIRES2-ZsGreen1哺乳荧光质粒
    P0149/pIRES2-EGFP哺乳荧光质粒
    P1252/pIRES2-AcGFP1哺乳荧光质粒

     

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