- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0251
- 2025年07月16日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pLVX-AcGFP1-N1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达质粒
别称: pLVX-AcGFP1-N1
质粒属性
质粒简介
plvx-acgfp1-n1是HIV-1，慢病毒表达载体，允许你表达你感兴趣的基因融合绿色荧光蛋白AcGFP1，来自Aequorea coerulescens。基因克隆到多克隆位点（MCS），位于上游的AcGFP1编码序列，表示为N端融合的AcGFP1蛋白融合蛋白的表达是由组成型活性的人类巨细胞病毒驱动早期启动子（CMV）位于上游的MCS。慢病毒颗粒来自矢量允许AcGFP1融合蛋白在几乎任何类型的细胞表达，包括原代细胞。的unmodifi ED向量表示AcGFP1，并可用于生产标记病毒感染协议优化。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8787 bp ds-DNA circular SYN 27-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 23
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8787)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Saturday, August 27, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8787
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
LTR 1..634
/note="3' LTR"
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
misc_feature 681..806
/note="HIV-1 Psi"
/note="packaging signal of human immunodeficiency virus
type 1"
misc_feature 1303..1536
/note="RRE"
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
misc_feature 2028..2143
/note="cPPT/CTS"
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1 (lacking the first T)"
enhancer 2201..2504
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 2505..2708
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 2793..2873
/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
CDS 2875..3594
/codon_start=1
/product="Aequorea coerulescens GFP"
/note="AcGFP1"
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGAELFTGIVPILIELNGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLSYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYIQERTIFFEDD
GNYKSRAEVKFEGDTLVNRIELTGTDFKEDGNILGNKMEYNYNAHNVYIMTDKAKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMIYF
GFVTAAAITHGMDELYK"
promoter 3622..4121
/note="PGK promoter"
/note="mouse phosphoglycerate kinase 1 promoter"
CDS 4142..4741
/codon_start=1
/gene="pac from Streptomyces alboniger"
/product="puromycin N-acetyltransferase"
/note="PuroR"
/note="confers resistance to puromycin"
/translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER
VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA
AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS
APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"
misc_feature 4755..5343
/note="WPRE"
/note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional
regulatory element"
CDS complement(5226..5237)
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/note="Factor Xa site"
/translation="IEGR"
LTR 5550..6183
/note="3' LTR"
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
primer_bind complement(6312..6328)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 6336..6352
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(6360..6390)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 6405..6426
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(6714..7302)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7473..8333)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(8334..8438)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
polyA_signal 8486..8620
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
ORIGIN
1 tggaagggct aattcactcc caaagaagac aagatatcct tgatctgtgg atctaccaca
61 cacaaggcta cttccctgat tagcagaact acacaccagg gccaggggtc agatatccac
121 tgacctttgg atggtgctac aagctagtac cagttgagcc agataaggta gaagaggcca
181 ataaaggaga gaacaccagc ttgttacacc ctgtgagcct gcatgggatg gatgacccgg
241 agagagaagt gttagagtgg aggtttgaca gccgcctagc atttcatcac gtggcccgag
301 agctgcatcc ggagtacttc aagaactgct gatatcgagc ttgctacaag ggactttccg
361 ctggggactt tccagggagg cgtggcctgg gcgggactgg ggagtggcga gccctcagat
421 cctgcatata agcagctgct ttttgcctgt actgggtctc tctggttaga ccagatctga
481 gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta agcctcaata aagcttgcct
541 tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact ctggtaacta gagatccctc
601 agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg cccgaacagg gacttgaaag
661 cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg gcttgctgaa gcgcgcacgg
721 caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat tttgactagc ggaggctaga
781 aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg gagaattaga tcgcgatggg
841 aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa attaaaacat atagtatggg
901 caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct gttagaaaca tcagaaggct
961 gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac aggatcagaa gaacttagat
1021 cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca aaggatagag ataaaagaca
1081 ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa aagtaagacc accgcacagc
1141 aagcggccgg ccgctgatct tcagacctgg aggaggagat atgagggaca attggagaag
1201 tgaattatat aaatataaag tagtaaaaat tgaaccatta ggagtagcac ccaccaaggc
1261 aaagagaaga gtggtgcaga gagaaaaaag agcagtggga ataggagctt tgttccttgg
1321 gttcttggga gcagcaggaa gcactatggg cgcagcgtca atgacgctga cggtacaggc
1381 cagacaatta ttgtctggta tagtgcagca gcagaacaat ttgctgaggg ctattgaggc
1441 gcaacagcat ctgttgcaac tcacagtctg gggcatcaag cagctccagg caagaatcct
1501 ggctgtggaa agatacctaa aggatcaaca gctcctgggg atttggggtt gctctggaaa
1561 actcatttgc accactgctg tgccttggaa tgctagttgg agtaataaat ctctggaaca
1621 gatttggaat cacacgacct ggatggagtg ggacagagaa attaacaatt acacaagctt
1681 aatacactcc ttaattgaag aatcgcaaaa ccagcaagaa aagaatgaac aagaattatt
1741 ggaattagat aaatgggcaa gtttgtggaa ttggtttaac ataacaaatt ggctgtggta
1801 tataaaatta ttcataatga tagtaggagg cttggtaggt ttaagaatag tttttgctgt
1861 actttctata gtgaatagag ttaggcaggg atattcacca ttatcgtttc agacccacct
1921 cccaaccccg aggggacccg acaggcccga aggaatagaa gaagaaggtg gagagagaga
1981 cagagacaga tccattcgat tagtgaacgg atctcgacgg tatcgccttt aaaagaaaag
2041 gggggattgg ggggtacagt gcaggggaaa gaatagtaga cataatagca acagacatac
2101 aaactaaaga attacaaaaa caaattacaa aaattcaaaa ttttcgggtt tattacaggg
2161 acagcagaga tccagtttat cgataagctt gggagttccg cgttacataa cttacggtaa
2221 atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg
2281 ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca atgggtggag tatttacggt
2341 aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg
2401 tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta catgacctta tgggactttc
2461 ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac catggtgatg cggttttggc
2521 agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg atttccaagt ctccacccca
2581 ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta
2641 acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa
2701 gcagagctcg tttagtgaac cgtcagatcg cctggagacg ccatccacgc tgttttgacc
2761 tccatagaag acaccgactc tactagagga tcgctagcgc taccggactc agatctcgag
2821 ctcaagcttc gaattctgca gtcgacggta ccgcgggccc gggatccacc ggtcatggtg
2881 agcaagggcg ccgagctgtt caccggcatc gtgcccatcc tgatcgagct gaatggcgat
2941 gtgaatggcc acaagttcag cgtgagcggc gagggcgagg gcgatgccac ctacggcaag
3001 ctgaccctga agttcatctg caccaccggc aagctgcctg tgccctggcc caccctggtg
3061 accaccctga gctacggcgt gcagtgcttc tcacgctacc ccgatcacat gaagcagcac
3121 gacttcttca agagcgccat gcctgagggc tacatccagg agcgcaccat cttcttcgag
3181 gatgacggca actacaagtc gcgcgccgag gtgaagttcg agggcgatac cctggtgaat
3241 cgcatcgagc tgaccggcac cgatttcaag gaggatggca acatcctggg caataagatg
3301 gagtacaact acaacgccca caatgtgtac atcatgaccg acaaggccaa gaatggcatc
3361 aaggtgaact tcaagatccg ccacaacatc gaggatggca gcgtgcagct ggccgaccac
3421 taccagcaga atacccccat cggcgatggc cctgtgctgc tgcccgataa ccactacctg
3481 tccacccaga gcgccctgtc caaggacccc aacgagaagc gcgatcacat gatctacttc
3541 ggcttcgtga ccgccgccgc catcacccac ggcatggatg agctgtacaa gtgagcggcc
3601 gcgactctag ataattctac cgggtagggg aggcgctttt cccaaggcag tctggagcat
3661 gcgctttagc agccccgctg ggcacttggc gctacacaag tggcctctgg cctcgcacac
3721 attccacatc caccggtagg cgccaaccgg ctccgttctt tggtggcccc ttcgcgccac
3781 cttctactcc tcccctagtc aggaagttcc cccccgcccc gcagctcgcg tcgtgcagga
3841 cgtgacaaat ggaagtagca cgtctcacta gtctcgtgca gatggacagc accgctgagc
3901 aatggaagcg ggtaggcctt tggggcagcg gccaatagca gctttgctcc ttcgctttct
3961 gggctcagag gctgggaagg ggtgggtccg ggggcgggct caggggcggg ctcaggggcg
4021 gggcgggcgc ccgaaggtcc tccggaggcc cggcattctg cacgcttcaa aagcgcacgt
4081 ctgccgcgct gttctcctct tcctcatctc cgggcctttc gacctgcagc ccaagcttac
4141 catgaccgag tacaagccca cggtgcgcct cgccacccgc gacgacgtcc ccagggccgt
4201 acgcaccctc gccgccgcgt tcgccgacta ccccgccacg cgccacaccg tcgatccgga
4261 ccgccacatc gagcgggtca ccgagctgca agaactcttc ctcacgcgcg tcgggctcga
4321 catcggcaag gtgtgggtcg cggacgacgg cgccgcggtg gcggtctgga ccacgccgga
4381 gagcgtcgaa gcgggggcgg tgttcgccga gatcggcccg cgcatggccg agttgagcgg
4441 ttcccggctg gccgcgcagc aacagatgga aggcctcctg gcgccgcacc ggcccaagga
4501 gcccgcgtgg ttcctggcca ccgtcggcgt ctcgcccgac caccagggca agggtctggg
4561 cagcgccgtc gtgctccccg gagtggaggc ggccgagcgc gccggggtgc ccgccttcct
4621 ggagacctcc gcgccccgca acctcccctt ctacgagcgg ctcggcttca ccgtcaccgc
4681 cgacgtcgag gtgcccgaag gaccgcgcac ctggtgcatg acccgcaagc ccggtgcctg
4741 accgcgtctg gaacaatcaa cctctggatt acaaaatttg tgaaagattg actggtattc
4801 ttaactatgt tgctcctttt acgctatgtg gatacgctgc tttaatgcct ttgtatcatg
4861 ctattgcttc ccgtatggct ttcattttct cctccttgta taaatcctgg ttgctgtctc
4921 tttatgagga gttgtggccc gttgtcaggc aacgtggcgt ggtgtgcact gtgtttgctg
4981 acgcaacccc cactggttgg ggcattgcca ccacctgtca gctcctttcc gggactttcg
5041 ctttccccct ccctattgcc acggcggaac tcatcgccgc ctgccttgcc cgctgctgga
5101 caggggctcg gctgttgggc actgacaatt ccgtggtgtt gtcggggaag ctgacgtcct
5161 ttccatggct gctcgcctgt gttgccacct ggattctgcg cgggacgtcc ttctgctacg
5221 tcccttcggc cctcaatcca gcggaccttc cttcccgcgg cctgctgccg gctctgcggc
5281 ctcttccgcg tcttcgcctt cgccctcaga cgagtcggat ctccctttgg gccgcctccc
5341 cgcctggaat taattctgca gtcgagacct agaaaaacat ggagcaatca caagtagcaa
5401 tacagcagct accaatgctg attgtgcctg gctagaagca caagaggagg aggaggtggg
5461 ttttccagtc acacctcagg tacctttaag accaatgact tacaaggcag ctgtagatct
5521 tagccacttt ttaaaagaaa agaggggact ggaagggcta attcactccc aacgaagaca
5581 agatatcctt gatctgtgga tctaccacac acaaggctac ttccctgatt agcagaacta
5641 cacaccaggg ccaggggtca gatatccact gacctttgga tggtgctaca agctagtacc
5701 agttgagcca gataaggtag aagaggccaa taaaggagag aacaccagct tgttacaccc
5761 tgtgagcctg catgggatgg atgacccgga gagagaagtg ttagagtgga ggtttgacag
5821 ccgcctagca tttcatcacg tggcccgaga gctgcatccg gagtacttca agaactgctg
5881 atatcgagct tgctacaagg gactttccgc tggggacttt ccagggaggc gtggcctggg
5941 cgggactggg gagtggcgag ccctcagatc ctgcatataa gcagctgctt tttgcctgta
6001 ctgggtctct ctggttagac cagatctgag cctgggagct ctctggctaa ctagggaacc
6061 cactgcttaa gcctcaataa agcttgcctt gagtgcttca agtagtgtgt gcccgtctgt
6121 tgtgtgactc tggtaactag agatccctca gaccctttta gtcagtgtgg aaaatctcta
6181 gcagtagtag ttcatgtcat cttattattc agtatttata acttgcaaag aaatgaatat
6241 cagagagtga gaggccttga cattgctagc gttttaccgt cgacctctag ctagagcttg
6301 gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac
6361 aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc
6421 acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg
6481 cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct
6541 tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac
6601 tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga
6661 gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat
6721 aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac
6781 ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct
6841 gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg
6901 ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg
6961 ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt
7021 cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg
7081 attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac
7141 ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga
7201 aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt
7261 gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt
7321 tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga
7381 ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc
7441 taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct
7501 atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata
7561 actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca
7621 cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga
7681 agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga
7741 gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg
7801 gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga
7861 gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt
7921 gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct
7981 cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca
8041 ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat
8101 accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga
8161 aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc
8221 aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg
8281 caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc
8341 ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt
8401 gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca
8461 cctgacgtcg acggatcggg agatcaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata
8521 aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg
8581 tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca tgtctggatc aactggataa ctcaagctaa
8641 ccaaaatcat cccaaacttc ccaccccata ccctattacc actgccaatt acctgtggtt
8701 tcatttactc taaacctgtg attcctctga attattttca ttttaaagaa attgtatttg
8761 ttaaatatgt actacaaact tagtagt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达质粒
别称: pLVX-AcGFP1-N1
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 病毒系列，慢病毒克隆载体 |
| 质粒大小: | 8787bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 真核抗性: | Puro |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 质粒宿主： | 哺乳细胞,慢病毒 |
|---|---|
| 质粒用途： | 蛋白表达 |
| 片段类型： | ORF |
| 片段物种： | 空载体 |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | Puro |
| 荧光标记： | 绿色 |
质粒简介
plvx-acgfp1-n1是HIV-1，慢病毒表达载体，允许你表达你感兴趣的基因融合绿色荧光蛋白AcGFP1，来自Aequorea coerulescens。基因克隆到多克隆位点（MCS），位于上游的AcGFP1编码序列，表示为N端融合的AcGFP1蛋白融合蛋白的表达是由组成型活性的人类巨细胞病毒驱动早期启动子（CMV）位于上游的MCS。慢病毒颗粒来自矢量允许AcGFP1融合蛋白在几乎任何类型的细胞表达，包括原代细胞。的unmodifi ED向量表示AcGFP1，并可用于生产标记病毒感染协议优化。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8787 bp ds-DNA circular SYN 27-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 23
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8787)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Saturday, August 27, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8787
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
LTR 1..634
/note="3' LTR"
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
misc_feature 681..806
/note="HIV-1 Psi"
/note="packaging signal of human immunodeficiency virus
type 1"
misc_feature 1303..1536
/note="RRE"
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
misc_feature 2028..2143
/note="cPPT/CTS"
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1 (lacking the first T)"
enhancer 2201..2504
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 2505..2708
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 2793..2873
/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
CDS 2875..3594
/codon_start=1
/product="Aequorea coerulescens GFP"
/note="AcGFP1"
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGAELFTGIVPILIELNGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLSYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYIQERTIFFEDD
GNYKSRAEVKFEGDTLVNRIELTGTDFKEDGNILGNKMEYNYNAHNVYIMTDKAKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMIYF
GFVTAAAITHGMDELYK"
promoter 3622..4121
/note="PGK promoter"
/note="mouse phosphoglycerate kinase 1 promoter"
CDS 4142..4741
/codon_start=1
/gene="pac from Streptomyces alboniger"
/product="puromycin N-acetyltransferase"
/note="PuroR"
/note="confers resistance to puromycin"
/translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER
VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA
AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS
APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"
misc_feature 4755..5343
/note="WPRE"
/note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional
regulatory element"
CDS complement(5226..5237)
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/note="Factor Xa site"
/translation="IEGR"
LTR 5550..6183
/note="3' LTR"
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
primer_bind complement(6312..6328)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 6336..6352
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(6360..6390)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 6405..6426
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(6714..7302)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7473..8333)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(8334..8438)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
polyA_signal 8486..8620
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
ORIGIN
1 tggaagggct aattcactcc caaagaagac aagatatcct tgatctgtgg atctaccaca
61 cacaaggcta cttccctgat tagcagaact acacaccagg gccaggggtc agatatccac
121 tgacctttgg atggtgctac aagctagtac cagttgagcc agataaggta gaagaggcca
181 ataaaggaga gaacaccagc ttgttacacc ctgtgagcct gcatgggatg gatgacccgg
241 agagagaagt gttagagtgg aggtttgaca gccgcctagc atttcatcac gtggcccgag
301 agctgcatcc ggagtacttc aagaactgct gatatcgagc ttgctacaag ggactttccg
361 ctggggactt tccagggagg cgtggcctgg gcgggactgg ggagtggcga gccctcagat
421 cctgcatata agcagctgct ttttgcctgt actgggtctc tctggttaga ccagatctga
481 gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta agcctcaata aagcttgcct
541 tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact ctggtaacta gagatccctc
601 agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg cccgaacagg gacttgaaag
661 cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg gcttgctgaa gcgcgcacgg
721 caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat tttgactagc ggaggctaga
781 aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg gagaattaga tcgcgatggg
841 aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa attaaaacat atagtatggg
901 caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct gttagaaaca tcagaaggct
961 gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac aggatcagaa gaacttagat
1021 cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca aaggatagag ataaaagaca
1081 ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa aagtaagacc accgcacagc
1141 aagcggccgg ccgctgatct tcagacctgg aggaggagat atgagggaca attggagaag
1201 tgaattatat aaatataaag tagtaaaaat tgaaccatta ggagtagcac ccaccaaggc
1261 aaagagaaga gtggtgcaga gagaaaaaag agcagtggga ataggagctt tgttccttgg
1321 gttcttggga gcagcaggaa gcactatggg cgcagcgtca atgacgctga cggtacaggc
1381 cagacaatta ttgtctggta tagtgcagca gcagaacaat ttgctgaggg ctattgaggc
1441 gcaacagcat ctgttgcaac tcacagtctg gggcatcaag cagctccagg caagaatcct
1501 ggctgtggaa agatacctaa aggatcaaca gctcctgggg atttggggtt gctctggaaa
1561 actcatttgc accactgctg tgccttggaa tgctagttgg agtaataaat ctctggaaca
1621 gatttggaat cacacgacct ggatggagtg ggacagagaa attaacaatt acacaagctt
1681 aatacactcc ttaattgaag aatcgcaaaa ccagcaagaa aagaatgaac aagaattatt
1741 ggaattagat aaatgggcaa gtttgtggaa ttggtttaac ataacaaatt ggctgtggta
1801 tataaaatta ttcataatga tagtaggagg cttggtaggt ttaagaatag tttttgctgt
1861 actttctata gtgaatagag ttaggcaggg atattcacca ttatcgtttc agacccacct
1921 cccaaccccg aggggacccg acaggcccga aggaatagaa gaagaaggtg gagagagaga
1981 cagagacaga tccattcgat tagtgaacgg atctcgacgg tatcgccttt aaaagaaaag
2041 gggggattgg ggggtacagt gcaggggaaa gaatagtaga cataatagca acagacatac
2101 aaactaaaga attacaaaaa caaattacaa aaattcaaaa ttttcgggtt tattacaggg
2161 acagcagaga tccagtttat cgataagctt gggagttccg cgttacataa cttacggtaa
2221 atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg
2281 ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca atgggtggag tatttacggt
2341 aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg
2401 tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta catgacctta tgggactttc
2461 ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac catggtgatg cggttttggc
2521 agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg atttccaagt ctccacccca
2581 ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta
2641 acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa
2701 gcagagctcg tttagtgaac cgtcagatcg cctggagacg ccatccacgc tgttttgacc
2761 tccatagaag acaccgactc tactagagga tcgctagcgc taccggactc agatctcgag
2821 ctcaagcttc gaattctgca gtcgacggta ccgcgggccc gggatccacc ggtcatggtg
2881 agcaagggcg ccgagctgtt caccggcatc gtgcccatcc tgatcgagct gaatggcgat
2941 gtgaatggcc acaagttcag cgtgagcggc gagggcgagg gcgatgccac ctacggcaag
3001 ctgaccctga agttcatctg caccaccggc aagctgcctg tgccctggcc caccctggtg
3061 accaccctga gctacggcgt gcagtgcttc tcacgctacc ccgatcacat gaagcagcac
3121 gacttcttca agagcgccat gcctgagggc tacatccagg agcgcaccat cttcttcgag
3181 gatgacggca actacaagtc gcgcgccgag gtgaagttcg agggcgatac cctggtgaat
3241 cgcatcgagc tgaccggcac cgatttcaag gaggatggca acatcctggg caataagatg
3301 gagtacaact acaacgccca caatgtgtac atcatgaccg acaaggccaa gaatggcatc
3361 aaggtgaact tcaagatccg ccacaacatc gaggatggca gcgtgcagct ggccgaccac
3421 taccagcaga atacccccat cggcgatggc cctgtgctgc tgcccgataa ccactacctg
3481 tccacccaga gcgccctgtc caaggacccc aacgagaagc gcgatcacat gatctacttc
3541 ggcttcgtga ccgccgccgc catcacccac ggcatggatg agctgtacaa gtgagcggcc
3601 gcgactctag ataattctac cgggtagggg aggcgctttt cccaaggcag tctggagcat
3661 gcgctttagc agccccgctg ggcacttggc gctacacaag tggcctctgg cctcgcacac
3721 attccacatc caccggtagg cgccaaccgg ctccgttctt tggtggcccc ttcgcgccac
3781 cttctactcc tcccctagtc aggaagttcc cccccgcccc gcagctcgcg tcgtgcagga
3841 cgtgacaaat ggaagtagca cgtctcacta gtctcgtgca gatggacagc accgctgagc
3901 aatggaagcg ggtaggcctt tggggcagcg gccaatagca gctttgctcc ttcgctttct
3961 gggctcagag gctgggaagg ggtgggtccg ggggcgggct caggggcggg ctcaggggcg
4021 gggcgggcgc ccgaaggtcc tccggaggcc cggcattctg cacgcttcaa aagcgcacgt
4081 ctgccgcgct gttctcctct tcctcatctc cgggcctttc gacctgcagc ccaagcttac
4141 catgaccgag tacaagccca cggtgcgcct cgccacccgc gacgacgtcc ccagggccgt
4201 acgcaccctc gccgccgcgt tcgccgacta ccccgccacg cgccacaccg tcgatccgga
4261 ccgccacatc gagcgggtca ccgagctgca agaactcttc ctcacgcgcg tcgggctcga
4321 catcggcaag gtgtgggtcg cggacgacgg cgccgcggtg gcggtctgga ccacgccgga
4381 gagcgtcgaa gcgggggcgg tgttcgccga gatcggcccg cgcatggccg agttgagcgg
4441 ttcccggctg gccgcgcagc aacagatgga aggcctcctg gcgccgcacc ggcccaagga
4501 gcccgcgtgg ttcctggcca ccgtcggcgt ctcgcccgac caccagggca agggtctggg
4561 cagcgccgtc gtgctccccg gagtggaggc ggccgagcgc gccggggtgc ccgccttcct
4621 ggagacctcc gcgccccgca acctcccctt ctacgagcgg ctcggcttca ccgtcaccgc
4681 cgacgtcgag gtgcccgaag gaccgcgcac ctggtgcatg acccgcaagc ccggtgcctg
4741 accgcgtctg gaacaatcaa cctctggatt acaaaatttg tgaaagattg actggtattc
4801 ttaactatgt tgctcctttt acgctatgtg gatacgctgc tttaatgcct ttgtatcatg
4861 ctattgcttc ccgtatggct ttcattttct cctccttgta taaatcctgg ttgctgtctc
4921 tttatgagga gttgtggccc gttgtcaggc aacgtggcgt ggtgtgcact gtgtttgctg
4981 acgcaacccc cactggttgg ggcattgcca ccacctgtca gctcctttcc gggactttcg
5041 ctttccccct ccctattgcc acggcggaac tcatcgccgc ctgccttgcc cgctgctgga
5101 caggggctcg gctgttgggc actgacaatt ccgtggtgtt gtcggggaag ctgacgtcct
5161 ttccatggct gctcgcctgt gttgccacct ggattctgcg cgggacgtcc ttctgctacg
5221 tcccttcggc cctcaatcca gcggaccttc cttcccgcgg cctgctgccg gctctgcggc
5281 ctcttccgcg tcttcgcctt cgccctcaga cgagtcggat ctccctttgg gccgcctccc
5341 cgcctggaat taattctgca gtcgagacct agaaaaacat ggagcaatca caagtagcaa
5401 tacagcagct accaatgctg attgtgcctg gctagaagca caagaggagg aggaggtggg
5461 ttttccagtc acacctcagg tacctttaag accaatgact tacaaggcag ctgtagatct
5521 tagccacttt ttaaaagaaa agaggggact ggaagggcta attcactccc aacgaagaca
5581 agatatcctt gatctgtgga tctaccacac acaaggctac ttccctgatt agcagaacta
5641 cacaccaggg ccaggggtca gatatccact gacctttgga tggtgctaca agctagtacc
5701 agttgagcca gataaggtag aagaggccaa taaaggagag aacaccagct tgttacaccc
5761 tgtgagcctg catgggatgg atgacccgga gagagaagtg ttagagtgga ggtttgacag
5821 ccgcctagca tttcatcacg tggcccgaga gctgcatccg gagtacttca agaactgctg
5881 atatcgagct tgctacaagg gactttccgc tggggacttt ccagggaggc gtggcctggg
5941 cgggactggg gagtggcgag ccctcagatc ctgcatataa gcagctgctt tttgcctgta
6001 ctgggtctct ctggttagac cagatctgag cctgggagct ctctggctaa ctagggaacc
6061 cactgcttaa gcctcaataa agcttgcctt gagtgcttca agtagtgtgt gcccgtctgt
6121 tgtgtgactc tggtaactag agatccctca gaccctttta gtcagtgtgg aaaatctcta
6181 gcagtagtag ttcatgtcat cttattattc agtatttata acttgcaaag aaatgaatat
6241 cagagagtga gaggccttga cattgctagc gttttaccgt cgacctctag ctagagcttg
6301 gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac
6361 aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc
6421 acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg
6481 cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct
6541 tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac
6601 tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga
6661 gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat
6721 aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac
6781 ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct
6841 gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg
6901 ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg
6961 ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt
7021 cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg
7081 attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac
7141 ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga
7201 aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt
7261 gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt
7321 tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga
7381 ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc
7441 taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct
7501 atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata
7561 actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca
7621 cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga
7681 agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga
7741 gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg
7801 gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga
7861 gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt
7921 gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct
7981 cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca
8041 ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat
8101 accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga
8161 aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc
8221 aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg
8281 caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc
8341 ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt
8401 gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca
8461 cctgacgtcg acggatcggg agatcaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata
8521 aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg
8581 tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca tgtctggatc aactggataa ctcaagctaa
8641 ccaaaatcat cccaaacttc ccaccccata ccctattacc actgccaatt acctgtggtt
8701 tcatttactc taaacctgtg attcctctga attattttca ttttaaagaa attgtatttg
8761 ttaaatatgt actacaaact tagtagt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4065/pCMV-SPORT6-DAD1人源基因质粒 |
| P4066/pCMV-SPORT6-CST3人源基因质粒 |
| P4067/pCMV-SPORT6-RPL13（2同义突变）人源基因质粒 |
| P4068/pCMV-SPORT6-RNF208人源基因质粒 |
| P4069/pCMV-SPORT6-UBE2F人源基因质粒 |
| P4070/pCMV-SPORT6-IMP3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4071/pCMV-SPORT6-SNX12（1-477bp）人源基因质粒 |
| P4072/pCMV-SPORT6-CENPH（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4073/pCMV-SPORT6-CHURC1（10-420bp）人源基因质粒 |
| P4074/pCMV-SPORT6-TRIR人源基因质粒 |
| P4075/pCMV-SPORT6-NLRP1人源基因质粒 |
| P4076/pCMV-SPORT6-RFK人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
我的意思，谢谢 shylook 测序能解决你insert位置的问题 而且也是必须的 慢病毒质粒问题 你应该google下 普通质粒的话 带荧光的话 有pEGFP pIRES2-EGFP这样的融合和非融合的过表达质粒 考虑你的需要选择什么质粒 angel_851209 我这有pEGFP-N1的序列 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯
PYM30 ECGP PYM33 EBFP PYM39 EYFP pLVX-ShRNA1 pLVX-puro PLVX-ires-zsgreen1 PLVX-acgfp-n1 PLVX-dsred-monomer-n1
-Puro 病毒质粒 Amp pLVX-shRNA 病毒质粒 Amp pLVX-IRES-Zsgreen1 病毒质粒 Amp pLVX-AcGFP-N1 病毒质粒
pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达质粒
￥100 - 1000
