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- P0908
- 2025年07月16日
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- 保质期：
2年
- 英文名：
pBeloBAC11
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝）
别称: pBeloBAC11
质粒属性
质粒简介
随着基因组学时代的到来，克隆并利用生物的重要基因，研究这些基因的结构、功能和进化已成为遗传学领域的热点之一。生物体的许多重要性状都涉及到复杂的生理生化反应，受多基因或基因簇的控制，与成百上万碱基的DNA片段相关，此外，复杂基因组的物理作图和基因的图位克隆也涉及到大片段的研究，因此提高载体的容纳量一直是克隆载体的重要发展方向之一。
目前比较理想的细菌人工染色体（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一种以F质粒（F-plasmid）为基础建构而成的细菌染色体克隆载体，命名为pBACs，其容量在50 - 300 kb之间，各种类型的pBACs在大肠杆菌都呈单拷贝。
BAC是以大肠杆菌致育因子（F因子）为基础的合成载体。F因子也称为F质粒，是一种“性质粒”，它可将宿主当然体基因转移到另一宿主细胞。F因子在大肠杆菌中的复制受到严格控制而保持低拷贝，一般为每个细胞1-2个拷贝，其parB基因能够排斥细胞中的外源性F质粒，限制了细胞内质粒分子间的重排，降低了重组BAC中外源DNA的重排水平和嵌合度。此外，F因子具有携带1M bp插入片段的潜能，这就使构具有大容量克隆能力的BAC载体成为可能。
BAC载体主要包括oriS，repE(控制F质粒复制）和parA、parB（控制拷贝数）等元件。以BAC为基础克隆的载体成嵌合体的频率较低，转化效率高，而且以环状结构存在于细菌体内，易于分离纯化，已被科学界广泛接受。目前主要用于大片段基因组文库的构建和大的基因簇（gene cluster）的相关研究，在各类生物基因组计划中发挥重要作用。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7507 bp ds-DNA circular SYN 19-MAY-2017
DEFINITION Single-copy E. coli plasmid vector designed for constructing
Bacterial Artificial Chromosomes (BACs).
ACCESSION U51113
VERSION .
KEYWORDS pBeloBAC11
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7507)
AUTHORS New England Biolabs
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7507
/organism="synthetic DNA construct"
/lab_host="Escherichia coli"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(56..436)
/codon_start=1
/gene="lacZ (fragment)"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITPSYLGDTIEYSSLHACRSTLEDPRVPSSNSPYSESYYNSL
AVVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEWRLMRYFLL
THLCGISHRIWCTLSTICSDAA"
primer_bind 289..305
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 312..330
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
misc_feature 333..389
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
promoter complement(396..414)
/note="SP6 promoter"
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
primer_bind complement(432..448)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 456..472
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(480..510)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
CDS complement(766..1425)
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="CmR"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
promoter complement(1426..1528)
/note="cat promoter"
/note="promoter of the E. coli cat gene"
rep_origin 2455..2674
/note="ori2"
/note="secondary origin of replication for the bacterial F
plasmid; also known as oriS"
CDS 2765..3520
/codon_start=1
/gene="repE"
/product="replication initiation protein for the bacterial
F plasmid"
/note="repE"
/translation="MAETAVINHKKRKNSPRIVQSNDLTEAAYSLSRDQKRMLYLFVDQ
IRKSDGTLQEHDGICEIHVAKYAEIFGLTSAEASKDIRQALKSFAGKEVVFYRPEEDAG
DEKGYESFPWFIKRAHSPSRGLYSVHINPYLIPFFIGLQNRFTQFRLSETKEITNPYAM
RLYESLCQYRKPDGSGIVSLKIDWIIERYQLPQSYQRMPDFRRRFLQVCVNEINSRTPM
RLSYIEKKKGRQTTHIVFSFRDITSMTTG"
misc_feature 3523..3773
/gene="incC"
/note="incC"
/note="incompatibility region of the bacterial F plasmid"
CDS 4099..5274
/codon_start=1
/gene="sopA"
/product="partitioning protein for the bacterial F plasmid"
/note="sopA"
/translation="MFRMKLMETLNQCINAGHEMTKAIAIAQFNDDSPEARKITRRWRI
GEAADLVGVSSQAIRDAEKAGRLP-HPDMEIRGRVEQRVGYTIEQINHMRDVFGTRLRRA
EDVFPPVIGVAAHKGGVYKTSVSVHLAQDLALKGLRVLLVEGNDPQGTASMYHGWVPDL
HIHAEDTLLPFYLGEKDDVTYAIKPTCWPGLDIIPSCLALHRIETELMGKFDEGKLPTD
PHLMLRLAIETVAHDYDVIVIDSAPNLGIGTINVVCAADVLIVPTPAELFDYTSALQFF
DMLRDLLKNVDLKGFEPDVRILLTKYSNSNGSQSPWMEEQIRDAWGSMVLKNVVRETDE
VGKGQIRMRTVFEQAIDQRSSTGAWRNALSIWEPVCNEIFDRLIKPRWEIR"
CDS 5274..6245
/codon_start=1
/gene="sopB"
/product="partitioning protein for the bacterial F plasmid"
/note="sopB"
/translation="MKRAPVIPKHTLNTQPVEDTSLTPAAPMVDSLIARVGVMARGNA
ITLPVCGRDVKFTLEVLRGDSVEKTSRVWSGNERDQELLTEDALDDLIPSFLLTGQQTP
AFGRRVSGVIEIADGSRRRKAAALTESDYRVLVGELDDEQMAALSRLGNDYRPTSAYER
GQRYASRLQNEFAGNISALADAENISRKIITRCINTAKLPKSVVALFSHPGELSARSGD
ALQKAFTDKEELLKQQASNLHEQKKAGVIFEAEEVITLLTSVLKTSSASRTSLSSRHQF
APGATVLYKGDKMVLNLDRSRVPTECIEKIEAILKELEKPAP"
misc_feature 6318..6791
/gene="sopC"
/note="sopC"
/note="centromere-like partitioning region of the bacterial
F plasmid"
misc_feature 7051..7449
/note="cos"
/note="lambda cos site; allows packaging into phage lambda
particles"
protein_bind 7467..7500
/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="loxP"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
ORIGIN
1 gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg
61 cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat
121 gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc attcgccatt caggctgcgc aactgttggg
181 aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg
241 caaggcgatt aagttgggta acgccagggt tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg
301 ccagtgaatt gtaatacgac tcactatagg gcgaattcga gctcggtacc cggggatcct
361 ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg agtattctat agtgtcacct aaatagcttg
421 gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac
481 aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc
541 acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg
601 cattaatgaa tcggccaacg cgaacccctt gcggccgccc gggccgtcga ccaattctca
661 tgtttgacag cttatcatcg aatttctgcc attcatccgc ttattatcac ttattcaggc
721 gtagcaacca ggcgtttaag ggcaccaata actgccttaa aaaaattacg ccccgccctg
781 ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg ccgacatgga agccatcaca
841 aacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg catcagcacc ttgtcgcctt gcgtataata
901 tttgcccatg gtgaaaacgg gggcgaagaa gttgtccata ttggccacgt ttaaatcaaa
961 actggtgaaa ctcacccagg gattggctga gacgaaaaac atattctcaa taaacccttt
1021 agggaaatag gccaggtttt caccgtaaca cgccacatct tgcgaatata tgtgtagaaa
1081 ctgccggaaa tcgtcgtggt attcactcca gagcgatgaa aacgtttcag tttgctcatg
1141 gaaaacggtg taacaagggt gaacactatc ccatatcacc agctcaccgt ctttcattgc
1201 catacggaat tccggatgag cattcatcag gcgggcaaga atgtgaataa aggccggata
1261 aaacttgtgc ttatttttct ttacggtctt taaaaaggcc gtaatatcca gctgaacggt
1321 ctggttatag gtacattgag caactgactg aaatgcctca aaatgttctt tacgatgcca
1381 ttgggatata tcaacggtgg tatatccagt gatttttttc tccattttag cttccttagc
1441 tcctgaaaat ctcgataact caaaaaatac gcccggtagt gatcttattt cattatggtg
1501 aaagttggaa cctcttacgt gccgatcaac gtctcatttt cgccaaaagt tggcccaggg
1561 cttcccggta tcaacaggga caccaggatt tatttattct gcgaagtgat cttccgtcac
1621 aggtatttat tcgcgataag ctcatggagc ggcgtaaccg tcgcacagga aggacagaga
1681 aagcgcggat ctgggaagtg acggacagaa cggtcaggac ctggattggg gaggcggttg
1741 ccgccgctgc tgctgacggt gtgacgttct ctgttccggt cacaccacat acgttccgcc
1801 attcctatgc gatgcacatg ctgtatgccg gtataccgct gaaagttctg caaagcctga
1861 tgggacataa gtccatcagt tcaacggaag tctacacgaa ggtttttgcg ctggatgtgg
1921 ctgcccggca ccgggtgcag tttgcgatgc cggagtctga tgcggttgcg atgctgaaac
1981 aattatcctg agaataaatg ccttggcctt tatatggaaa tgtggaactg agtggatatg
2041 ctgtttttgt ctgttaaaca gagaagctgg ctgttatcca ctgagaagcg aacgaaacag
2101 tcgggaaaat ctcccattat cgtagagatc cgcattatta atctcaggag cctgtgtagc
2161 gtttatagga agtagtgttc tgtcatgatg cctgcaagcg gtaacgaaaa cgatttgaat
2221 atgccttcag gaacaataga aatcttcgtg cggtgttacg ttgaagtgga gcggattatg
2281 tcagcaatgg acagaacaac ctaatgaaca cagaaccatg atgtggtctg tccttttaca
2341 gccagtagtg ctcgccgcag tcgagcgaca gggcgaagcc ctcgagtgag cgaggaagca
2401 ccagggaaca gcacttatat attctgctta cacacgatgc ctgaaaaaac ttcccttggg
2461 gttatccact tatccacggg gatattttta taattatttt ttttatagtt tttagatctt
2521 cttttttaga gcgccttgta ggcctttatc catgctggtt ctagagaagg tgttgtgaca
2581 aattgccctt tcagtgtgac aaatcaccct caaatgacag tcctgtctgt gacaaattgc
2641 ccttaaccct gtgacaaatt gccctcagaa gaagctgttt tttcacaaag ttatccctgc
2701 ttattgactc ttttttattt agtgtgacaa tctaaaaact tgtcacactt cacatggatc
2761 tgtcatggcg gaaacagcgg ttatcaatca caagaaacgt aaaaatagcc cgcgaatcgt
2821 ccagtcaaac gacctcactg aggcggcata tagtctctcc cgggatcaaa aacgtatgct
2881 gtatctgttc gttgaccaga tcagaaaatc tgatggcacc ctacaggaac atgacggtat
2941 ctgcgagatc catgttgcta aatatgctga aatattcgga ttgacctctg cggaagccag
3001 taaggatata cggcaggcat tgaagagttt cgcggggaag gaagtggttt tttatcgccc
3061 tgaagaggat gccggcgatg aaaaaggcta tgaatctttt ccttggttta tcaaacgtgc
3121 gcacagtcca tccagagggc tttacagtgt acatatcaac ccatatctca ttcccttctt
3181 tatcgggtta cagaaccggt ttacgcagtt tcggcttagt gaaacaaaag aaatcaccaa
3241 tccgtatgcc atgcgtttat acgaatccct gtgtcagtat cgtaagccgg atggctcagg
3301 catcgtctct ctgaaaatcg actggatcat agagcgttac cagctgcctc aaagttacca
3361 gcgtatgcct gacttccgcc gccgcttcct gcaggtctgt gttaatgaga tcaacagcag
3421 aactccaatg cgcctctcat acattgagaa aaagaaaggc cgccagacga ctcatatcgt
3481 attttccttc cgcgatatca cttccatgac gacaggatag tctgagggtt atctgtcaca
3541 gatttgaggg tggttcgtca catttgttct gacctactga gggtaatttg tcacagtttt
3601 gctgtttcct tcagcctgca tggattttct catacttttt gaactgtaat ttttaaggaa
3661 gccaaatttg agggcagttt gtcacagttg atttccttct ctttcccttc gtcatgtgac
3721 ctgatatcgg gggttagttc gtcatcattg atgagggttg attatcacag tttattactc
3781 tgaattggct atccgcgtgt gtacctctac ctggagtttt tcccacggtg gatatttctt
3841 cttgcgctga gcgtaagagc tatctgacag aacagttctt ctttgcttcc tcgccagttc
3901 gctcgctatg ctcggttaca cggctgcggc gagcgctagt gataataagt gactgaggta
3961 tgtgctcttc ttatctcctt ttgtagtgtt gctcttattt taaacaactt tgcggttttt
4021 tgatgacttt gcgattttgt tgttgctttg cagtaaattg caagatttaa taaaaaaacg
4081 caaagcaatg attaaaggat gttcagaatg aaactcatgg aaacacttaa ccagtgcata
4141 aacgctggtc atgaaatgac gaaggctatc gccattgcac agtttaatga tgacagcccg
4201 gaagcgagga aaataacccg gcgctggaga ataggtgaag cagcggattt agttggggtt
4261 tcttctcagg ctatcagaga tgccgagaaa gcagggcgac taccgcaccc ggatatggaa
4321 attcgaggac gggttgagca acgtgttggt tatacaattg aacaaattaa tcatatgcgt
4381 gatgtgtttg gtacgcgatt gcgacgtgct gaagacgtat ttccaccggt gatcggggtt
4441 gctgcccata aaggtggcgt ttacaaaacc tcagtttctg ttcatcttgc tcaggatctg
4501 gctctgaagg ggctacgtgt tttgctcgtg gaaggtaacg acccccaggg aacagcctca
4561 atgtatcacg gatgggtacc agatcttcat attcatgcag aagacactct cctgcctttc
4621 tatcttgggg aaaaggacga tgtcacttat gcaataaagc ccacttgctg gccggggctt
4681 gacattattc cttcctgtct ggctctgcac cgtattgaaa ctgagttaat gggcaaattt
4741 gatgaaggta aactgcccac cgatccacac ctgatgctcc gactggccat tgaaactgtt
4801 gctcatgact atgatgtcat agttattgac agcgcgccta acctgggtat cggcacgatt
4861 aatgtcgtat gtgctgctga tgtgctgatt gttcccacgc ctgctgagtt gtttgactac
4921 acctccgcac tgcagttttt cgatatgctt cgtgatctgc tcaagaacgt tgatcttaaa
4981 gggttcgagc ctgatgtacg tattttgctt accaaataca gcaatagtaa tggctctcag
5041 tccccgtgga tggaggagca aattcgggat gcctggggaa gcatggttct aaaaaatgtt
5101 gtacgtgaaa cggatgaagt tggtaaaggt cagatccgga tgagaactgt ttttgaacag
5161 gccattgatc aacgctcttc aactggtgcc tggagaaatg ctctttctat ttgggaacct
5221 gtctgcaatg aaattttcga tcgtctgatt aaaccacgct gggagattag ataatgaagc
5281 gtgcgcctgt tattccaaaa catacgctca atactcaacc ggttgaagat acttcgttat
5341 cgacaccagc tgccccgatg gtggattcgt taattgcgcg cgtaggagta atggctcgcg
5401 gtaatgccat tactttgcct gtatgtggtc gggatgtgaa gtttactctt gaagtgctcc
5461 ggggtgatag tgttgagaag acctctcggg tatggtcagg taatgaacgt gaccaggagc
5521 tgcttactga ggacgcactg gatgatctca tcccttcttt tctactgact ggtcaacaga
5581 caccggcgtt cggtcgaaga gtatctggtg tcatagaaat tgccgatggg agtcgccgtc
5641 gtaaagctgc tgcacttacc gaaagtgatt atcgtgttct ggttggcgag ctggatgatg
5701 agcagatggc tgcattatcc agattgggta acgattatcg cccaacaagt gcttatgaac
5761 gtggtcagcg ttatgcaagc cgattgcaga atgaatttgc tggaaatatt tctgcgctgg
5821 ctgatgcgga aaatatttca cgtaagatta ttacccgctg tatcaacacc gccaaattgc
5881 ctaaatcagt tgttgctctt ttttctcacc ccggtgaact atctgcccgg tcaggtgatg
5941 cacttcaaaa agcctttaca gataaagagg aattacttaa gcagcaggca tctaaccttc
6001 atgagcagaa aaaagctggg gtgatatttg aagctgaaga agttatcact cttttaactt
6061 ctgtgcttaa aacgtcatct gcatcaagaa ctagtttaag ctcacgacat cagtttgctc
6121 ctggagcgac agtattgtat aagggcgata aaatggtgct taacctggac aggtctcgtg
6181 ttccaactga gtgtatagag aaaattgagg ccattcttaa ggaacttgaa aagccagcac
6241 cctgatgcga ccacgtttta gtctacgttt atctgtcttt acttaatgtc ctttgttaca
6301 ggccagaaag cataactggc ctgaatattc tctctgggcc cactgttcca cttgtatcgt
6361 cggtctgata atcagactgg gaccacggtc ccactcgtat cgtcggtctg attattagtc
6421 tgggaccacg gtcccactcg tatcgtcggt ctgattatta gtctgggacc acggtcccac
6481 tcgtatcgtc ggtctgataa tcagactggg accacggtcc cactcgtatc gtcggtctga
6541 ttattagtct gggaccatgg tcccactcgt atcgtcggtc tgattattag tctgggacca
6601 cggtcccact cgtatcgtcg gtctgattat tagtctggaa ccacggtccc actcgtatcg
6661 tcggtctgat tattagtctg ggaccacggt cccactcgta tcgtcggtct gattattagt
6721 ctgggaccac gatcccactc gtgttgtcgg tctgattatc ggtctgggac cacggtccca
6781 cttgtattgt cgatcagact atcagcgtga gactacgatt ccatcaatgc ctgtcaaggg
6841 caagtattga catgtcgtcg taacctgtag aacggagtaa cctcggtgtg cggttgtatg
6901 cctgctgtgg attgctgctg tgtcctgctt atccacaaca ttttgcgcac ggttatgtgg
6961 acaaaatacc tggttaccca ggccgtgccg gcacgttaac cgggctgcat ccgatgcaag
7021 tgtgtcgctg tcgacgagct cgcgagctcg gacatgaggt tgccccgtat tcagtgtcgc
7081 tgatttgtat tgtctgaagt tgtttttacg ttaagttgat gcagatcaat taatacgata
7141 cctgcgtcat aattgattat ttgacgtggt ttgatggcct ccacgcacgt tgtgatatgt
7201 agatgataat cattatcact ttacgggtcc tttccggtga tccgacaggt tacggggcgg
7261 cgacctcgcg ggttttcgct atttatgaaa attttccggt ttaaggcgtt tccgttcttc
7321 ttcgtcataa cttaatgttt ttatttaaaa taccctctga aaagaaagga aacgacaggt
7381 gctgaaagcg agctttttgg cctctgtcgt ttcctttctc tgtttttgtc cgtggaatga
7441 acaatggaag tccgagctca tcgctaataa cttcgtatag catacattat acgaagttat
7501 attcgat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝）
别称: pBeloBAC11
| 复制子: | OriS |
|---|---|
| 质粒大小: | 7507bp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 备注: | 细菌人工染色体BAC质粒 |
质粒属性
| 质粒宿主： | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 质粒用途： | 人工染色体 |
| 片段类型： | ORF |
| 片段物种： | 空载体 |
| 原核抗性： | Chl |
| 真核抗性： | |
| 荧光标记： |
随着基因组学时代的到来，克隆并利用生物的重要基因，研究这些基因的结构、功能和进化已成为遗传学领域的热点之一。生物体的许多重要性状都涉及到复杂的生理生化反应，受多基因或基因簇的控制，与成百上万碱基的DNA片段相关，此外，复杂基因组的物理作图和基因的图位克隆也涉及到大片段的研究，因此提高载体的容纳量一直是克隆载体的重要发展方向之一。
目前比较理想的细菌人工染色体（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一种以F质粒（F-plasmid）为基础建构而成的细菌染色体克隆载体，命名为pBACs，其容量在50 - 300 kb之间，各种类型的pBACs在大肠杆菌都呈单拷贝。
BAC是以大肠杆菌致育因子（F因子）为基础的合成载体。F因子也称为F质粒，是一种“性质粒”，它可将宿主当然体基因转移到另一宿主细胞。F因子在大肠杆菌中的复制受到严格控制而保持低拷贝，一般为每个细胞1-2个拷贝，其parB基因能够排斥细胞中的外源性F质粒，限制了细胞内质粒分子间的重排，降低了重组BAC中外源DNA的重排水平和嵌合度。此外，F因子具有携带1M bp插入片段的潜能，这就使构具有大容量克隆能力的BAC载体成为可能。
BAC载体主要包括oriS，repE(控制F质粒复制）和parA、parB（控制拷贝数）等元件。以BAC为基础克隆的载体成嵌合体的频率较低，转化效率高，而且以环状结构存在于细菌体内，易于分离纯化，已被科学界广泛接受。目前主要用于大片段基因组文库的构建和大的基因簇（gene cluster）的相关研究，在各类生物基因组计划中发挥重要作用。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7507 bp ds-DNA circular SYN 19-MAY-2017
DEFINITION Single-copy E. coli plasmid vector designed for constructing
Bacterial Artificial Chromosomes (BACs).
ACCESSION U51113
VERSION .
KEYWORDS pBeloBAC11
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7507)
AUTHORS New England Biolabs
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7507
/organism="synthetic DNA construct"
/lab_host="Escherichia coli"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(56..436)
/codon_start=1
/gene="lacZ (fragment)"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITPSYLGDTIEYSSLHACRSTLEDPRVPSSNSPYSESYYNSL
AVVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEWRLMRYFLL
THLCGISHRIWCTLSTICSDAA"
primer_bind 289..305
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 312..330
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
misc_feature 333..389
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
promoter complement(396..414)
/note="SP6 promoter"
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
primer_bind complement(432..448)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 456..472
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(480..510)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
CDS complement(766..1425)
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="CmR"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
promoter complement(1426..1528)
/note="cat promoter"
/note="promoter of the E. coli cat gene"
rep_origin 2455..2674
/note="ori2"
/note="secondary origin of replication for the bacterial F
plasmid; also known as oriS"
CDS 2765..3520
/codon_start=1
/gene="repE"
/product="replication initiation protein for the bacterial
F plasmid"
/note="repE"
/translation="MAETAVINHKKRKNSPRIVQSNDLTEAAYSLSRDQKRMLYLFVDQ
IRKSDGTLQEHDGICEIHVAKYAEIFGLTSAEASKDIRQALKSFAGKEVVFYRPEEDAG
DEKGYESFPWFIKRAHSPSRGLYSVHINPYLIPFFIGLQNRFTQFRLSETKEITNPYAM
RLYESLCQYRKPDGSGIVSLKIDWIIERYQLPQSYQRMPDFRRRFLQVCVNEINSRTPM
RLSYIEKKKGRQTTHIVFSFRDITSMTTG"
misc_feature 3523..3773
/gene="incC"
/note="incC"
/note="incompatibility region of the bacterial F plasmid"
CDS 4099..5274
/codon_start=1
/gene="sopA"
/product="partitioning protein for the bacterial F plasmid"
/note="sopA"
/translation="MFRMKLMETLNQCINAGHEMTKAIAIAQFNDDSPEARKITRRWRI
GEAADLVGVSSQAIRDAEKAGRLP-HPDMEIRGRVEQRVGYTIEQINHMRDVFGTRLRRA
EDVFPPVIGVAAHKGGVYKTSVSVHLAQDLALKGLRVLLVEGNDPQGTASMYHGWVPDL
HIHAEDTLLPFYLGEKDDVTYAIKPTCWPGLDIIPSCLALHRIETELMGKFDEGKLPTD
PHLMLRLAIETVAHDYDVIVIDSAPNLGIGTINVVCAADVLIVPTPAELFDYTSALQFF
DMLRDLLKNVDLKGFEPDVRILLTKYSNSNGSQSPWMEEQIRDAWGSMVLKNVVRETDE
VGKGQIRMRTVFEQAIDQRSSTGAWRNALSIWEPVCNEIFDRLIKPRWEIR"
CDS 5274..6245
/codon_start=1
/gene="sopB"
/product="partitioning protein for the bacterial F plasmid"
/note="sopB"
/translation="MKRAPVIPKHTLNTQPVEDTSLTPAAPMVDSLIARVGVMARGNA
ITLPVCGRDVKFTLEVLRGDSVEKTSRVWSGNERDQELLTEDALDDLIPSFLLTGQQTP
AFGRRVSGVIEIADGSRRRKAAALTESDYRVLVGELDDEQMAALSRLGNDYRPTSAYER
GQRYASRLQNEFAGNISALADAENISRKIITRCINTAKLPKSVVALFSHPGELSARSGD
ALQKAFTDKEELLKQQASNLHEQKKAGVIFEAEEVITLLTSVLKTSSASRTSLSSRHQF
APGATVLYKGDKMVLNLDRSRVPTECIEKIEAILKELEKPAP"
misc_feature 6318..6791
/gene="sopC"
/note="sopC"
/note="centromere-like partitioning region of the bacterial
F plasmid"
misc_feature 7051..7449
/note="cos"
/note="lambda cos site; allows packaging into phage lambda
particles"
protein_bind 7467..7500
/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="loxP"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GCATACAT)."
ORIGIN
1 gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg
61 cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat
121 gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc attcgccatt caggctgcgc aactgttggg
181 aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg
241 caaggcgatt aagttgggta acgccagggt tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg
301 ccagtgaatt gtaatacgac tcactatagg gcgaattcga gctcggtacc cggggatcct
361 ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg agtattctat agtgtcacct aaatagcttg
421 gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac
481 aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc
541 acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg
601 cattaatgaa tcggccaacg cgaacccctt gcggccgccc gggccgtcga ccaattctca
661 tgtttgacag cttatcatcg aatttctgcc attcatccgc ttattatcac ttattcaggc
721 gtagcaacca ggcgtttaag ggcaccaata actgccttaa aaaaattacg ccccgccctg
781 ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg ccgacatgga agccatcaca
841 aacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg catcagcacc ttgtcgcctt gcgtataata
901 tttgcccatg gtgaaaacgg gggcgaagaa gttgtccata ttggccacgt ttaaatcaaa
961 actggtgaaa ctcacccagg gattggctga gacgaaaaac atattctcaa taaacccttt
1021 agggaaatag gccaggtttt caccgtaaca cgccacatct tgcgaatata tgtgtagaaa
1081 ctgccggaaa tcgtcgtggt attcactcca gagcgatgaa aacgtttcag tttgctcatg
1141 gaaaacggtg taacaagggt gaacactatc ccatatcacc agctcaccgt ctttcattgc
1201 catacggaat tccggatgag cattcatcag gcgggcaaga atgtgaataa aggccggata
1261 aaacttgtgc ttatttttct ttacggtctt taaaaaggcc gtaatatcca gctgaacggt
1321 ctggttatag gtacattgag caactgactg aaatgcctca aaatgttctt tacgatgcca
1381 ttgggatata tcaacggtgg tatatccagt gatttttttc tccattttag cttccttagc
1441 tcctgaaaat ctcgataact caaaaaatac gcccggtagt gatcttattt cattatggtg
1501 aaagttggaa cctcttacgt gccgatcaac gtctcatttt cgccaaaagt tggcccaggg
1561 cttcccggta tcaacaggga caccaggatt tatttattct gcgaagtgat cttccgtcac
1621 aggtatttat tcgcgataag ctcatggagc ggcgtaaccg tcgcacagga aggacagaga
1681 aagcgcggat ctgggaagtg acggacagaa cggtcaggac ctggattggg gaggcggttg
1741 ccgccgctgc tgctgacggt gtgacgttct ctgttccggt cacaccacat acgttccgcc
1801 attcctatgc gatgcacatg ctgtatgccg gtataccgct gaaagttctg caaagcctga
1861 tgggacataa gtccatcagt tcaacggaag tctacacgaa ggtttttgcg ctggatgtgg
1921 ctgcccggca ccgggtgcag tttgcgatgc cggagtctga tgcggttgcg atgctgaaac
1981 aattatcctg agaataaatg ccttggcctt tatatggaaa tgtggaactg agtggatatg
2041 ctgtttttgt ctgttaaaca gagaagctgg ctgttatcca ctgagaagcg aacgaaacag
2101 tcgggaaaat ctcccattat cgtagagatc cgcattatta atctcaggag cctgtgtagc
2161 gtttatagga agtagtgttc tgtcatgatg cctgcaagcg gtaacgaaaa cgatttgaat
2221 atgccttcag gaacaataga aatcttcgtg cggtgttacg ttgaagtgga gcggattatg
2281 tcagcaatgg acagaacaac ctaatgaaca cagaaccatg atgtggtctg tccttttaca
2341 gccagtagtg ctcgccgcag tcgagcgaca gggcgaagcc ctcgagtgag cgaggaagca
2401 ccagggaaca gcacttatat attctgctta cacacgatgc ctgaaaaaac ttcccttggg
2461 gttatccact tatccacggg gatattttta taattatttt ttttatagtt tttagatctt
2521 cttttttaga gcgccttgta ggcctttatc catgctggtt ctagagaagg tgttgtgaca
2581 aattgccctt tcagtgtgac aaatcaccct caaatgacag tcctgtctgt gacaaattgc
2641 ccttaaccct gtgacaaatt gccctcagaa gaagctgttt tttcacaaag ttatccctgc
2701 ttattgactc ttttttattt agtgtgacaa tctaaaaact tgtcacactt cacatggatc
2761 tgtcatggcg gaaacagcgg ttatcaatca caagaaacgt aaaaatagcc cgcgaatcgt
2821 ccagtcaaac gacctcactg aggcggcata tagtctctcc cgggatcaaa aacgtatgct
2881 gtatctgttc gttgaccaga tcagaaaatc tgatggcacc ctacaggaac atgacggtat
2941 ctgcgagatc catgttgcta aatatgctga aatattcgga ttgacctctg cggaagccag
3001 taaggatata cggcaggcat tgaagagttt cgcggggaag gaagtggttt tttatcgccc
3061 tgaagaggat gccggcgatg aaaaaggcta tgaatctttt ccttggttta tcaaacgtgc
3121 gcacagtcca tccagagggc tttacagtgt acatatcaac ccatatctca ttcccttctt
3181 tatcgggtta cagaaccggt ttacgcagtt tcggcttagt gaaacaaaag aaatcaccaa
3241 tccgtatgcc atgcgtttat acgaatccct gtgtcagtat cgtaagccgg atggctcagg
3301 catcgtctct ctgaaaatcg actggatcat agagcgttac cagctgcctc aaagttacca
3361 gcgtatgcct gacttccgcc gccgcttcct gcaggtctgt gttaatgaga tcaacagcag
3421 aactccaatg cgcctctcat acattgagaa aaagaaaggc cgccagacga ctcatatcgt
3481 attttccttc cgcgatatca cttccatgac gacaggatag tctgagggtt atctgtcaca
3541 gatttgaggg tggttcgtca catttgttct gacctactga gggtaatttg tcacagtttt
3601 gctgtttcct tcagcctgca tggattttct catacttttt gaactgtaat ttttaaggaa
3661 gccaaatttg agggcagttt gtcacagttg atttccttct ctttcccttc gtcatgtgac
3721 ctgatatcgg gggttagttc gtcatcattg atgagggttg attatcacag tttattactc
3781 tgaattggct atccgcgtgt gtacctctac ctggagtttt tcccacggtg gatatttctt
3841 cttgcgctga gcgtaagagc tatctgacag aacagttctt ctttgcttcc tcgccagttc
3901 gctcgctatg ctcggttaca cggctgcggc gagcgctagt gataataagt gactgaggta
3961 tgtgctcttc ttatctcctt ttgtagtgtt gctcttattt taaacaactt tgcggttttt
4021 tgatgacttt gcgattttgt tgttgctttg cagtaaattg caagatttaa taaaaaaacg
4081 caaagcaatg attaaaggat gttcagaatg aaactcatgg aaacacttaa ccagtgcata
4141 aacgctggtc atgaaatgac gaaggctatc gccattgcac agtttaatga tgacagcccg
4201 gaagcgagga aaataacccg gcgctggaga ataggtgaag cagcggattt agttggggtt
4261 tcttctcagg ctatcagaga tgccgagaaa gcagggcgac taccgcaccc ggatatggaa
4321 attcgaggac gggttgagca acgtgttggt tatacaattg aacaaattaa tcatatgcgt
4381 gatgtgtttg gtacgcgatt gcgacgtgct gaagacgtat ttccaccggt gatcggggtt
4441 gctgcccata aaggtggcgt ttacaaaacc tcagtttctg ttcatcttgc tcaggatctg
4501 gctctgaagg ggctacgtgt tttgctcgtg gaaggtaacg acccccaggg aacagcctca
4561 atgtatcacg gatgggtacc agatcttcat attcatgcag aagacactct cctgcctttc
4621 tatcttgggg aaaaggacga tgtcacttat gcaataaagc ccacttgctg gccggggctt
4681 gacattattc cttcctgtct ggctctgcac cgtattgaaa ctgagttaat gggcaaattt
4741 gatgaaggta aactgcccac cgatccacac ctgatgctcc gactggccat tgaaactgtt
4801 gctcatgact atgatgtcat agttattgac agcgcgccta acctgggtat cggcacgatt
4861 aatgtcgtat gtgctgctga tgtgctgatt gttcccacgc ctgctgagtt gtttgactac
4921 acctccgcac tgcagttttt cgatatgctt cgtgatctgc tcaagaacgt tgatcttaaa
4981 gggttcgagc ctgatgtacg tattttgctt accaaataca gcaatagtaa tggctctcag
5041 tccccgtgga tggaggagca aattcgggat gcctggggaa gcatggttct aaaaaatgtt
5101 gtacgtgaaa cggatgaagt tggtaaaggt cagatccgga tgagaactgt ttttgaacag
5161 gccattgatc aacgctcttc aactggtgcc tggagaaatg ctctttctat ttgggaacct
5221 gtctgcaatg aaattttcga tcgtctgatt aaaccacgct gggagattag ataatgaagc
5281 gtgcgcctgt tattccaaaa catacgctca atactcaacc ggttgaagat acttcgttat
5341 cgacaccagc tgccccgatg gtggattcgt taattgcgcg cgtaggagta atggctcgcg
5401 gtaatgccat tactttgcct gtatgtggtc gggatgtgaa gtttactctt gaagtgctcc
5461 ggggtgatag tgttgagaag acctctcggg tatggtcagg taatgaacgt gaccaggagc
5521 tgcttactga ggacgcactg gatgatctca tcccttcttt tctactgact ggtcaacaga
5581 caccggcgtt cggtcgaaga gtatctggtg tcatagaaat tgccgatggg agtcgccgtc
5641 gtaaagctgc tgcacttacc gaaagtgatt atcgtgttct ggttggcgag ctggatgatg
5701 agcagatggc tgcattatcc agattgggta acgattatcg cccaacaagt gcttatgaac
5761 gtggtcagcg ttatgcaagc cgattgcaga atgaatttgc tggaaatatt tctgcgctgg
5821 ctgatgcgga aaatatttca cgtaagatta ttacccgctg tatcaacacc gccaaattgc
5881 ctaaatcagt tgttgctctt ttttctcacc ccggtgaact atctgcccgg tcaggtgatg
5941 cacttcaaaa agcctttaca gataaagagg aattacttaa gcagcaggca tctaaccttc
6001 atgagcagaa aaaagctggg gtgatatttg aagctgaaga agttatcact cttttaactt
6061 ctgtgcttaa aacgtcatct gcatcaagaa ctagtttaag ctcacgacat cagtttgctc
6121 ctggagcgac agtattgtat aagggcgata aaatggtgct taacctggac aggtctcgtg
6181 ttccaactga gtgtatagag aaaattgagg ccattcttaa ggaacttgaa aagccagcac
6241 cctgatgcga ccacgtttta gtctacgttt atctgtcttt acttaatgtc ctttgttaca
6301 ggccagaaag cataactggc ctgaatattc tctctgggcc cactgttcca cttgtatcgt
6361 cggtctgata atcagactgg gaccacggtc ccactcgtat cgtcggtctg attattagtc
6421 tgggaccacg gtcccactcg tatcgtcggt ctgattatta gtctgggacc acggtcccac
6481 tcgtatcgtc ggtctgataa tcagactggg accacggtcc cactcgtatc gtcggtctga
6541 ttattagtct gggaccatgg tcccactcgt atcgtcggtc tgattattag tctgggacca
6601 cggtcccact cgtatcgtcg gtctgattat tagtctggaa ccacggtccc actcgtatcg
6661 tcggtctgat tattagtctg ggaccacggt cccactcgta tcgtcggtct gattattagt
6721 ctgggaccac gatcccactc gtgttgtcgg tctgattatc ggtctgggac cacggtccca
6781 cttgtattgt cgatcagact atcagcgtga gactacgatt ccatcaatgc ctgtcaaggg
6841 caagtattga catgtcgtcg taacctgtag aacggagtaa cctcggtgtg cggttgtatg
6901 cctgctgtgg attgctgctg tgtcctgctt atccacaaca ttttgcgcac ggttatgtgg
6961 acaaaatacc tggttaccca ggccgtgccg gcacgttaac cgggctgcat ccgatgcaag
7021 tgtgtcgctg tcgacgagct cgcgagctcg gacatgaggt tgccccgtat tcagtgtcgc
7081 tgatttgtat tgtctgaagt tgtttttacg ttaagttgat gcagatcaat taatacgata
7141 cctgcgtcat aattgattat ttgacgtggt ttgatggcct ccacgcacgt tgtgatatgt
7201 agatgataat cattatcact ttacgggtcc tttccggtga tccgacaggt tacggggcgg
7261 cgacctcgcg ggttttcgct atttatgaaa attttccggt ttaaggcgtt tccgttcttc
7321 ttcgtcataa cttaatgttt ttatttaaaa taccctctga aaagaaagga aacgacaggt
7381 gctgaaagcg agctttttgg cctctgtcgt ttcctttctc tgtttttgtc cgtggaatga
7441 acaatggaag tccgagctca tcgctaataa cttcgtatag catacattat acgaagttat
7501 attcgat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1973/pENTR223-SLC6A11人源基因质粒 |
| P1974/pENTR223-NOL3人源基因质粒 |
| P1975/pENTR223-ZFAND6人源基因质粒 |
| P1976/pENTR223-RAN人源基因质粒 |
| P1977/pENTR223-ZC3HC1人源基因质粒 |
| P1978/pENTR223-HMGB1人源基因质粒 |
| P1979/pENTR223-TC-P10L人源基因质粒 |
| P1980/pENTR223-MOB3C人源基因质粒 |
| P1981/pENTR223-RAB11A-C8T人源基因质粒 |
| P1982/pENTR223-C19orf36人源基因质粒 |
| P1983/pENTR223-MS4A3人源基因质粒 |
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- 作者
- 内容
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文献和实验相关实验
ws 各位站友，本人因克隆某个植物抗病基因而完成了其BAC文库，目前正在做图位克隆的工作。 但文库的完成耗费了大量人力、物力和财力，因此想请教下该库还有什么其它用途。或与其 它技术结合，可开展什么工作。 谢谢了。。。。 zhujoker BAC (Bacterial Artificial Chromosome, 细菌人工染色体)文库是进行全基因组测序、构建物理图谱、染色体步
质粒（plasmid）是许多种细菌中发现的染色体外的遗传因子，它是闭合环状的双链DNA分子，大小从1kb直到200kb以上。质粒所带的基因通常有利于宿主细胞。例如基因的产物是某些抗生素或对某些抗生素的抗性、能降解某些复杂的有机化合物、产生大肠杆菌素和肠毒素、产生限制酶或修饰酶等。在天然条件下，许多种质粒是通过类似于细菌接合的过程传递给新的宿主。在实验室条件下，质粒则可通过转化过程进入受体细胞。此时，受体细胞已经过处理而处于感受态，即它的细胞暂时易于让小的DNA分子透过。受体细胞由于质粒的进入而产生
基因枪转化法 农杆菌侵染双子叶植物获得植株是非常成功的，自然界中的农杆菌只侵染双子叶植物，对单子叶植物不敏感。虽然通过添加乙酰丁香酮类物质可使农杆菌侵染单子叶植物，但单子叶植物的再生比较困难，因而农杆菌转化单子叶植物仍然是比较困难的。1984年，科学家发现，超螺旋结构的细菌质粒，虽然不能在植物细胞中复制，但可以重组整合到植物染色体内。受这一现象的启发产生基因直接转移技术。重组机制并不清楚。因为细菌质粒与植物DNA 之间没有同源性。事实上整合是随机的发生在植物染色体的任何位点。 基因
pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝）
￥100 - 1000
