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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#8449
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUMVC逆转录包装质粒
别称: NM_001308090.1;HD7;HD7A;HDAC7A
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 9287 bp ds-DNA circular SYN 30-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 5
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 9287)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Tuesday, August 30, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9287
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin complement(117..705)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1246..2061)
/codon_start=1
/gene="aph(3')-Ia"
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418
(Geneticin(R)) in eukaryotes"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
enhancer 2686..3065
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 3066..3269
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
intron 3405..3674
/note="CMV intron"
/note="modified intron A from human cytomegalovirus"
CDS 3728..4144
/note="gag (truncated)"
/note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
gene lacking the start codon"
misc_feature 8504..8878
/note="pol region"
/note="Moloney murine leukemia virus (MMLV) pol region
containing the splice acceptor site"
polyA_site 9085..9140
/note="beta-globin poly(A) signal"
/note="rabbit beta-globin polyadenylation signal"
ORIGIN
1 cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg
61 tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc
121 cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga
181 aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct
241 cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg
301 gcgctttctc atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag
361 ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat
421 cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac
481 aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac
541 tacggctaca ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc
601 ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt
661 tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc
721 ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg
781 agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca
841 atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca
901 cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactcgg gggggggggc
961 gctgaggtct gcctcgtgaa gaaggtgttg ctgactcata ccaggcctga atcgccccat
1021 catccagcca gaaagtgagg gagccacggt tgatgagagc tttgttgtag gtggaccagt
1081 tggtgatttt gaacttttgc tttgccacgg aacggtctgc gttgtcggga agatgcgtga
1141 tctgatcctt caactcagca aaagttcgat ttattcaaca aagccgccgt cccgtcaagt
1201 cagcgtaatg ctctgccagt gttacaacca attaaccaat tctgattaga aaaactcatc
1261 gagcatcaaa tgaaactgca atttattcat atcaggatta tcaataccat atttttgaaa
1321 aagccgtttc tgtaatgaag gagaaaactc accgaggcag ttccatagga tggcaagatc
1381 ctggtatcgg tctgcgattc cgactcgtcc aacatcaata caacctatta atttcccctc
1441 gtcaaaaata aggttatcaa gtgagaaatc accatgagtg acgactgaat ccggtgagaa
1501 tggcaaaagc ttatgcattt ctttccagac ttgttcaaca ggccagccat tacgctcgtc
1561 atcaaaatca ctcgcatcaa ccaaaccgtt attcattcgt gattgcgcct gagcgagacg
1621 aaatacgcga tcgctgttaa aaggacaatt acaaacagga atcgaatgca accggcgcag
1681 gaacactgcc agcgcatcaa caatattttc acctgaatca ggatattctt ctaatacctg
1741 gaatgctgtt ttcccgggga tcgcagtggt gagtaaccat gcatcatcag gagtacggat
1801 aaaatgcttg atggtcggaa gaggcataaa ttccgtcagc cagtttagtc tgaccatctc
1861 atctgtaaca tcattggcaa cgctaccttt gccatgtttc agaaacaact ctggcgcatc
1921 gggcttccca tacaatcgat agattgtcgc acctgattgc ccgacattat cgcgagccca
1981 tttataccca tataaatcag catccatgtt ggaatttaat cgcggcctcg agcaagacgt
2041 ttcccgttga atatggctca taacacccct tgtattactg tttatgtaag cagacagttt
2101 tattgttcat gatgatatat ttttatcttg tgcaatgtaa catcagagat tttgagacac
2161 aacgtggctt tccccccccc ccattattga agcatttatc agggttattg tctcatgagc
2221 ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc
2281 cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc attattatca tgacattaac ctataaaaat
2341 aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga
2401 cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa
2461 gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca
2521 tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta
2581 aggagaaaat accgcatcag attggctatt ggccattgca tacgttgtat ccatatcata
2641 atatgtacat ttatattggc tcatgtccaa cattaccgcc atgttgacat tgattattga
2701 ctagttatta atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc
2761 gcgttacata acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat
2821 tgacgtcaat aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc
2881 aatgggtgga gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc
2941 caagtacgcc ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt
3001 acatgacctt atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta
3061 ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg
3121 gatttccaag tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac
3181 gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg
3241 tacggtggga ggtctatata agcagagctc gtttagtgaa ccgtcagatc gcctggagac
3301 gccatccacg ctgttttgac ctccatagaa gacaccggga ccgatccagc ctccgcggcc
3361 gggaacggtg cattggaacg cggattcccc gtgccaagag tgacgtaagt accgcctata
3421 gactctatag gcacacccct ttggctctta tgcatgctat actgtttttg gcttggggcc
3481 tatacacccc cgcttcctta tgctataggt gatggtatag cttagcctat aggtgtgggt
3541 tattgaccat tattgaccac tccaacggtg gagggcagtg tagtctgagc agtactcgtt
3601 gctgccgcgc gcgccaccag acataatagc tgacagacta acagactgtt cctttccatg
3661 ggtcttttct gcagtcaccg tcgtcgacgg tatcgataag cttgatatcg aattcgccgc
3721 caccatgggc cagactgtta ccactccctt aagtttgacc ttaggtcact ggaaagatgt
3781 cgagcggatc gctcacaacc agtcggtaga tgtcaagaag agacgttggg ttaccttctg
3841 ctctgcagaa tggccaacct ttaacgtcgg atggccgcga gacggcacct ttaaccgaga
3901 cctcatcacc caggttaaga tcaaggtctt ttcacctggc ccgcatggac acccagacca
3961 ggtcccctac atcgtgacct gggaagcctt ggcttttgac ccccctccct gggtcaagcc
4021 ctttgtacac cctaagcctc cgcctcctct tcctccatcc gccccgtctc tcccccttga
4081 acctcctcgt tcgaccccgc ctcgatcctc cctttatcca gccctcactc cttctctagg
4141 cgccaaacct aaacctcaag ttctttctga cagtgggggg ccgctcatcg acctacttac
4201 agaagacccc ccgccttata gggacccaag accaccccct tccgacaggg acggaaatgg
4261 tggagaagcg acccctgcgg gagaggcacc ggacccctcc ccaatggcat ctcgcctacg
4321 tgggagacgg gagccccctg tggccgactc cactacctcg caggcattcc ccctccgcgc
4381 aggaggaaac ggacagcttc aatactggcc gttctcctct tctgaccttt acaactggaa
4441 aaataataac ccttcttttt ctgaagatcc aggtaaactg acagctctga tcgagtctgt
4501 cctcatcacc catcagccca cctgggacga ctgtcagcag ctgttgggga ctctgctgac
4561 cggagaagaa aaacaacggg tgctcttaga ggctagaaag gcggtgcggg gcgatgatgg
4621 gcgccccact caactgccca atgaagtcga tgccgctttt cccctcgagc gcccagactg
4681 ggattacacc acccaggcag gtaggaacca cctagtccac tatcgccagt tgctcctagc
4741 gggtctccaa aacgcgggca gaagccccac caatttggcc aaggtaaaag gaataacaca
4801 agggcccaat gagtctccct cggccttcct agagagactt aaggaagcct atcgcaggta
4861 cactccttat gaccctgagg acccagggca agaaactaat gtgtctatgt ctttcatttg
4921 gcagtctgcc ccagacattg ggagaaagtt agagaggtta gaagatttaa aaaacaagac
4981 gcttggagat ttggttagag aggcagaaaa gatctttaat aaacgagaaa ccccggaaga
5041 aagagaggaa cgtatcagga gagaaacaga ggaaaaagaa gaacgccgta ggacagagga
5101 tgagcagaaa gagaaagaaa gagatcgtag gagacataga gagatgagca agctattggc
5161 cactgtcgtt agtggacaga aacaggatag acagggagga gaacgaagga ggtcccaact
5221 cgatcgcgac cagtgtgcct actgcaaaga aaaggggcac tgggctaaag attgtcccaa
5281 gaaaccacga ggacctcggg gaccaagacc ccagacctcc ctcctgaccc tagatgacta
5341 gggaggtcag ggtcaggagc ccccccctga acccaggata accctcaaag tcggggggca
5401 acccgtcacc ttcctggtag atactggggc ccaacactcc gtgctgaccc aaaatcctgg
5461 acccctaagt gataagtctg cctgggtcca aggggctact ggaggaaagc ggtatcgctg
5521 gaccacggat cgcaaagtac atctagctac cggtaaggtc acccactctt tcctccatgt
5581 accagactgt ccctatcctc tgttaggaag agatttgctg actaaactaa aagcccaaat
5641 ccactttgag ggatcaggag ctcaggttat gggaccaatg gggcagcccc tgcaagtgtt
5701 gaccctaaat atagaagatg agtatcggct acatgagacc tcaaaagagc cagatgtttc
5761 tctagggtcc acatggctgt ctgattttcc tcaggcctgg gcggaaaccg ggggcatggg
5821 actggcagtt cgccaagctc ctctgatcat acctctgaaa gcaacctcta cccccgtgtc
5881 cataaaacaa taccccatgt cacaagaagc cagactgggg atcaagcccc acatacagag
5941 actgttggac cagggaatac tggtaccctg ccagtccccc tggaacacgc ccctgctacc
6001 cgttaagaaa ccagggacta atgattatag gcctgtccag gatctgagag aagtcaacaa
6061 gcgggtggaa gacatccacc ccaccgtgcc caacccttac aacctcttga gcgggctccc
6121 accgtcccac cagtggtaca ctgtgcttga tttaaaggat gcctttttct gcctgagact
6181 ccaccccacc agtcagcctc tcttcgcctt tgagtggaga gatccagaga tgggaatctc
6241 aggacaattg acctggacca gactcccaca gggtttcaaa aacagtccca ccctgtttga
6301 tgaggcactg cacagagacc tagcagactt ccggatccag cacccagact tgatcctgct
6361 acagtacgtg gatgacttac tgctggccgc cacttctgag ctagactgcc aacaaggtac
6421 tcgggccctg ttacaaaccc tagggaacct cgggtatcgg gcctcggcca agaaagccca
6481 aatttgccag aaacaggtca agtatctggg gtatcttcta aaagagggtc agagatggct
6541 gactgaggcc agaaaagaga ctgtgatggg gcagcctact ccgaagaccc ctcgacaact
6601 aagggagttc ctagggacgg caggcttctg tcgcctctgg atccctgggt ttgcagaaat
6661 ggcagccccc ttgtaccctc tcaccaaaac ggggactctg tttaattggg gcccagacca
6721 acaaaaggcc tatcaagaaa tcaagcaagc tcttctaact gccccagccc tggggttgcc
6781 agatttgact aagccctttg aactctttgt cgacgagaag cagggctacg ccaaaggtgt
6841 cctaacgcaa aaactgggac cttggcgtcg gccggtggcc tacctgtcca aaaagctaga
6901 cccagtagca gctgggtggc ccccttgcct acggatggta gcagccattg ccgtactgac
6961 aaaggatgca ggcaagctaa ccatgggaca gccactagtc attctggccc cccatgcagt
7021 agaggcacta gtcaaacaac cccccgaccg ctggctttcc aacgcccgga tgactcacta
7081 tcaggccttg cttttggaca cggaccgggt ccagttcgga ccggtggtag ccctgaaccc
7141 ggctacgctg ctcccactgc ctgaggaagg gctgcaacac aactgccttg atatcctggc
7201 cgaagcccac ggaacccgac ccgacctaac ggaccagccg ctcccagacg ccgaccacac
7261 ctggtacacg gatggaagca gtctcttaca agagggacag cgtaaggcgg gagctgcggt
7321 gaccaccgag accgaggtaa tctgggctaa agccctgcca gccgggacat ccgctcagcg
7381 ggctgaactg atagcactca cccaggccct aaagatggca gaaggtaaga agctaaatgt
7441 ttatactgat agccgttatg cttttgctac tgcccatatc catggagaaa tatacagaag
7501 gcgtgggttg ctcacatcag aaggcaaaga gatcaaaaat aaagacgaga tcttggccct
7561 actaaaagcc ctctttctgc ccaaaagact tagcataatc cattgtccag gacatcaaaa
7621 gggacacagc gccgaggcta gaggcaaccg gatggctgac caagcggccc gaaaggcagc
7681 catcacagag actccagaca cctctaccct cctcatagaa aattcatcac cctacacctc
7741 agaacatttt cattacacag tgactgatat aaaggaccta accaagttgg gggccattta
7801 tgataaaaca aagaagtatt gggtctacca aggaaaacct gtgatgcctg accagtttac
7861 ttttgaatta ttagactttc ttcatcagct gactcacctc agcttctcaa aaatgaaggc
7921 tctcctagag agaagccaca gtccctacta catgctgaac cgggatcgaa cactcaaaaa
7981 tatcactgag acctgcaaag cttgtgcaca agtcaacgcc agcaagtctg ccgttaaaca
8041 gggaactagg gtccgcgggc atcggcccgg cactcattgg gagatcgatt tcaccgagat
8101 aaagcccgga ttgtatggct ataaatatct tctagttttt atagatacct tttctggctg
8161 gatagaagcc ttcccaacca agaaagaaac cgccaaggtc gtaaccaaga agctactaga
8221 ggagatcttc cccaggttcg gcatgcctca ggtattggga actgacaatg ggcctgcctt
8281 cgtctccaag gtgagtcaga cagtggccga tctgttgggg attgattgga aattacattg
8341 tgcatacaga ccccaaagct caggccaggt agaaagaatg aatagaacca tcaaggagac
8401 tttaactaaa ttaacgcttg caactggctc tagagactgg gtgctcctac tccccttagc
8461 cctgtaccga gcccgcaaca cgccgggccc ccatggcctc accccatatg agatcttata
8521 tggggcaccc ccgccccttg taaacttccc tgaccctgac atgacaagag ttactaacag
8581 cccctctctc caagctcact tacaggctct ctacttagtc cagcacgaag tctggagacc
8641 tctggcggca gcctaccaag aacaactgga ccgaccggtg gtacctcacc cttaccgagt
8701 cggcgacaca gtgtgggtcc gccgacacca gactaagaac ctagaacctc gctggaaagg
8761 accttaccca gtcctgctga ccacccccac cgccctcaaa gtagacggca tcgcagcttg
8821 gatacacgcc gcccacgtga aggctgccga ccccgggggt ggaccatcct ctagactgac
8881 atggcgcgtt caacgctctc aaaacccctt aaaaataagg ttaacccgcg aggcccccta
8941 atccccttaa ttcttctgat gctcagaggg gtcagtgtgg gcccggtacc gtatactcta
9001 gagcggccgc ggatccagat ctttttccct ctgccaaaaa ttatggggac atcatgaagc
9061 cccttgagca tctgacttct ggctaataaa ggaaatttat tttcattgca atagtgtgtt
9121 ggaatttttt gtgtctctca ctcggaagga catatgggag ggcaaatcat ttaaaacatc
9181 agaatgagta tttggtttag agtttggcaa catatgccca ttcttccgct tcctcgctca
9241 ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagct
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUMVC逆转录包装质粒
别称: NM_001308090.1;HD7;HD7A;HDAC7A
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | β-globin poly(A) signal |
| 质粒分类: | 病毒系列，慢病毒克隆载体 |
| 质粒大小: | 9287bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞,逆病毒 |
|---|---|
| 载体用途： | 包装辅助 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 9287 bp ds-DNA circular SYN 30-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 5
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 9287)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Tuesday, August 30, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9287
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin complement(117..705)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1246..2061)
/codon_start=1
/gene="aph(3')-Ia"
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418
(Geneticin(R)) in eukaryotes"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
enhancer 2686..3065
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 3066..3269
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
intron 3405..3674
/note="CMV intron"
/note="modified intron A from human cytomegalovirus"
CDS 3728..4144
/note="gag (truncated)"
/note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
gene lacking the start codon"
misc_feature 8504..8878
/note="pol region"
/note="Moloney murine leukemia virus (MMLV) pol region
containing the splice acceptor site"
polyA_site 9085..9140
/note="beta-globin poly(A) signal"
/note="rabbit beta-globin polyadenylation signal"
ORIGIN
1 cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg
61 tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc
121 cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga
181 aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct
241 cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg
301 gcgctttctc atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag
361 ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat
421 cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac
481 aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac
541 tacggctaca ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc
601 ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt
661 tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc
721 ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg
781 agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca
841 atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca
901 cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactcgg gggggggggc
961 gctgaggtct gcctcgtgaa gaaggtgttg ctgactcata ccaggcctga atcgccccat
1021 catccagcca gaaagtgagg gagccacggt tgatgagagc tttgttgtag gtggaccagt
1081 tggtgatttt gaacttttgc tttgccacgg aacggtctgc gttgtcggga agatgcgtga
1141 tctgatcctt caactcagca aaagttcgat ttattcaaca aagccgccgt cccgtcaagt
1201 cagcgtaatg ctctgccagt gttacaacca attaaccaat tctgattaga aaaactcatc
1261 gagcatcaaa tgaaactgca atttattcat atcaggatta tcaataccat atttttgaaa
1321 aagccgtttc tgtaatgaag gagaaaactc accgaggcag ttccatagga tggcaagatc
1381 ctggtatcgg tctgcgattc cgactcgtcc aacatcaata caacctatta atttcccctc
1441 gtcaaaaata aggttatcaa gtgagaaatc accatgagtg acgactgaat ccggtgagaa
1501 tggcaaaagc ttatgcattt ctttccagac ttgttcaaca ggccagccat tacgctcgtc
1561 atcaaaatca ctcgcatcaa ccaaaccgtt attcattcgt gattgcgcct gagcgagacg
1621 aaatacgcga tcgctgttaa aaggacaatt acaaacagga atcgaatgca accggcgcag
1681 gaacactgcc agcgcatcaa caatattttc acctgaatca ggatattctt ctaatacctg
1741 gaatgctgtt ttcccgggga tcgcagtggt gagtaaccat gcatcatcag gagtacggat
1801 aaaatgcttg atggtcggaa gaggcataaa ttccgtcagc cagtttagtc tgaccatctc
1861 atctgtaaca tcattggcaa cgctaccttt gccatgtttc agaaacaact ctggcgcatc
1921 gggcttccca tacaatcgat agattgtcgc acctgattgc ccgacattat cgcgagccca
1981 tttataccca tataaatcag catccatgtt ggaatttaat cgcggcctcg agcaagacgt
2041 ttcccgttga atatggctca taacacccct tgtattactg tttatgtaag cagacagttt
2101 tattgttcat gatgatatat ttttatcttg tgcaatgtaa catcagagat tttgagacac
2161 aacgtggctt tccccccccc ccattattga agcatttatc agggttattg tctcatgagc
2221 ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc
2281 cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc attattatca tgacattaac ctataaaaat
2341 aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga
2401 cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa
2461 gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca
2521 tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta
2581 aggagaaaat accgcatcag attggctatt ggccattgca tacgttgtat ccatatcata
2641 atatgtacat ttatattggc tcatgtccaa cattaccgcc atgttgacat tgattattga
2701 ctagttatta atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc
2761 gcgttacata acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat
2821 tgacgtcaat aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc
2881 aatgggtgga gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc
2941 caagtacgcc ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt
3001 acatgacctt atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta
3061 ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg
3121 gatttccaag tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac
3181 gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg
3241 tacggtggga ggtctatata agcagagctc gtttagtgaa ccgtcagatc gcctggagac
3301 gccatccacg ctgttttgac ctccatagaa gacaccggga ccgatccagc ctccgcggcc
3361 gggaacggtg cattggaacg cggattcccc gtgccaagag tgacgtaagt accgcctata
3421 gactctatag gcacacccct ttggctctta tgcatgctat actgtttttg gcttggggcc
3481 tatacacccc cgcttcctta tgctataggt gatggtatag cttagcctat aggtgtgggt
3541 tattgaccat tattgaccac tccaacggtg gagggcagtg tagtctgagc agtactcgtt
3601 gctgccgcgc gcgccaccag acataatagc tgacagacta acagactgtt cctttccatg
3661 ggtcttttct gcagtcaccg tcgtcgacgg tatcgataag cttgatatcg aattcgccgc
3721 caccatgggc cagactgtta ccactccctt aagtttgacc ttaggtcact ggaaagatgt
3781 cgagcggatc gctcacaacc agtcggtaga tgtcaagaag agacgttggg ttaccttctg
3841 ctctgcagaa tggccaacct ttaacgtcgg atggccgcga gacggcacct ttaaccgaga
3901 cctcatcacc caggttaaga tcaaggtctt ttcacctggc ccgcatggac acccagacca
3961 ggtcccctac atcgtgacct gggaagcctt ggcttttgac ccccctccct gggtcaagcc
4021 ctttgtacac cctaagcctc cgcctcctct tcctccatcc gccccgtctc tcccccttga
4081 acctcctcgt tcgaccccgc ctcgatcctc cctttatcca gccctcactc cttctctagg
4141 cgccaaacct aaacctcaag ttctttctga cagtgggggg ccgctcatcg acctacttac
4201 agaagacccc ccgccttata gggacccaag accaccccct tccgacaggg acggaaatgg
4261 tggagaagcg acccctgcgg gagaggcacc ggacccctcc ccaatggcat ctcgcctacg
4321 tgggagacgg gagccccctg tggccgactc cactacctcg caggcattcc ccctccgcgc
4381 aggaggaaac ggacagcttc aatactggcc gttctcctct tctgaccttt acaactggaa
4441 aaataataac ccttcttttt ctgaagatcc aggtaaactg acagctctga tcgagtctgt
4501 cctcatcacc catcagccca cctgggacga ctgtcagcag ctgttgggga ctctgctgac
4561 cggagaagaa aaacaacggg tgctcttaga ggctagaaag gcggtgcggg gcgatgatgg
4621 gcgccccact caactgccca atgaagtcga tgccgctttt cccctcgagc gcccagactg
4681 ggattacacc acccaggcag gtaggaacca cctagtccac tatcgccagt tgctcctagc
4741 gggtctccaa aacgcgggca gaagccccac caatttggcc aaggtaaaag gaataacaca
4801 agggcccaat gagtctccct cggccttcct agagagactt aaggaagcct atcgcaggta
4861 cactccttat gaccctgagg acccagggca agaaactaat gtgtctatgt ctttcatttg
4921 gcagtctgcc ccagacattg ggagaaagtt agagaggtta gaagatttaa aaaacaagac
4981 gcttggagat ttggttagag aggcagaaaa gatctttaat aaacgagaaa ccccggaaga
5041 aagagaggaa cgtatcagga gagaaacaga ggaaaaagaa gaacgccgta ggacagagga
5101 tgagcagaaa gagaaagaaa gagatcgtag gagacataga gagatgagca agctattggc
5161 cactgtcgtt agtggacaga aacaggatag acagggagga gaacgaagga ggtcccaact
5221 cgatcgcgac cagtgtgcct actgcaaaga aaaggggcac tgggctaaag attgtcccaa
5281 gaaaccacga ggacctcggg gaccaagacc ccagacctcc ctcctgaccc tagatgacta
5341 gggaggtcag ggtcaggagc ccccccctga acccaggata accctcaaag tcggggggca
5401 acccgtcacc ttcctggtag atactggggc ccaacactcc gtgctgaccc aaaatcctgg
5461 acccctaagt gataagtctg cctgggtcca aggggctact ggaggaaagc ggtatcgctg
5521 gaccacggat cgcaaagtac atctagctac cggtaaggtc acccactctt tcctccatgt
5581 accagactgt ccctatcctc tgttaggaag agatttgctg actaaactaa aagcccaaat
5641 ccactttgag ggatcaggag ctcaggttat gggaccaatg gggcagcccc tgcaagtgtt
5701 gaccctaaat atagaagatg agtatcggct acatgagacc tcaaaagagc cagatgtttc
5761 tctagggtcc acatggctgt ctgattttcc tcaggcctgg gcggaaaccg ggggcatggg
5821 actggcagtt cgccaagctc ctctgatcat acctctgaaa gcaacctcta cccccgtgtc
5881 cataaaacaa taccccatgt cacaagaagc cagactgggg atcaagcccc acatacagag
5941 actgttggac cagggaatac tggtaccctg ccagtccccc tggaacacgc ccctgctacc
6001 cgttaagaaa ccagggacta atgattatag gcctgtccag gatctgagag aagtcaacaa
6061 gcgggtggaa gacatccacc ccaccgtgcc caacccttac aacctcttga gcgggctccc
6121 accgtcccac cagtggtaca ctgtgcttga tttaaaggat gcctttttct gcctgagact
6181 ccaccccacc agtcagcctc tcttcgcctt tgagtggaga gatccagaga tgggaatctc
6241 aggacaattg acctggacca gactcccaca gggtttcaaa aacagtccca ccctgtttga
6301 tgaggcactg cacagagacc tagcagactt ccggatccag cacccagact tgatcctgct
6361 acagtacgtg gatgacttac tgctggccgc cacttctgag ctagactgcc aacaaggtac
6421 tcgggccctg ttacaaaccc tagggaacct cgggtatcgg gcctcggcca agaaagccca
6481 aatttgccag aaacaggtca agtatctggg gtatcttcta aaagagggtc agagatggct
6541 gactgaggcc agaaaagaga ctgtgatggg gcagcctact ccgaagaccc ctcgacaact
6601 aagggagttc ctagggacgg caggcttctg tcgcctctgg atccctgggt ttgcagaaat
6661 ggcagccccc ttgtaccctc tcaccaaaac ggggactctg tttaattggg gcccagacca
6721 acaaaaggcc tatcaagaaa tcaagcaagc tcttctaact gccccagccc tggggttgcc
6781 agatttgact aagccctttg aactctttgt cgacgagaag cagggctacg ccaaaggtgt
6841 cctaacgcaa aaactgggac cttggcgtcg gccggtggcc tacctgtcca aaaagctaga
6901 cccagtagca gctgggtggc ccccttgcct acggatggta gcagccattg ccgtactgac
6961 aaaggatgca ggcaagctaa ccatgggaca gccactagtc attctggccc cccatgcagt
7021 agaggcacta gtcaaacaac cccccgaccg ctggctttcc aacgcccgga tgactcacta
7081 tcaggccttg cttttggaca cggaccgggt ccagttcgga ccggtggtag ccctgaaccc
7141 ggctacgctg ctcccactgc ctgaggaagg gctgcaacac aactgccttg atatcctggc
7201 cgaagcccac ggaacccgac ccgacctaac ggaccagccg ctcccagacg ccgaccacac
7261 ctggtacacg gatggaagca gtctcttaca agagggacag cgtaaggcgg gagctgcggt
7321 gaccaccgag accgaggtaa tctgggctaa agccctgcca gccgggacat ccgctcagcg
7381 ggctgaactg atagcactca cccaggccct aaagatggca gaaggtaaga agctaaatgt
7441 ttatactgat agccgttatg cttttgctac tgcccatatc catggagaaa tatacagaag
7501 gcgtgggttg ctcacatcag aaggcaaaga gatcaaaaat aaagacgaga tcttggccct
7561 actaaaagcc ctctttctgc ccaaaagact tagcataatc cattgtccag gacatcaaaa
7621 gggacacagc gccgaggcta gaggcaaccg gatggctgac caagcggccc gaaaggcagc
7681 catcacagag actccagaca cctctaccct cctcatagaa aattcatcac cctacacctc
7741 agaacatttt cattacacag tgactgatat aaaggaccta accaagttgg gggccattta
7801 tgataaaaca aagaagtatt gggtctacca aggaaaacct gtgatgcctg accagtttac
7861 ttttgaatta ttagactttc ttcatcagct gactcacctc agcttctcaa aaatgaaggc
7921 tctcctagag agaagccaca gtccctacta catgctgaac cgggatcgaa cactcaaaaa
7981 tatcactgag acctgcaaag cttgtgcaca agtcaacgcc agcaagtctg ccgttaaaca
8041 gggaactagg gtccgcgggc atcggcccgg cactcattgg gagatcgatt tcaccgagat
8101 aaagcccgga ttgtatggct ataaatatct tctagttttt atagatacct tttctggctg
8161 gatagaagcc ttcccaacca agaaagaaac cgccaaggtc gtaaccaaga agctactaga
8221 ggagatcttc cccaggttcg gcatgcctca ggtattggga actgacaatg ggcctgcctt
8281 cgtctccaag gtgagtcaga cagtggccga tctgttgggg attgattgga aattacattg
8341 tgcatacaga ccccaaagct caggccaggt agaaagaatg aatagaacca tcaaggagac
8401 tttaactaaa ttaacgcttg caactggctc tagagactgg gtgctcctac tccccttagc
8461 cctgtaccga gcccgcaaca cgccgggccc ccatggcctc accccatatg agatcttata
8521 tggggcaccc ccgccccttg taaacttccc tgaccctgac atgacaagag ttactaacag
8581 cccctctctc caagctcact tacaggctct ctacttagtc cagcacgaag tctggagacc
8641 tctggcggca gcctaccaag aacaactgga ccgaccggtg gtacctcacc cttaccgagt
8701 cggcgacaca gtgtgggtcc gccgacacca gactaagaac ctagaacctc gctggaaagg
8761 accttaccca gtcctgctga ccacccccac cgccctcaaa gtagacggca tcgcagcttg
8821 gatacacgcc gcccacgtga aggctgccga ccccgggggt ggaccatcct ctagactgac
8881 atggcgcgtt caacgctctc aaaacccctt aaaaataagg ttaacccgcg aggcccccta
8941 atccccttaa ttcttctgat gctcagaggg gtcagtgtgg gcccggtacc gtatactcta
9001 gagcggccgc ggatccagat ctttttccct ctgccaaaaa ttatggggac atcatgaagc
9061 cccttgagca tctgacttct ggctaataaa ggaaatttat tttcattgca atagtgtgtt
9121 ggaatttttt gtgtctctca ctcggaagga catatgggag ggcaaatcat ttaaaacatc
9181 agaatgagta tttggtttag agtttggcaa catatgccca ttcttccgct tcctcgctca
9241 ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagct
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3852/pCMV-SPORT6-PRRT2人源基因质粒 |
| P3853/pCMV-SPORT6-NPM1人源基因质粒 |
| P3854/pCMV-SPORT6-PAPSS1人源基因质粒 |
| P3855/pCMV-SPORT6-SCARB2人源基因质粒 |
| P3856/pCMV-SPORT6-C8orf79人源基因质粒 |
| P3857/pCMV-SPORT6-TUBGCP3人源基因质粒 |
| P3858/pCMV-SPORT6-IL24人源基因质粒 |
| P3859/pCMV-SPORT6-DEPTOR（2点突变）人源基因质粒 |
| P3860/pCMV-SPORT6-ATP5F1A人源基因质粒 |
| P3861/pCMV-SPORT6-PGAP3人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
相关专题 慢病毒包装技术专题 慢病毒(Lentiviruses)属于逆转录病毒科。慢病毒核蛋白质前整合复合物具有噬核特性，病毒基因组运输至细胞核，从而使慢病毒可以感染和在非有丝分裂细胞中复制。这一特性使慢病毒成为基因治疗的转移载体 。 HIV (Human immunodeficiency virus) 、EIAV (Equine infectious anemia virus) 、 FIV (Feline
基因编辑再次升级！领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具，可安全高效进行体内基因编辑
的 VLPs 策略的编辑效率比较一般，且体内治疗效果的验证有限。 2022 年 1 月 11 日，哈佛大学刘如谦团队在国际顶尖期刊 Cell 发表了题为 Engineered virus-like particles for efficient in vivo delivery of therapeutic proteins 的研究性文章，报道了一种他们以逆转录病毒为基础而开发的工程化类病毒颗粒（Engineered virus-like particles，eVLP），它能够克服蛋白复合物递送的多个瓶颈
进行包装、逆转录和整合所需的顺式作用原件与编码反式作用蛋白的序列分离，分别构建在三个质粒表达系统上，即包装质粒、包膜质粒和载体质粒。包装质粒在巨细胞病毒（cytomegalovirus, CMV）启动子的作用下，控制除env以外所有病毒结构基因的表达；包膜质粒编码水泡口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV）G糖蛋白；载体质粒中含有目的基因。用这三种质粒共转染包装细胞如人胚胎肾293T细胞，在细胞上清中即可收获只有一次感染能力、而无复制能力的慢病毒颗粒。第一代慢病
pUMVC逆转录包装质粒
￥100 - 1000
