- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0170
- 2025年07月05日
8 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pFUSE-hIgG1e1-Fc2
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pFUSE-hIgG1e1-Fc2哺乳抗体质粒
别称: pFUSE-hIgG1e1-Fc2
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4194 bp ds-DNA circular SYN 06-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4194)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Tuesday, September 6, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4194
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 31..242
/note="EF-1-alpha core promoter"
/note="core promoter for human elongation factor
EF-1-alpha"
LTR 255..523
/note="5' LTR (truncated)"
/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from human
T-cell leukemia virus (HTLV) type 1"
CDS 573..632
/codon_start=1
/product="human interleukin-2 signal sequence"
/note="IL-2 signal sequence"
/translation="MYRMQLLSCIALSLALVTNS"
polyA_signal 1359..1480
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
polyA_site 1584..1978
/note="beta-globin poly(A)"
/note="human beta-globin polyadenylation signal"
CDS complement(1992..2366)
/codon_start=1
/gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
/product="antibiotic-binding protein"
/note="BleoR"
/note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and
Zeocin(TM)"
/translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
enhancer 2959..3262
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
rep_origin complement(3342..3930)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
polyA_signal 4038..4086
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4097..4188
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggatctgcga tcgctccggt gcccgtcagt gggcagagcg cacatcgccc acagtccccg
61 agaagttggg gggaggggtc ggcaattgaa cgggtgccta gagaaggtgg cgcggggtaa
121 actgggaaag tgatgtcgtg tactggctcc gcctttttcc cgagggtggg ggagaaccgt
181 atataagtgc agtagtcgcc gtgaacgttc tttttcgcaa cgggtttgcc gccagaacac
241 agctgaagct tcgaggggct cgcatctctc cttcacgcgc ccgccgccct acctgaggcc
301 gccatccacg ccggttgagt cgcgttctgc cgcctcccgc ctgtggtgcc tcctgaactg
361 cgtccgccgt ctaggtaagt ttaaagctca ggtcgagacc gggcctttgt ccggcgctcc
421 cttggagcct acctagactc agccggctct ccacgctttg cctgaccctg cttgctcaac
481 tctacgtctt tgtttcgttt tctgttctgc gccgttacag atccaagctg tgaccggcgc
541 ctacctgaga tcaccggcga aggagggcca ccatgtacag gatgcaactc ctgtcttgca
601 ttgcactaag tcttgcactt gtcacgaatt cgatatcggc catggttaga tctgacaaaa
661 ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct
721 tccccccaaa acccaaggac caactgatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg
781 tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg
841 aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg
901 tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg
961 tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc
1021 cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc aagaaccagg
1081 tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga
1141 gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct
1201 ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct
1261 tctcatgctc cgtgctgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc
1321 tgtctccggg taaatgagtg ctagctggcc agacatgata agatacattg atgagtttgg
1381 acaaaccaca actagaatgc agtgaaaaaa atgctttatt tgtgaaattt gtgatgctat
1441 tgctttattt gtaaccatta taagctgcaa taaacaagtt aacaacaaca attgcattca
1501 ttttatgttt caggttcagg gggaggtgtg ggaggttttt taaagcaagt aaaacctcta
1561 caaatgtggt atggaattaa ttctaaaata cagcatagca aaactttaac ctccaaatca
1621 agcctctact tgaatccttt tctgagggat gaataaggca taggcatcag gggctgttgc
1681 caatgtgcat tagctgtttg cagcctcacc ttctttcatg gagtttaaga tatagtgtat
1741 tttcccaagg tttgaactag ctcttcattt ctttatgttt taaatgcact gacctcccac
1801 attccctttt tagtaaaata ttcagaaata atttaaatac atcattgcaa tgaaaataaa
1861 tgttttttat taggcagaat ccagatgctc aaggcccttc ataatatccc ccagtttagt
1921 agttggactt agggaacaaa ggaaccttta atagaaattg gacagcaaga aagcgagctt
1981 ctagcttatc ctcagtcctg ctcctctgcc acaaagtgca cgcagttgcc ggccgggtcg
2041 cgcagggcga actcccgccc ccacggctgc tcgccgatct cggtcatggc cggcccggag
2101 gcgtcccgga agttcgtgga cacgacctcc gaccactcgg cgtacagctc gtccaggccg
2161 cgcacccaca cccaggccag ggtgttgtcc ggcaccacct ggtcctggac cgcgctgatg
2221 aacagggtca cgtcgtcccg gaccacaccg gcgaagtcgt cctccacgaa gtcccgggag
2281 aacccgagcc ggtcggtcca gaactcgacc gctccggcga cgtcgcgcgc ggtgagcacc
2341 ggaacggcac tggtcaactt ggccatgatg gctcctcctg tcaggagagg aaagagaaga
2401 aggttagtac aattgctata gtgagttgta ttatactatg cagatatact atgccaatga
2461 ttaattgtca aactagggct gcagggttca tagtgccact tttcctgcac tgccccatct
2521 cctgcccacc ctttcccagg catagacagt cagtgactta ccaaactcac aggagggaga
2581 aggcagaagc ttgagacaga cccgcgggac cgccgaactg cgaggggacg tggctagggc
2641 ggcttctttt atggtgcgcc ggccctcgga ggcagggcgc tcggggaggc ctagcggcca
2701 atctgcggtg gcaggaggcg gggccgaagg ccgtgcctga ccaatccgga gcacatagga
2761 gtctcagccc cccgccccaa agcaagggga agtcacgcgc ctgtagcgcc agcgtgttgt
2821 gaaatggggg cttggggggg ttggggccct gactagtcaa aacaaactcc cattgacgtc
2881 aatggggtgg agacttggaa atccccgtga gtcaaaccgc tatccacgcc cattgatgta
2941 ctgccaaaac cgcatcatca tggtaatagc gatgactaat acgtagatgt actgccaagt
3001 aggaaagtcc cataaggtca tgtactgggc ataatgccag gcgggccatt taccgtcatt
3061 gacgtcaata gggggcgtac ttggcatatg atacacttga tgtactgcca agtgggcagt
3121 ttaccgtaaa tactccaccc attgacgtca atggaaagtc cctattggcg ttactatggg
3181 aacatacgtc attattgacg tcaatgggcg ggggtcgttg ggcggtcagc caggcgggcc
3241 atttaccgta agttatgtaa cgcctgcagg ttaattaaga acatgtgagc aaaaggccag
3301 caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc
3361 cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta
3421 taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg
3481 ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc
3541 tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac
3601 gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac
3661 ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg
3721 aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga
3781 agaacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt
3841 agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag
3901 cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct
3961 gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatggctag ttaattaaca
4021 tttaaatcag cggccgcaat aaaatatctt tattttcatt acatctgtgt gttggttttt
4081 tgtgtgaatc gtaactaaca tacgctctcc atcaaaacaa aacgaaacaa aacaaactag
4141 caaaataggc tgtccccagt gcaagtgcag gtgccagaac atttctctat cgaa
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pFUSE-hIgG1e1-Fc2哺乳抗体质粒
别称: pFUSE-hIgG1e1-Fc2
| 启动子: | EF1a |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，抗体表达载体 |
| 质粒大小: | 4194bp |
| 原核抗性: | Zeo |
| 筛选标记: | Zeo |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | 根据序列设计引物 |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达,抗体表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Zeo |
| 真核抗性： | Zeo |
| 荧光蛋白： |
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4194 bp ds-DNA circular SYN 06-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4194)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Tuesday, September 6, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4194
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 31..242
/note="EF-1-alpha core promoter"
/note="core promoter for human elongation factor
EF-1-alpha"
LTR 255..523
/note="5' LTR (truncated)"
/note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from human
T-cell leukemia virus (HTLV) type 1"
CDS 573..632
/codon_start=1
/product="human interleukin-2 signal sequence"
/note="IL-2 signal sequence"
/translation="MYRMQLLSCIALSLALVTNS"
polyA_signal 1359..1480
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
polyA_site 1584..1978
/note="beta-globin poly(A)"
/note="human beta-globin polyadenylation signal"
CDS complement(1992..2366)
/codon_start=1
/gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
/product="antibiotic-binding protein"
/note="BleoR"
/note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and
Zeocin(TM)"
/translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
enhancer 2959..3262
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
rep_origin complement(3342..3930)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
polyA_signal 4038..4086
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4097..4188
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggatctgcga tcgctccggt gcccgtcagt gggcagagcg cacatcgccc acagtccccg
61 agaagttggg gggaggggtc ggcaattgaa cgggtgccta gagaaggtgg cgcggggtaa
121 actgggaaag tgatgtcgtg tactggctcc gcctttttcc cgagggtggg ggagaaccgt
181 atataagtgc agtagtcgcc gtgaacgttc tttttcgcaa cgggtttgcc gccagaacac
241 agctgaagct tcgaggggct cgcatctctc cttcacgcgc ccgccgccct acctgaggcc
301 gccatccacg ccggttgagt cgcgttctgc cgcctcccgc ctgtggtgcc tcctgaactg
361 cgtccgccgt ctaggtaagt ttaaagctca ggtcgagacc gggcctttgt ccggcgctcc
421 cttggagcct acctagactc agccggctct ccacgctttg cctgaccctg cttgctcaac
481 tctacgtctt tgtttcgttt tctgttctgc gccgttacag atccaagctg tgaccggcgc
541 ctacctgaga tcaccggcga aggagggcca ccatgtacag gatgcaactc ctgtcttgca
601 ttgcactaag tcttgcactt gtcacgaatt cgatatcggc catggttaga tctgacaaaa
661 ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct
721 tccccccaaa acccaaggac caactgatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg
781 tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg
841 aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg
901 tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg
961 tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc
1021 cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc aagaaccagg
1081 tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga
1141 gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct
1201 ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct
1261 tctcatgctc cgtgctgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc
1321 tgtctccggg taaatgagtg ctagctggcc agacatgata agatacattg atgagtttgg
1381 acaaaccaca actagaatgc agtgaaaaaa atgctttatt tgtgaaattt gtgatgctat
1441 tgctttattt gtaaccatta taagctgcaa taaacaagtt aacaacaaca attgcattca
1501 ttttatgttt caggttcagg gggaggtgtg ggaggttttt taaagcaagt aaaacctcta
1561 caaatgtggt atggaattaa ttctaaaata cagcatagca aaactttaac ctccaaatca
1621 agcctctact tgaatccttt tctgagggat gaataaggca taggcatcag gggctgttgc
1681 caatgtgcat tagctgtttg cagcctcacc ttctttcatg gagtttaaga tatagtgtat
1741 tttcccaagg tttgaactag ctcttcattt ctttatgttt taaatgcact gacctcccac
1801 attccctttt tagtaaaata ttcagaaata atttaaatac atcattgcaa tgaaaataaa
1861 tgttttttat taggcagaat ccagatgctc aaggcccttc ataatatccc ccagtttagt
1921 agttggactt agggaacaaa ggaaccttta atagaaattg gacagcaaga aagcgagctt
1981 ctagcttatc ctcagtcctg ctcctctgcc acaaagtgca cgcagttgcc ggccgggtcg
2041 cgcagggcga actcccgccc ccacggctgc tcgccgatct cggtcatggc cggcccggag
2101 gcgtcccgga agttcgtgga cacgacctcc gaccactcgg cgtacagctc gtccaggccg
2161 cgcacccaca cccaggccag ggtgttgtcc ggcaccacct ggtcctggac cgcgctgatg
2221 aacagggtca cgtcgtcccg gaccacaccg gcgaagtcgt cctccacgaa gtcccgggag
2281 aacccgagcc ggtcggtcca gaactcgacc gctccggcga cgtcgcgcgc ggtgagcacc
2341 ggaacggcac tggtcaactt ggccatgatg gctcctcctg tcaggagagg aaagagaaga
2401 aggttagtac aattgctata gtgagttgta ttatactatg cagatatact atgccaatga
2461 ttaattgtca aactagggct gcagggttca tagtgccact tttcctgcac tgccccatct
2521 cctgcccacc ctttcccagg catagacagt cagtgactta ccaaactcac aggagggaga
2581 aggcagaagc ttgagacaga cccgcgggac cgccgaactg cgaggggacg tggctagggc
2641 ggcttctttt atggtgcgcc ggccctcgga ggcagggcgc tcggggaggc ctagcggcca
2701 atctgcggtg gcaggaggcg gggccgaagg ccgtgcctga ccaatccgga gcacatagga
2761 gtctcagccc cccgccccaa agcaagggga agtcacgcgc ctgtagcgcc agcgtgttgt
2821 gaaatggggg cttggggggg ttggggccct gactagtcaa aacaaactcc cattgacgtc
2881 aatggggtgg agacttggaa atccccgtga gtcaaaccgc tatccacgcc cattgatgta
2941 ctgccaaaac cgcatcatca tggtaatagc gatgactaat acgtagatgt actgccaagt
3001 aggaaagtcc cataaggtca tgtactgggc ataatgccag gcgggccatt taccgtcatt
3061 gacgtcaata gggggcgtac ttggcatatg atacacttga tgtactgcca agtgggcagt
3121 ttaccgtaaa tactccaccc attgacgtca atggaaagtc cctattggcg ttactatggg
3181 aacatacgtc attattgacg tcaatgggcg ggggtcgttg ggcggtcagc caggcgggcc
3241 atttaccgta agttatgtaa cgcctgcagg ttaattaaga acatgtgagc aaaaggccag
3301 caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc
3361 cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta
3421 taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg
3481 ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc
3541 tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac
3601 gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac
3661 ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg
3721 aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga
3781 agaacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt
3841 agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag
3901 cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct
3961 gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatggctag ttaattaaca
4021 tttaaatcag cggccgcaat aaaatatctt tattttcatt acatctgtgt gttggttttt
4081 tgtgtgaatc gtaactaaca tacgctctcc atcaaaacaa aacgaaacaa aacaaactag
4141 caaaataggc tgtccccagt gcaagtgcag gtgccagaac atttctctat cgaa
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2912/pENTR223-CERS4（1同义突变2点突变）人源基因质粒 |
| P2913/pENTR223-PER3人源基因质粒 |
| P2914/pENTR223-TMEFF1（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2915/pENTR223-DNASE1L3人源基因质粒 |
| P2929/pENTR223-AADAT（2点突变）人源基因质粒 |
| P2930/pENTR223-PDK4（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2931/pENTR223-IFT57（217-1290bp点突变）人源基因质粒 |
| P2932/pENTR223-ELMOD39（1同义突变2点突变）人源基因质粒 |
| P2965/pENTR223-NR1I2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2966/pENTR223-KLHL41人源基因质粒 |
| P2967/pENTR223-IKZF2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2968/pENTR223-SLC25A23-C23G（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2969/pENTR223-CYP39A1(2点突变）人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
rop基因的质粒在拷贝数上的表现却不尽相同，这是由于pUC质粒在RNAII序列上带有一个G到A的点突变，可依温度的不同而改变正向调节分子RNAII的二级结构，Chambers S &Yanisch-Perron C等研究表明在42℃或者45℃下，RNAII似乎折叠成抗RNAI抑制的构型，于是DNA合成的起始加强，结果拷贝数特别高[12-14]。 尽管构建DNA疫苗时普遍使用ColE1类型复制子，但Uhlin B & Remaut E报道的一种由低拷贝发展而来的由温度控制的“失控型”复制子同样具有
化剂及苯胺等间接氧化剂敏感，易产生高铁血红蛋白症及紫绀。 （4）芳烃羟化酶（AHH）诱导力增高症：AAH活性高者患支气管肺癌的危险性也高。 （5）N-乙酰基转移酶缺乏症：可增加接触β-萘胺、联苯胺、4-氨基联苯、4-硝基联苯等致癌原者患膀胱癌的相对危险性。 （6）镰状红细胞体质者：可增加接触硝基化合物、氨基化合物、苯、铅、镉、氰化物及一氧化碳等环境因素的敏感性。 二、环境危害因素的类型与健康的关系 环境危害因素分物理性、化学
，发生肺气肿等慢性阻塞性肺部疾患的危险性大。 （3）高铁血红蛋白还原酶缺乏症：对亚硝酸盐等直接氧化剂及苯胺等间接氧化剂敏感，易产生高铁血红蛋白症及紫绀。 （4）芳烃羟化酶（AHH）诱导力增高症：AAH活性高者患支气管肺癌的危险性也高。 （5）N-乙酰基转移酶缺乏症：可增加接触β-萘胺、联苯胺、4-氨基联苯、4-硝基联苯等致癌原者患膀胱癌的相对危险性。 （6）镰状红细胞体质者：可增加接触硝基化合物、氨基化合物、苯、铅、镉、氰化物及一氧化碳
pFUSE-hIgG1e1-Fc2哺乳抗体质粒
￥100 - 1000
