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pCHO1.0哺乳抗体质粒

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  • Xybio
  • 上海
  • P0360
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
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    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      pCHO1.0

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pCHO1.0哺乳抗体质粒
    别称: pCHO1.0
    启动子: CMV
    复制子: pUC
    终止子: SV40 poly(A) signal
    质粒分类: 哺乳细胞,抗体表达载体
    质粒大小: 12988bp
    原核抗性: Kan
    筛选标记: MTX,Puro
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    表达宿主: 哺乳细胞
    备注: 拷贝数较低,构建时需要大提质粒


    质粒属性
    载体宿主: 哺乳细胞
    载体用途: 蛋白表达,抗体表达
    基因种属: 空载体
    基因类型: ORF
    原核抗性: Kan
    真核抗性: Puro
    荧光蛋白:


    质粒简介
      pCHO 1.0载体是由ProBioGen AG设计,能够表达一个基因或利用载体上面的杂交CMV启动子共表达2个目的基因。该载体包含有二氢叶酸还原酶(DHFR)选择性标记和嘌呤霉素(puromycin)抗性基因,可以同时使用MTX和嘌呤霉素进行筛选。

    质粒图谱
    产品细节图片1

    质粒序列:详询


    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片2
    产品细节图片3
    P2865/pENTR223-CCDC91-G850A人源基因质粒
    P2866/pENTR223-PELI2人源基因质粒
    P2867/pENTR223-PHKG2人源基因质粒
    P2868/pENTR223-OSGEPL19(34-1278bp1同义突变)人源基因质粒
    P2869/pENTR223-MITF-T1234G人源基因质粒
    P2870/pENTR223-UBAC1人源基因质粒
    P2871/pENTR223-SERBP1-C1108T人源基因质粒
    P2872/pENTR223-DCTN2人源基因质粒
    P2873/pENTR223-NOL4(343-1611bp)人源基因质粒
    P2888/pENTR223-GOT2-T1283C人源基因质粒
    P2889/pENTR223-UGCG-G1167T(2同义突变)人源基因质粒
    P2890/pENTR223-RMDN2(56-1233bp)人源基因质粒

     

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 影响ELISA结果的若干内源性干扰因素

      ,然后加入临床血清标本,反应后,再吸出标本进行检测。此外,在测定特异IgM时,也可使用人IgG去除临床标本中RF和IgG。 (4)测定抗原 时,可在标本中加入可使RF降解的还原剂:如2—巯基乙醇。2—巯基乙醇等还原剂可使体内的巯基裂解,因而可以去除RF的干扰,但只适用于抗原测定。 (5)包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体IgY:RF不与鸡IgY反应,如果包被和酶标二抗均为鸡IgY抗体,则不受标本中RF的干扰。 2.补体在固相酶免疫测定中,来自哺乳动物的固相特异

    • 可能影响酶免疫测定ELISA结果的标本内源性干扰因素

      检验,从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。 (2)改变酶标抗体:由于RF结合的是IgG的Fc片段,如果将待酶标的抗体的F,片段酶切夫除,仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶,则在测定中即可避免RF的干扰。 (3)标本中RF用变性IgG预先封闭:将经热变性(63℃,10min)的动物如兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中,或是将该变性IgG连接至一颗固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入临床血清标本,反应后,再吸出标本进行检测。此外,在测定特异IgM时,也可使用人IgG去除临床

    • 如何阅读质粒图谱

      和 Origami 宿主菌的优点于一体。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Rosetta 宿主菌从 BL21 衍生而来,可增强带有大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白的表达。该菌株通过一个相容性氯霉素抗性质粒补充密码子 AUA 、 AGG 、 AGA 、 CUA 、 CCC 和 GGA 的 tRNAs 。这样 Rosetta 菌株提供了“万能”的翻译,从而避免因大肠杆菌密码子使用频率导致的表达限制。 tRNA 基因

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