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- Xybio
- 上海
- P1712
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pCaspase3-sensor
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pCaspase3-sensor信号通路质粒
别称: pCaspase3-sensor
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 信号报告 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pCaspase3-sensor是一个哺乳细胞黄色荧光蛋白信号通路报告质粒。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3040/pENTR223-CAMKV人源基因质粒 |
| P3041/pENTR223-PPP2R1A人源基因质粒 |
| P3042/pENTR223-SARS人源基因质粒 |
| P3043/pENTR223-CHAF1B人源基因质粒 |
| P3044/pENTR223-IMAGE4120678人源基因质粒 |
| P3045/pENTR223-FAM71A人源基因质粒 |
| P3046/pENTR223-CBFA2T2人源基因质粒 |
| P3047/pENTR223-SLC41A3(两点突变)人源基因质粒 |
| P3048/pENTR223-PIP5K1A人源基因质粒 |
| P3049/pENTR223-SRPRA（1-1728bp）人源基因质粒 |
| P3050/pENTR223-C17orf53-A376C人源基因质粒 |
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文献和实验Immunity：北大蒋争凡课题组发现 STING 后高尔基体囊泡转运的重要性及机制
-STING 信号通路在抵抗病原微生物感染、肿瘤及多种免疫相关疾病的发生及治疗中都发挥关键作用。 磷脂酰肌醇磷酸（phosphoinositides, PIPs）是构成真核生物细胞膜组分的重要磷脂（占总磷脂的 5-10%），也是重要的信号分子 2。由于肌醇六元环上 D-3，D-4 或 D-5 位都可发生磷酸化修饰，因此真核生物中总共存在 7 种不同 PIP 分子。PI4P（phosphatydyinositol 4-phosphate）是胞内含量最高的 PIP 分子，广泛分布于各种膜组分，且在反式
我也在做这样一条信号通路，NFkB信号通路有商品化的报告基因，promega有，便宜一点的话，国内的碧云天也有，买来直接用就可以了！也可以在下游再找一个具体的基因，克隆启动子，装到pGL3-basic中测，作为补充数据。 非常感谢楼上的回复！我已经购买了promega的NFkb的报告基因，但是因为没有做过类似的实验，想请教：Promega的报告基因是基于NFkb结合的一段保守序列构建的重组质粒，是不是NFkb调控的所有下游基因都具有这样一致性的结合
xiongran 急求ISRE报告基因质粒，干扰素信号通路的报告基因，愿拿其它质粒作为交换！ shuyangsy1986 大哥，现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊，还有β-干扰素的啊，我也需要啊，先谢了啊 xiongran 几百年前的事情了，没有求到，我都不做这个了 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
