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- 详细信息
- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pBIFC-bFosVC155
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pBIFC-bFosVC155双分荧光质粒
别称: pBIFC-bFosVC155
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4352 bp ds-DNA circular SYN 04-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 3
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4352)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sunday, September 4, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4352
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 27..330
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 331..534
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
intron 672..768
/note="SV40 intron"
/note="modified SV40 intron with splice donor and acceptor
sites"
CDS 832..858
/codon_start=1
/product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
/note="HA"
/translation="YPYDVPDYA"
polyA_signal 1491..1625
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
primer_bind complement(1736..1752)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 1760..1776
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(1784..1814)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 1829..1850
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(2138..2726)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2897..3757)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3758..3862)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
primer_bind 4336..4352
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
ORIGIN
1 gagttcgagc ttgcatgcct gcaggtcgtt acataactta cggtaaatgg cccgcctggc
61 tgaccgccca acgacccccg cccattgacg tcaataatga cgtatgttcc catagtaacg
121 ccaataggga ctttccattg acgtcaatgg gtggagtatt tacggtaaac tgcccacttg
181 gcagtacatc aagtgtatca tatgccaagt acgcccccta ttgacgtcaa tgacggtaaa
241 tggcccgcct ggcattatgc ccagtacatg accttatggg actttcctac ttggcagtac
301 atctacgtat tagtcatcgc tattaccatg gtgatgcggt tttggcagta catcaatggg
361 cgtggatagc ggtttgactc acggggattt ccaagtctcc accccattga cgtcaatggg
421 agtttgtttt ggcaccaaaa tcaacgggac tttccaaaat gtcgtaacaa ctccgcccca
481 ttgacgcaaa tgggcggtag gcgtgtacgg tgggaggtct atataagcag agctcgttta
541 gtgaaccgtc agatcgcctg gagacgccat ccacgctgtt ttgacctcca tagaagacac
601 cgggaccgat ccagcctccg gactctagag gatccggtac tagaggaact gaaaaaccag
661 aaagttaact ggtaagttta gtctttttgt cttttatttc aggtcccgga tccggtggtg
721 gtgcaaatca aagaactgct cctcagtgga tgttgccttt acttctaggc ctgtacggaa
781 gtgttacttc tgctctaaaa gctgcggaat tgtacccgcg ggcccaccat gtacccatac
841 gatgttccag attacgctct tatggccatg gaggcccgaa ttcggggtcg tgcgcagtcc
901 atcggtcgtc gcggtaaagt tgaacaactg tccccggaag aggaagagaa acgtcgcatc
961 cgccgtgaac gtaacaaaat ggcggcagcg aaatgccgta accgccgtcg tgaactgacc
1021 gacaccctgc aggcggaaac cgaccagctg gaagacgaaa aatccgcgct gcaaaccgaa
1081 atcgcgaacc tgctgaaaga aaaagaaaag ctggagttca tcctggcggc acaccgtccg
1141 gcgtgcaaaa tcccgaacga cctgggtggt acccgtccgg cgtgcaaaat cccgaacgac
1201 ctgaaacaga aagtcatgaa ccacgacaag cagaagaacg gcatcaaggc caacttcaag
1261 atccgccaca acatcgagga cggcggcgtg cagctcgccg accactacca gcagaacacc
1321 cccatcggcg acggccccgt gctgctgccc gacaaccact acctgagcta ccagtccaaa
1381 ctgagcaaag accccaacga gaagcgcgat cacatggtcc tgctggagtt cgtgaccgcc
1441 gccgggatca ctctcggcat ggacgagctg tacaagtaag cggccgcggg gatccagaca
1501 tgataagata cattgatgag tttggacaaa ccacaactag aatgcagtga aaaaaatgct
1561 ttatttgtga aatttgtgat gctattgctt tatttgtaac cattataagc tgcaataaac
1621 aagttaacaa caacaattgc attcatttta tgtttcaggt tcagggggag gtgtgggagg
1681 ttttttcgga tcctctagag tcgatctgca ggcatgctag cttggcgtaa tcatggtcat
1741 agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa
1801 gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc
1861 gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc
1921 aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact
1981 cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac
2041 ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa
2101 aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg
2161 acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa
2221 gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc
2281 ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac
2341 gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac
2401 cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg
2461 taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt
2521 atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagga
2581 cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct
2641 cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga
2701 ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat cttttctacg gggtctgacg
2761 ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat gagattatca aaaaggatct
2821 tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt
2881 aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc
2941 tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg
3001 gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag
3061 atttatcagc aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt
3121 tatccgcctc catccagtct attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag
3181 ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt
3241 ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca
3301 tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg
3361 ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat
3421 ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta
3481 tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt caatacggga taataccgcg ccacatagca
3541 gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct
3601 taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat
3661 cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa
3721 agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt
3781 gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa
3841 ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgac gtctaagaaa
3901 ccattattat catgacatta acctataaaa ataggcgtat cacgaggccc tttcgtctcg
3961 cgcgtttcgg tgatgacggt gaaaacctct gacacatgca gctcccggag acggtcacag
4021 cttgtctgta agcggatgcc gggagcagac aagcccgtca gggcgcgtca gcgggtgttg
4081 gcgggtgtcg gggctggctt aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc
4141 atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgccatt
4201 cgccattcag gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac
4261 gccagctggc gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt
4321 cccagtcacg acgttgtaaa acgacggcca gt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pBIFC-bFosVC155双分荧光质粒
别称: pBIFC-bFosVC155
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，双分子荧光互补载体 |
| 质粒大小: | 4352bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 双分子荧光 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | BIFC |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4352 bp ds-DNA circular SYN 04-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 3
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4352)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sunday, September 4, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
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/note="CMV enhancer"
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variants"
protein_bind 1760..1776
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/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
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/note="promoter for the E. coli lac operon"
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/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
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/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2897..3757)
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/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
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promoter complement(3758..3862)
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ORIGIN
1 gagttcgagc ttgcatgcct gcaggtcgtt acataactta cggtaaatgg cccgcctggc
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781 gtgttacttc tgctctaaaa gctgcggaat tgtacccgcg ggcccaccat gtacccatac
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1621 aagttaacaa caacaattgc attcatttta tgtttcaggt tcagggggag gtgtgggagg
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2461 taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt
2521 atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagga
2581 cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct
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3421 ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta
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3781 gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa
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4141 atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgccatt
4201 cgccattcag gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4089/pCMV-SPORT6-SEMA4G人源基因质粒 |
| P4090/pCMV-SPORT6-PTTG1IP人源基因质粒 |
| P4091/pCMV-SPORT6-TSC22D3人源基因质粒 |
| P4092/pCMV-SPORT6-RPS5人源基因质粒 |
| P3626/pCMV-SPORT6-DTNB人源基因质粒 |
| P3627/pCMV-SPORT6-OTULINL人源基因质粒 |
| P3628/pCMV-SPORT6-PDE9A（2同义突变）人源基因质粒 |
| P3629/pCMV-SPORT6-PEX11A（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3630/pCMV-SPORT6-CXorf40B人源基因质粒 |
| P3631/pCMV-SPORT6-TMCO6人源基因质粒 |
| P3632/pCMV-SPORT6-SYF2人源基因质粒 |
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