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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
p53-Luc
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：p53-Luc哺乳报告质粒
别称: p53-Luc
质粒属性
质粒简介
p53-Luc是一个哺乳细胞单荧光素信号通路报告质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5914 bp ds-DNA circular SYN 07-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5914
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 32..136
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 137..997
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
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ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
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/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
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/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
polyA_signal 2541..2673
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
CDS 3030..4682
/codon_start=1
/gene="luc"
/product="firefly luciferase"
/label=luciferase
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intron 4813..4878
/label=small t intron
/note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"
CDS 5008..5028
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 5453..5587
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
RBS 5622..5630
/label=Shine-Dalgarno sequence
/note="full consensus sequence for ribosome-binding sites
upstream of start codons in E. coli; complementary to a
region in the 3' end of the 16S rRNA (Chen et al., 1994)"
ORIGIN
1 gacgtcaggt ggcacttttc ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt tatttttcta
61 aatacattca aatatgtatc cgctcatgag acaataaccc tgataaatgc ttcaataata
121 ttgaaaaagg aagagtatga gtattcaaca tttccgtgtc gcccttattc ccttttttgc
181 ggcattttgc cttcctgttt ttgctcaccc agaaacgctg gtgaaagtaa aagatgctga
241 agatcagttg ggtgcacgag tgggttacat cgaactggat ctcaacagcg gtaagatcct
301 tgagagtttt cgccccgaag aacgttttcc aatgatgagc acttttaaag ttctgctatg
361 tggcgcggta ttatcccgta ttgacgccgg gcaagagcaa ctcggtcgcc gcatacacta
421 ttctcagaat gacttggttg agtactcacc agtcacagaa aagcatctta cggatggcat
481 gacagtaaga gaattatgca gtgctgccat aaccatgagt gataacactg cggccaactt
541 acttctgaca acgatcggag gaccgaagga gctaaccgct tttttgcaca acatggggga
601 tcatgtaact cgccttgatc gttgggaacc ggagctgaat gaagccatac caaacgacga
661 gcgtgacacc acgatgcctg tagcaatggc aacaacgttg cgcaaactat taactggcga
721 actacttact ctagcttccc ggcaacaatt aatagactgg atggaggcgg ataaagttgc
781 aggaccactt ctgcgctcgg cccttccggc tggctggttt attgctgata aatctggagc
841 cggtgagcgt gggtctcgcg gtatcattgc agcactgggg ccagatggta agccctcccg
901 tatcgtagtt atctacacga cggggagtca ggcaactatg gatgaacgaa atagacagat
961 cgctgagata ggtgcctcac tgattaagca ttggtaactg tcagaccaag tttactcata
1021 tatactttag attgatttaa aacttcattt ttaatttaaa aggatctagg tgaagatcct
1081 ttttgataat ctcatgacca aaatccctta acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga
1141 ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg taatctgctg
1201 cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc ggtggtttgt ttgccggatc aagagctacc
1261 aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag cagagcgcag ataccaaata ctgtccttct
1321 agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa gaactctgta gcaccgccta catacctcgc
1381 tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc cagtggcgat aagtcgtgtc ttaccgggtt
1441 ggactcaaga cgatagttac cggataaggc gcagcggtcg ggctgaacgg ggggttcgtg
1501 cacacagccc agcttggagc gaacgaccta caccgaactg agatacctac agcgtgagca
1561 ttgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag aaaggcggac aggtatccgg taagcggcag
1621 ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct tccaggggga aacgcctggt atctttatag
1681 tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga gcgtcgattt ttgtgatgct cgtcaggggg
1741 gcggagctat ggaaaaacgc cagcaacgcg cctttttacg gttcctggcc ttttgctggc
1801 cttttgctca catgttcttt cctgcgttat ccctgattct gtggataacc gtattaccgc
1861 ctttgagtgc tgataccgct cgccgcagcc gaacgaccga gcgcaagtca gtgagcgagg
1921 aagcggaaga gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc
1981 gcatatggtg cactctcagt acaatctgct ctgatgccgc atagttaagc cagtatacac
2041 tccgctatcg ctacgtgact gggtcatggc tgcgccccga cacccgccaa cacccgctga
2101 cgcgccctga cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc
2161 cgggagctgc atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcaggatca
2221 gccatatcac atttgtagag gttttacttg ctttaaaaaa cctcccacac ctccccctga
2281 acctgaaaca taaaatgaat gcaattgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt
2341 acaaataaag caatagcatc acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta
2401 gttgtggttt gtccaaactc atcaatgtat cttatcatgt ctggatcagc catatcacat
2461 ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct ccccctgaac ctgaaacata
2521 aaatgaatgc aattgttgtt aacttgttta ttgcagctta taatggttac aaataaagca
2581 atagcatcac aaatttcaca aataaagcaa tttttcactg cattctattg tggtttgtcc
2641 aaactcatca atgtatctta tcatgtctgg atccaagctc ctgcctggac ttgcctggcc
2701 tgcctggact tgcctggcct gcctggactt gcctgcctgg acttgcctgg cctgcctgga
2761 cttgcctggc ctgcctggac ttgcctggcc tgcctggact tgcctggcct gcctggactt
2821 gcctggcctg cctggacttg cctggcctgc ctggacttgc ctggcctgcc tggacttgcc
2881 tggcctgcct ggacttgcct ggcctgcctg gacttgcctg gcctgcctgg acttgcctgg
2941 cctgcctgga cttgcctggg cggaggactc tagaggggta tataatggaa gctcgaattc
3001 cagcttggca ttccggtact gttggtaaaa tggaagacgc caaaaacata aagaaaggcc
3061 cggcgccatt ctatcctcta gaggatggaa ccgctggaga gcaactgcat aaggctatga
3121 agagatacgc cctggttcct ggaacaattg cttttacaga tgcacatatc gaggtgaaca
3181 tcacgtacgc ggaatacttc gaaatgtccg ttcggttggc agaagctatg aaacgatatg
3241 ggctgaatac aaatcacaga atcgtcgtat gcagtgaaaa ctctcttcaa ttctttatgc
3301 cggtgttggg cgcgttattt atcggagttg cagttgcgcc cgcgaacgac atttataatg
3361 aacgtgaatt gctcaacagt atgaacattt cgcagcctac cgtagtgttt gtttccaaaa
3421 aggggttgca aaaaattttg aacgtgcaaa aaaaattacc aataatccag aaaattatta
3481 tcatggattc taaaacggat taccagggat ttcagtcgat gtacacgttc gtcacatctc
3541 atctacctcc cggttttaat gaatacgatt ttgtaccaga gtcctttgat cgtgacaaaa
3601 caattgcact gataatgaat tcctctggat ctactgggtt acctaagggt gtggcccttc
3661 cgcatagaac tgcctgcgtc agattctcgc atgccagaga tcctattttt ggcaatcaaa
3721 tcattccgga tactgcgatt ttaagtgttg ttccattcca tcacggtttt ggaatgttta
3781 ctacactcgg atatttgata tgtggatttc gagtcgtctt aatgtataga tttgaagaag
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3901 tattttcatt cttcgccaaa agcactctga ttgacaaata cgatttatct aatttacacg
3961 aaattgcttc tgggggcgca cctctttcga aagaagtcgg ggaagcggtt gcaaaacgct
4021 tccatcttcc agggatacga caaggatatg ggctcactga gactacatca gctattctga
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4141 cgaaggttgt ggatctggat accgggaaaa cgctgggcgt taatcagaga ggcgaattat
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4801 taaagctcta aggtaaatat aaaattttta agtgtataat gtgttaaact actgattcta
4861 attgtttgtg tattttagat tccaacctat ggaactgatg aatgggagca gtggtggaat
4921 gcctttaatg aggaaaacct gttttgctca gaagaaatgc catctagtga tgatgaggct
4981 actgctgact ctcaacattc tactcctcca aaaaagaaga gaaaggtaga agaccccaag
5041 gactttcctt cagaattgct aagttttttg agtcatgctg tgtttagtaa tagaactctt
5101 gcttgctttg ctatttacac cacaaaggaa aaagctgcac tgctatacaa gaaaattatg
5161 gaaaaatatt ctgtaacctt tataagtagg cataacagtt ataatcataa catactgttt
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5761 atctgggaag tcccttccac tgctgtgttc cagaagtgtt ggtaaacagc ccacaaatgt
5821 caacagcaga aacatacaag ctgtcacttt gcacaaaggg cctcgtgata cgcctatttt
5881 tataggttaa tgtcatgata ataatggttt ctta
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：p53-Luc哺乳报告质粒
别称: p53-Luc
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | 荧光素酶Luc |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 信号报告 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： | fLuc |
质粒简介
p53-Luc是一个哺乳细胞单荧光素信号通路报告质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5914 bp ds-DNA circular SYN 07-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5914
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40) large T antigen"
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polyA_signal 5453..5587
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RBS 5622..5630
/label=Shine-Dalgarno sequence
/note="full consensus sequence for ribosome-binding sites
upstream of start codons in E. coli; complementary to a
region in the 3' end of the 16S rRNA (Chen et al., 1994)"
ORIGIN
1 gacgtcaggt ggcacttttc ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt tatttttcta
61 aatacattca aatatgtatc cgctcatgag acaataaccc tgataaatgc ttcaataata
121 ttgaaaaagg aagagtatga gtattcaaca tttccgtgtc gcccttattc ccttttttgc
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2281 acctgaaaca taaaatgaat gcaattgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt
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2581 atagcatcac aaatttcaca aataaagcaa tttttcactg cattctattg tggtttgtcc
2641 aaactcatca atgtatctta tcatgtctgg atccaagctc ctgcctggac ttgcctggcc
2701 tgcctggact tgcctggcct gcctggactt gcctgcctgg acttgcctgg cctgcctgga
2761 cttgcctggc ctgcctggac ttgcctggcc tgcctggact tgcctggcct gcctggactt
2821 gcctggcctg cctggacttg cctggcctgc ctggacttgc ctggcctgcc tggacttgcc
2881 tggcctgcct ggacttgcct ggcctgcctg gacttgcctg gcctgcctgg acttgcctgg
2941 cctgcctgga cttgcctggg cggaggactc tagaggggta tataatggaa gctcgaattc
3001 cagcttggca ttccggtact gttggtaaaa tggaagacgc caaaaacata aagaaaggcc
3061 cggcgccatt ctatcctcta gaggatggaa ccgctggaga gcaactgcat aaggctatga
3121 agagatacgc cctggttcct ggaacaattg cttttacaga tgcacatatc gaggtgaaca
3181 tcacgtacgc ggaatacttc gaaatgtccg ttcggttggc agaagctatg aaacgatatg
3241 ggctgaatac aaatcacaga atcgtcgtat gcagtgaaaa ctctcttcaa ttctttatgc
3301 cggtgttggg cgcgttattt atcggagttg cagttgcgcc cgcgaacgac atttataatg
3361 aacgtgaatt gctcaacagt atgaacattt cgcagcctac cgtagtgttt gtttccaaaa
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3481 tcatggattc taaaacggat taccagggat ttcagtcgat gtacacgttc gtcacatctc
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3661 cgcatagaac tgcctgcgtc agattctcgc atgccagaga tcctattttt ggcaatcaaa
3721 tcattccgga tactgcgatt ttaagtgttg ttccattcca tcacggtttt ggaatgttta
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4621 acgcaagaaa aatcagagag atcctcataa aggccaagaa gggcggaaag tccaaattgt
4681 aaaatgtaac tgtattcagc gatgacgaaa ttcttagcta ttgtaatact ctagaggatc
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5101 gcttgctttg ctatttacac cacaaaggaa aaagctgcac tgctatacaa gaaaattatg
5161 gaaaaatatt ctgtaacctt tataagtagg cataacagtt ataatcataa catactgttt
5221 tttcttactc cacacaggca tagagtgtct gctattaata actatgctca aaaattgtgt
5281 acctttagct ttttaatttg taaaggggtt aataaggaat atttgatgta tagtgccttg
5341 actagagatc ataatcagcc ataccacatt tgtagaggtt ttacttgctt taaaaaacct
5401 cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa aatgaatgca attgttgttg ttaacttgtt
5461 tattgcagct tataatggtt acaaataaag caatagcatc acaaatttca caaataaagc
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5881 tataggttaa tgtcatgata ataatggttt ctta
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3897/pCMV-SPORT6-LOC404266人源基因质粒 |
| P3898/pCMV-SPORT6-CCL2人源基因质粒 |
| P3899/pCMV-SPORT6-PROS1人源基因质粒 |
| P3900/pCMV-SPORT6-SYTL4（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3901/pCMV-SPORT6-H2AFV人源基因质粒 |
| P3902/pCMV-SPORT6-LMBR1L（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3903/pCMV-SPORT6-PEX26（1点突变）人源基因质粒 |
| P3904/pCMV-SPORT6-RRAS人源基因质粒 |
| P3905/pCMV-SPORT6-AQP3人源基因质粒 |
| P3906/pCMV-SPORT6-TMED3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3907/pCMV-SPORT6-TMEM184B人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参？ 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了？ lwjssry 不可以，一定要用内参，需要校正对照和处理组细胞数目的差异
【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂？
阿兰梦 之前没有做过，只是根据文献的简单描述依葫芦画瓢，但是毕竟是好几千的试剂，生怕弄错了 临床医生一下子做科研，确实很多地方不懂，很艰难 目的是想用双荧光素酶报告基因的方法检测药物内皮细胞的NF-KB的转录活性影响，需要买pNF-kB-Luc 报告质粒，碧云天有；然后需要双荧光素酶报告基因检测系统，promega有；另外还需要一个内参，文献是β-半乳糖苷酶 问题是： 1、不知道买哪一个对： http://www
BJ5183 报告基因载体 PGL3-Basic PGL3-Promotor stratagene公司的pNF-κB-Luc，p53-Luc，pAP-1-Luc，pSRE-Luc 跟贴请到 http://www.dxy.cn/bbs/thread/13378929 lwjssry 继续求助，大家帮帮忙啊，谢谢啊！ lwjssry 继续求助，大家帮帮忙啊，谢谢
p53-Luc哺乳报告质粒
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