- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1315
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#43806
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pHes1(2.5k)-Luc哺乳报告质粒
别称: Plasmid#43806
| 启动子: | Hes1 |
|---|---|
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 启动子检测 |
| 基因种属： | 小鼠 |
| 基因类型： | Promoter |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： | fLuc |
质粒简介
pHes1(2.5k)-Luc质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3850/pCMV-SPORT6-ERO1A人源基因质粒 |
| P3851/pCMV-SPORT6-GABRA5（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3852/pCMV-SPORT6-PRRT2人源基因质粒 |
| P3853/pCMV-SPORT6-NPM1人源基因质粒 |
| P3854/pCMV-SPORT6-PAPSS1人源基因质粒 |
| P3855/pCMV-SPORT6-SCARB2人源基因质粒 |
| P3856/pCMV-SPORT6-C8orf79人源基因质粒 |
| P3857/pCMV-SPORT6-TUBGCP3人源基因质粒 |
| P3858/pCMV-SPORT6-IL24人源基因质粒 |
| P3859/pCMV-SPORT6-DEPTOR（2点突变）人源基因质粒 |
| P3860/pCMV-SPORT6-ATP5F1A人源基因质粒 |
| P3861/pCMV-SPORT6-PGAP3人源基因质粒 |
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文献和实验Assaying Endogenous Phosphatidylinositol-4-Phosphate 5-Kinase (PIP5K) Activities
Phosphoinositides are a family of lipid second messengers interlinked by an extensive and highly regulated network of kinases and phosphatases. The modulation of phosphoinositide profiles can regulate numerous cancer-related pathways
绝版分子生物学实用技术分享: I: 20 种用于各种DNA marker 制备的PLASMID: P1: 2k+1.5k+1k+800+700+600+500+400+300+200X2+100X4 (100BP ladder) P2: 3k+1.5k+1k+900+700+500+300X2 (200BP ladder 奇数) P3: 3k+2k+1.4k+1k+800+600+4X2 (200BP ladder 偶数) (P3\P4\P5 组合, 可拓展为1KB ladder
这么小的基因组，用高通量测序，很容易搞定的。20Kb的话，给他1千倍的覆盖率，也就是20M，按现在测序行情价，1G也才3－5千块钱。你的20M么，掺在人家的样品里，花不了太多钱的。 我做过一个噬菌体的160Kb的基因组，数据有点多，做了1G，结果拼接效果非常好，正好拼接成一条contig，中间有一些N，用PCR法加sanger测序补一下，成本5K，当然，不知道你的预算是多高了。 云忆香香 还不是很懂~还请各位高手多多帮忙！
