
10×CFAS Western 快速转膜缓冲液
- ¥270
- 中晖赫彩
- PW002
- 陕西西安
- 2025年12月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
1年
- 供应商:
陕西中晖赫彩
- 保存条件:
常温
- 规格:
500ml
10×CFAS Western 快速转膜缓冲液是本公司独立研发的一种新型快速转膜缓冲液,可以用于Western时湿法电转膜,具有速度快,效率高,安全性好的优点。本转膜液使用后可以回收,可以重复使用2-3次。
保存条件:
室温保存,一年有效。
操作流程:
- 试剂准备
注:醇的用量可以根据需要检测的蛋白质分子量的大小在0-25%体积之间适当调整,小分子需要增加醇的用量,大分子蛋白需要减少醇的用量,甚至完全不使用醇。
2、转膜操作
2.1 准备好1×CFAS Western快速转膜转膜缓冲液后,可以将湿转所用的滤纸、海绵垫以及电泳完成后的凝胶浸泡5-15min。
2.2 按照海绵垫-滤纸-凝胶-膜-滤纸-海绵垫的顺序制作转膜三明治,并注意转印膜的方向为正极。同时注意防止气泡。
2.3组装转膜装置后,加入1×CFAS Western 快速转膜缓冲液至转膜夹上缘后,接通电源。
| 恒流电流 | 电压 | 建议时间 | |
| PVDF膜 | 400ma | 80-90V | 30min |
| NC膜 | 400ma | 80-90V | 15min |
1、没有用完的转膜液可室温保存,通常两周内使用没有任何问题。
2、回收的转膜液以重复使用2-3次,但为了取得最佳的转膜效果,最好使用新鲜制备的转膜液。
温馨提示:
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
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文献和实验转印夹,注意 PVDF 膜与胶,PVDF 膜与滤纸,滤纸与胶之间不可有气泡。 2) 转印槽加满转膜缓冲液,插入电转印夹,将转印槽放入冰水中,确保 PVDF 膜靠近正极,带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3) 转膜选择恒流,每个转印槽建议电流为 150-300 mA,时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4) 转膜结束后,将 PVDF 膜置于丽春红染色液中,室温 5-10 分钟即可见红色条带,用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1) 漂洗印迹膜:使用洗涤缓冲液室温适当漂洗
1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
没有SDS? zhanghai123 还有1g SDS aileen83 我做western的转膜缓冲液:Tris:3g, Glycine:14.4g,methanol: 200ml. 共1000ml 不知道是否能对你有用 haodanzhang 配制转膜液时,甲醇不宜过早加入。个人认为不用加SDS,因为加入SDS后会有气泡产生。转膜条件我的一般是:300mA, 2h,效果
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