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- 上海
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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#85544
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pJYS2_crtYf大肠敲除质粒
别称: Plasmid#85544
质粒属性
质粒简介
pJYS2_crtYf是一个大肠杆菌gRNA表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4380 bp ds-DNA circular SYN 21-DEC-2017
DEFINITION Constitutive transcription of crRNA of crtYf, Spectinomycin
resistance.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4380
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 58..143
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
misc_feature 148..188
/label=crRNA
CDS complement(522..1985)
/codon_start=1
/label=repA
/translation="MTLADPQDTVTASAWKFSADLFDTHPELALRSRGWTAEDRRELLA
HLGRESFQGSKTRDFASAWIKNPDTGETQPKLYRAGSKALTRCQYVALTHAQHAAVIVL
DIDVPSHQAGGKIEHVNPQVYAILEKWARLEKAPAWIGVNPLSGKCQLIWLIDPVYAAA
GKTSPNMRLLAATTEEMTRVFGADQAFSHRLSRWPLHVSDDPTAYKWHCQHDRVDRLAD
LMEIARTMTGSQKPKKYIEQDFSSGRARIEAAQRATAEAKALAILDASLPSALDASGDL
IDGVRVLWTNPERAARDETAFRHALTVGYQLKAAGERLKDAKIIDAYEVAYNVAQAVGA
DGREPDLPAMRDRLTMARRVRGYVAKGQPVVPARRVETQSSRGRKALATMGRRGAATSN
ARRWADPESKYAQETRQRLAEANKRREMTGELLELRVKTAILDARSQSVADPSTRELAG
ELGVSERRIQQVRKALGMEAKRGRPRAEN"
CDS complement(2391..3065)
/codon_start=1
/label=Spe
/translation="MFGSGVESGLKPNSDLDFLVVVSEPLTDQSKEILIQKIRPISKKI
GDKSNLRYIELTIIIQQEMVPWNHPPKQEFIYGEWLQELYEQGYIPQKELNSDLTIMLY
QAKRKNKRIYGNYDLEELLPDIPFSDVRRAIMDSSEELIDNYQDDETNSILTLCRMILT
MDTGKIIPKDIAGNAVAESSPLEHRERILLAVRSYLGENIEWTNENVNLTINYLNNRLK
KL"
rep_origin 3466..4054
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
terminator 4319..4346
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
ORIGIN
1 tcctgcccgc caccctccgg gccgttgctt cgcaacgttc aaatccgctc ccggcggatt
61 tgtcctactc aggagagcgt tcaccgacaa acaacagata aaacgaaagg cccagtcttt
121 cgactgagcc tttcgtttta tttaaatttc ctgccctatg gttgcctgat ctacaacagt
181 agaaattcgg atccattata cctaggactg agctagctgt caatctagac tcgaggagat
241 ttttgagggg gagggagtcg aggaagagcc agagcagaag gcgggggaac cgttctctgc
301 cgacagcgtg agccccctta aaaatcaggc cggggaggaa ccggggaggg atcagagcta
361 ggagcgagac accctaaagg gggggaaccg ttttctgctg acggtgtttc gtttattagt
421 tttcagcccg tggatagcgg agggtgaggg caagtgagag ccagagcaag gacgggaccc
481 ctaaaggggg gaaccgtttt ctgctgacgg tgtttcgttt attagttttc agcccgtgga
541 cggccgcgtt tagcttccat tccaagtgcc tttctgactt gttggatgcg cctttcactg
601 acacctagtt cgcctgcaag ctcacgagtc gagggatcag caaccgattg agaacgggca
661 tccaggatcg cagttttgac gcgaagttcg agcaactcgc ctgtcatttc tcggcgtttg
721 tttgcttccg ctaatcgctg tcgcgtctcc tgcgcatact tactttctgg gtcagcccat
781 ctgcgtgcat tcgatgtagc tgcgccccgt cgccccatcg tcgctagagc tttccgccct
841 cggctgctct gcgtttccac ccgacgagca gggacgactg gctggccttt agccacgtag
901 ccgcgcacac gacgcgccat cgtcaggcga tcacgcatgg cgggaagatc cggctcccgg
961 ccgtctgcac cgaccgcctg ggcaacgttg tacgccactt catacgcgtc gatgatcttg
1021 gcatctttta ggcgctcacc agcagctttg agctggtatc ccacggtcaa cgcgtggcga
1081 aacgcggtct cgtcgcgcgc tgcgcgctct ggatttgtcc agagcactcg cacgccgtcg
1141 atcaggtcgc cggacgcgtc cagggcgctc ggcaggctcg cgtccaaaat cgctagcgcc
1201 ttggcttctg cggtggcgcg ttgtgccgct tcaatgcggg cgcgtccgct ggaaaagtcc
1261 tgctcaatgt actttttcgg cttctgtgat ccggtcatcg ttcgagcaat ctccattagg
1321 tcggccagcc gatccacacg atcatgctgg cagtgccatt tataggctgt cggatcgtct
1381 gagacgtgca gcggccaccg gctcagccta tgcgaaaaag cctggtcagc gccgaaaaca
1441 cgagtcattt cttccgtcgt tgcagccagc aggcgcatat ttgggctggt tttacctgct
1501 gcggcataca ccgggtcaat gagccagatg agctggcatt tcccgctcag cggattcacg
1561 ccgatccaag ccggcgcttt ttctaggcgt gcccatttct ctaaaatcgc gtagacctgc
1621 gggtttacgt gctcaatctt cccgccggcc tggtggctgg gcacatcgat gtcaagcacg
1681 atcaccgcgg catgttgcgc gtgcgtcagc gcaacgtact ggcaccgcgt cagcgctttt
1741 gagccagccc ggtagagctt tggttgggtt tcgccggtat ccgggttttt aatccaggcg
1801 ctcgcgaaat ctcttgtctt gctgccctgg aagctttcgc gtcccaggtg agcgagcagt
1861 tcgcggcgat cttctgccgt ccagccgcgt gagcgcagcg ctagttcggg gtgggtgtcg
1921 aacagatcgg cggaaaattt ccacgcgcta gctgtgactg tgtcctgcgg atcggctaga
1981 gtcatgtctt gagtgctttc tcccagctga tgactggggg ttagccgacg ccctgtgagt
2041 tcccgctcac ggggcgttca actttttcag gtatttgtgc agcttatcgt gttttcttcg
2101 taaatgaacg cttaactacc ttgttaaacg tggcaaatag gcaggattga tggctttcat
2161 agaaggcggc ggtggaatcg aaatctcgtg atggcaggtt gggcgtcgct tggtcggtca
2221 tttcgaaggg caccaataac tgccttaaaa aaagatctgt acatcgatat catatgcaag
2281 ggtttattgt tttctaaaat ctgattacca attagaatga atatttccca aatattaaat
2341 aataaaacaa aaaaattgaa aaaagtgttt ccaccatttt ttcaattttt ttataatttt
2401 tttaatctgt tatttaaata gtttatagtt aaatttacat tttcattagt ccattcaata
2461 ttctctccaa gataactacg aactgctaac aaaattctct ccctatgttc taatggagaa
2521 gattcagcca ctgcatttcc cgcaatatct tttggtatga ttttacccgt gtccatagtt
2581 aaaatcatac ggcataaagt taatatagag ttggtttcat catcctgata attatctatt
2641 aattcctctg acgaatccat aatggctctt ctcacatcag aaaatggaat atcaggtagt
2701 aattcctcta agtcataatt tccgtatatt cttttatttt ttcgttttgc ttggtaaagc
2761 attatggtta aatctgaatt taattccttc tgaggaatgt atccttgttc ataaagctct
2821 tgtaaccatt ctccataaat aaattcttgt ttgggaggat gattccacgg taccatttct
2881 tgctgaataa taattgttaa ttcaatatat cgtaagttgc ttttatctcc tatttttttt
2941 gaaataggtc taattttttg tataagtatt tctttacttt gatctgtcaa tggttcagat
3001 acgacgacta aaaagtcaag atcactattt ggttttagtc cactctcaac tcctgatcca
3061 aacatgtaag taccaataag gttatttttt aaatgtttcc gaagtatttt tttcacttta
3121 ttaatttgtt cgtatgtatt caaatatatc ctcctcacta ttttgattag tacctatttt
3181 atatccatag ttgttaatta aataaactta atttagttta tttatagatt tcattggctt
3241 ctaaattttt tatctagata ataattattt tagttaattt tattctagat tatatatgat
3301 atgatctttc atttccataa aactaaagta agtgtaaacc tattcattgt tttaaaaata
3361 tctcttgcca gtcacgttac gttattagtt catgaccaaa atcccttaac gtgagttttc
3421 gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag atcctttttt
3481 tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt
3541 gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca gagcgcagat
3601 accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga actctgtagc
3661 accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca gtggcgataa
3721 gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc agcggtcggg
3781 ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca ccgaactgag
3841 atacctacag cgtgagctat gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa aggcggacag
3901 gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc cagggggaaa
3961 cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc gtcgattttt
4021 gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg cctttttacg
4081 gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat cccctgattc
4141 tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca gccgaacgac
4201 cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ctgatgcggt attttctcct
4261 tacgcatctg tgcggtattt cacaccgcat atgaagctta agagtttgta gaaacgcaaa
4321 aaggccatcc gtcaggatgg ccttctgctt aatttgatgc ctggcagttt atggcgggcg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pJYS2_crtYf大肠敲除质粒
别称: Plasmid#85544
| 复制子: | repA |
|---|---|
| 原核抗性: | Str |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 基因敲除 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Str |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pJYS2_crtYf是一个大肠杆菌gRNA表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4380 bp ds-DNA circular SYN 21-DEC-2017
DEFINITION Constitutive transcription of crRNA of crtYf, Spectinomycin
resistance.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4380
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 58..143
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
misc_feature 148..188
/label=crRNA
CDS complement(522..1985)
/codon_start=1
/label=repA
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ARRWADPESKYAQETRQRLAEANKRREMTGELLELRVKTAILDARSQSVADPSTRELAG
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CDS complement(2391..3065)
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/translation="MFGSGVESGLKPNSDLDFLVVVSEPLTDQSKEILIQKIRPISKKI
GDKSNLRYIELTIIIQQEMVPWNHPPKQEFIYGEWLQELYEQGYIPQKELNSDLTIMLY
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MDTGKIIPKDIAGNAVAESSPLEHRERILLAVRSYLGENIEWTNENVNLTINYLNNRLK
KL"
rep_origin 3466..4054
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
terminator 4319..4346
/label=rrnB T2 terminator
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gene"
ORIGIN
1 tcctgcccgc caccctccgg gccgttgctt cgcaacgttc aaatccgctc ccggcggatt
61 tgtcctactc aggagagcgt tcaccgacaa acaacagata aaacgaaagg cccagtcttt
121 cgactgagcc tttcgtttta tttaaatttc ctgccctatg gttgcctgat ctacaacagt
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601 acacctagtt cgcctgcaag ctcacgagtc gagggatcag caaccgattg agaacgggca
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721 tttgcttccg ctaatcgctg tcgcgtctcc tgcgcatact tactttctgg gtcagcccat
781 ctgcgtgcat tcgatgtagc tgcgccccgt cgccccatcg tcgctagagc tttccgccct
841 cggctgctct gcgtttccac ccgacgagca gggacgactg gctggccttt agccacgtag
901 ccgcgcacac gacgcgccat cgtcaggcga tcacgcatgg cgggaagatc cggctcccgg
961 ccgtctgcac cgaccgcctg ggcaacgttg tacgccactt catacgcgtc gatgatcttg
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1381 gagacgtgca gcggccaccg gctcagccta tgcgaaaaag cctggtcagc gccgaaaaca
1441 cgagtcattt cttccgtcgt tgcagccagc aggcgcatat ttgggctggt tttacctgct
1501 gcggcataca ccgggtcaat gagccagatg agctggcatt tcccgctcag cggattcacg
1561 ccgatccaag ccggcgcttt ttctaggcgt gcccatttct ctaaaatcgc gtagacctgc
1621 gggtttacgt gctcaatctt cccgccggcc tggtggctgg gcacatcgat gtcaagcacg
1681 atcaccgcgg catgttgcgc gtgcgtcagc gcaacgtact ggcaccgcgt cagcgctttt
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1801 ctcgcgaaat ctcttgtctt gctgccctgg aagctttcgc gtcccaggtg agcgagcagt
1861 tcgcggcgat cttctgccgt ccagccgcgt gagcgcagcg ctagttcggg gtgggtgtcg
1921 aacagatcgg cggaaaattt ccacgcgcta gctgtgactg tgtcctgcgg atcggctaga
1981 gtcatgtctt gagtgctttc tcccagctga tgactggggg ttagccgacg ccctgtgagt
2041 tcccgctcac ggggcgttca actttttcag gtatttgtgc agcttatcgt gttttcttcg
2101 taaatgaacg cttaactacc ttgttaaacg tggcaaatag gcaggattga tggctttcat
2161 agaaggcggc ggtggaatcg aaatctcgtg atggcaggtt gggcgtcgct tggtcggtca
2221 tttcgaaggg caccaataac tgccttaaaa aaagatctgt acatcgatat catatgcaag
2281 ggtttattgt tttctaaaat ctgattacca attagaatga atatttccca aatattaaat
2341 aataaaacaa aaaaattgaa aaaagtgttt ccaccatttt ttcaattttt ttataatttt
2401 tttaatctgt tatttaaata gtttatagtt aaatttacat tttcattagt ccattcaata
2461 ttctctccaa gataactacg aactgctaac aaaattctct ccctatgttc taatggagaa
2521 gattcagcca ctgcatttcc cgcaatatct tttggtatga ttttacccgt gtccatagtt
2581 aaaatcatac ggcataaagt taatatagag ttggtttcat catcctgata attatctatt
2641 aattcctctg acgaatccat aatggctctt ctcacatcag aaaatggaat atcaggtagt
2701 aattcctcta agtcataatt tccgtatatt cttttatttt ttcgttttgc ttggtaaagc
2761 attatggtta aatctgaatt taattccttc tgaggaatgt atccttgttc ataaagctct
2821 tgtaaccatt ctccataaat aaattcttgt ttgggaggat gattccacgg taccatttct
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3121 ttaatttgtt cgtatgtatt caaatatatc ctcctcacta ttttgattag tacctatttt
3181 atatccatag ttgttaatta aataaactta atttagttta tttatagatt tcattggctt
3241 ctaaattttt tatctagata ataattattt tagttaattt tattctagat tatatatgat
3301 atgatctttc atttccataa aactaaagta agtgtaaacc tattcattgt tttaaaaata
3361 tctcttgcca gtcacgttac gttattagtt catgaccaaa atcccttaac gtgagttttc
3421 gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag atcctttttt
3481 tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt
3541 gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca gagcgcagat
3601 accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga actctgtagc
3661 accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca gtggcgataa
3721 gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc agcggtcggg
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3841 atacctacag cgtgagctat gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa aggcggacag
3901 gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc cagggggaaa
3961 cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc gtcgattttt
4021 gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg cctttttacg
4081 gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat cccctgattc
4141 tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca gccgaacgac
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4321 aaggccatcc gtcaggatgg ccttctgctt aatttgatgc ctggcagttt atggcgggcg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2280/PPICZA-EGFP毕赤酵母质粒 |
| P0215/pPICZB毕赤酵母质粒 |
| P0216/pPICZαA毕赤酵母质粒 |
| P0506/pPICZαB毕赤酵母质粒 |
| P0239/pPICZαC毕赤酵母质粒 |
| P0217/pGAPZA毕赤酵母质粒 |
| P0218/pGAPZB毕赤酵母质粒 |
| P0219/pGAPZC毕赤酵母质粒 |
| P0220/pGAPZαA毕赤酵母质粒 |
| P1231/pGAPZαB毕赤酵母质粒 |
| P1232/pGAPZαC毕赤酵母质粒 |
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文献和实验相关实验
min。注：平末端连接效率较低，在连接体系中添加 PEG4000 可以提高连接效率。在连接体系中添加 EcoRV 酶可以显著提高阳性率。四、 转化大肠杆菌感受态细胞及通过载体上的引物进行 PCR 鉴定阳性克隆挑选阳性克隆进行测序验证, 验证正确后, 提取质粒进行转染试验, 关于 sgRNA 是否有效。可以转染之后，直接提取 DNA，通过测序验证，如果在靶标位点附近开始出现杂乱的多峰说明是 sgRNA 有效，如果没有则该 sgRNA 无效。
蛋白质。其中Exo蛋白是一种核酸外切酶，结合在双链DNA的末端，从5'端向3'端降解DNA，产生3'突出端；Beta蛋白结合在单链DNA上，介导互补单链DNA退火，Gam蛋白可与RecBCD酶结合，抑制其降解外源DNA的活性。 ▲ Red 同源重组流程 Red同源重组技术具有同源序列短（40-60 bp）、重组效率高等特点。采用该转化体系时，可在宿主的任意靶位点进行基因敲除、敲入和点突变等操作，目前该方法在大肠杆菌中的应用已经十分成熟。 此外，还有RecA重组敲除系统（由RecA
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