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- 上海
- P0491
- 2026年04月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC-18
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUC18大肠克隆质粒
别称: pUC-18
启动子：Lac/lac promoter
复制子: pUC
质粒大小：Lac/lac promoter
质粒标签：LacZ
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：空载体
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体，通常运用于重组dna的分子克隆中，首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞（能接受外来重组的dna），这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组，通常是rec基因缺陷型的突变体，同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株，即具有这三种缺陷（rk mk rec ），同时对氨苄青霉素敏感（ap）。
puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因，而外源片段不具有，这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活，而外源片段自身环化的不能存活，这称为抗性筛选。
pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列，在这个编码区中插有一个多克隆位点，且不影响正常功能，DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息，当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后，互补表达有活性的β-半乳糖苷酶，称为α-互补现象，当有外源片段插入多克隆位点后，不能产生互补，即细菌不能产生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶）和诱导物IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的存在下，互补产物菌落呈现蓝色，不互补产物菌落呈白色，很容易鉴别，这种筛选方法称为α-互补现象筛选(蓝白斑筛选)。由上可见，puc18载体除了能重组导入外源片段外，在筛选表达过程中还具有重要的作用。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 2686 bp ds-DNA circular SYN 02-2-2015
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2686)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-2-2 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2686
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(146..469)
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of?beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITNSSSVPGDPLESTCRHASLALAVVLQRRDWENPGVTQLNR
LAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEWRLMRYFLLTHLCGISHRIWCTLSTICS
DAA"
primer_bind 379..395
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature 399..455
/gene="
"
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
primer_bind complement(465..481)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 489..505
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(513..543)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 558..579
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(867..1455)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1626..2486)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(2487..2591)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcg
421 actctagagg atccccgggt accgagctcg aattcgtaat catggtcata gctgtttcct
481 gtgtgaaatt gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt
541 aaagcctggg gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc
601 gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg
661 agaggcggtt tgcgtattgg gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg
721 gtcgttcggc tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca
781 gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac
841 cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac
901 aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg
961 tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac
1021 ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc aaagctcacg ctgtaggtat
1081 ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag
1141 cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac
1201 ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt
1261 gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaagaac agtatttggt
1321 atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc
1381 aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga
1441 aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac
1501 gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc
1561 cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct
1621 gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca
1681 tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct
1741 ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca
1801 ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc
1861 atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg
1921 cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct
1981 tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa
2041 aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta
2101 tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc
2161 ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg
2221 agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa
2281 gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg
2341 agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc
2401 accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg
2461 gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat
2521 cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata
2581 ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc
2641 atgacattaa cctataaaaa taggcgtatc acgaggccct ttcgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUC18大肠克隆质粒
别称: pUC-18
启动子：Lac/lac promoter
复制子: pUC
质粒大小：Lac/lac promoter
质粒标签：LacZ
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
| 5'测序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
|---|---|
| 3'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：空载体
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体，通常运用于重组dna的分子克隆中，首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞（能接受外来重组的dna），这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组，通常是rec基因缺陷型的突变体，同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株，即具有这三种缺陷（rk mk rec ），同时对氨苄青霉素敏感（ap）。
puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因，而外源片段不具有，这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活，而外源片段自身环化的不能存活，这称为抗性筛选。
pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列，在这个编码区中插有一个多克隆位点，且不影响正常功能，DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息，当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后，互补表达有活性的β-半乳糖苷酶，称为α-互补现象，当有外源片段插入多克隆位点后，不能产生互补，即细菌不能产生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶）和诱导物IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的存在下，互补产物菌落呈现蓝色，不互补产物菌落呈白色，很容易鉴别，这种筛选方法称为α-互补现象筛选(蓝白斑筛选)。由上可见，puc18载体除了能重组导入外源片段外，在筛选表达过程中还具有重要的作用。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 2686 bp ds-DNA circular SYN 02-2-2015
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2686)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-2-2 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2686
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(146..469)
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of?beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITNSSSVPGDPLESTCRHASLALAVVLQRRDWENPGVTQLNR
LAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEWRLMRYFLLTHLCGISHRIWCTLSTICS
DAA"
primer_bind 379..395
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature 399..455
/gene="
"
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
primer_bind complement(465..481)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 489..505
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(513..543)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 558..579
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(867..1455)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1626..2486)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(2487..2591)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcg
421 actctagagg atccccgggt accgagctcg aattcgtaat catggtcata gctgtttcct
481 gtgtgaaatt gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt
541 aaagcctggg gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc
601 gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg
661 agaggcggtt tgcgtattgg gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg
721 gtcgttcggc tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca
781 gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac
841 cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac
901 aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg
961 tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac
1021 ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc aaagctcacg ctgtaggtat
1081 ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag
1141 cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac
1201 ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt
1261 gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaagaac agtatttggt
1321 atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc
1381 aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga
1441 aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac
1501 gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc
1561 cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct
1621 gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca
1681 tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct
1741 ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca
1801 ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc
1861 atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg
1921 cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct
1981 tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa
2041 aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta
2101 tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc
2161 ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg
2221 agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa
2281 gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg
2341 agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc
2401 accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg
2461 gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat
2521 cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata
2581 ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc
2641 atgacattaa cctataaaaa taggcgtatc acgaggccct ttcgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4822/pDNR-LIB-PABPN1（2点突变）人源基因质粒 |
| P2411/pOTB7-LILRB1人源基因质粒 |
| P4943/pOTB7-PDIA4（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4931/pOTB7-KBTBD6人源基因质粒 |
| P4515/pOTB7-CXCL14人源基因质粒 |
| P4823/pOTB7-TRIM14人源基因质粒 |
| P4824/pOTB7-MCL1人源基因质粒 |
| P4825/pOTB7-NDUFC2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3733/pMD18-TBK1人源基因质粒 |
| P4093/pMD18-STAT2人源基因质粒 |
| P3210/pUC18-YWHAE人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是最常用的质粒载体，其结构组成紧凑，几乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来，其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全
zjf0709 左侧的是提取的PUC18质粒，中间的marker不太好（可以忽略），右侧的marker是DL2000，由于跑得时间过长所以marker跑散了，右侧DL2000最上面的一个条带是2000bp，PUC18的序列是2686bp，为什么会跑的比2000bp还快？这个现象正常吗？是不是超螺旋的问题？请大家帮忙解答，谢谢！！！ zjf0709 自己顶一下，请大家帮忙看一看。 济南基美
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
pUC18大肠克隆质粒
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