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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pUC18
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pUC18质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
生长条件:LB+氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pUC18质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pFastBacHTB质粒 |
| pFastBacHTC |
| pLAM12质粒 |
| pET32a-MS2(phage)质粒 |
| pET28a-SNAP25(human)质粒 |
| pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒 |
| pET32a-RbcS(Laminaria japonica Aresch)质粒 |
| pET22b-NPM1(human)质粒 |
| pET28a-PRMT5(human)质粒 |
| pET30a-His6-LOXCAT(140084)质粒 |
| pET28a-TLR4-CD质粒 |
| pET-21d质粒 |
| pET-SUMO-DFNA5(human)-6×His质粒 |
| pET28a-FTH1(human)质粒 |
| pBI121-EGFP质粒 |
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文献和实验相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ,是最常用的质粒载体,其结构组成紧凑,几乎不含多余的 DNA 片段,GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来,其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全
zjf0709 左侧的是提取的PUC18质粒,中间的marker不太好(可以忽略),右侧的marker是DL2000,由于跑得时间过长所以marker跑散了,右侧DL2000最上面的一个条带是2000bp,PUC18的序列是2686bp,为什么会跑的比2000bp还快?这个现象正常吗?是不是超螺旋的问题?请大家帮忙解答,谢谢!!! zjf0709 自己顶一下,请大家帮忙看一看。 济南基美
基因连接到载体上,需经过一系列酶促反应,涉及几种工具酶,其中最为重要的是两大类酶: ① 限制性内切酶:把载体DNA切开形成平端或粘末端。 ② DNA连接酶:用于连接载体和外源DNA片段。 pUC18/19是常用的质粒载体,其图谱如右所示: pUC18/19的多克隆位点如下所示: 三、实验仪器 离心机移液器16套(每2人1套)










