绿/红色荧光-稳转株构建

国自然/高分文章利器！CRISPR文库筛选保姆级指南：从Cas9递送到表型选择一文打通！

研究人员将靶向不同基因的众多sgRNA混合构建成“sgRNA文库”，从而实现高通量遗传筛选。在实验操作中，需严格控制感染条件，确保每个细胞仅整合一条sgRNA。在此条件下，整个细胞群体便构建为一个高度复杂的基因扰动细胞池（Perturbed cell pool），其中每个细胞均携带靶向特定基因的sgRNA并发生相应的基因组编辑事件。随后，对该细胞群体施加特定的选择压力或进行表型分选。最后，通过高通量测序对比筛选前后sgRNA的丰度变化，那些发生显著富集或耗竭的sgRNA，即可精准指向驱动目标表型

外泌体研究整体解决方案

电镜 纳米颗粒跟踪分析法：简称NTA，该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快，检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。 图四 NTA检测图 Western blot分子标志物检测：外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；细胞质蛋白，如肌动蛋白（Actin）和钙磷脂结合蛋白（Annexins）；参与生物功能的分子，如凋亡转接基因2互作蛋白X（ALIX）、肿瘤易感基因101蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。 图五

“命中”肝脏 | AAV精准靶向肝细胞

分享   目前代谢功能障碍相关性脂肪肝病（MASLD）已成为全球最常见的慢性肝病之一，影响着全球超过30%的人口，其发生与发育过程中不良环境暴露密切相关。近期，武汉大学科研团队揭示了孕期使用一种合成糖皮质激素药物——泼尼松能够诱导子代MASLD易感性，并确定了Serpina3c作为其预防和治疗的潜在靶点。实验过程中，研究人员利用和元构建的AAV8配合TBG启动子，通过尾静脉注射，在小鼠肝脏中特异性过表达Serpina3c。实验结果表明，肝脏特异性过表达Serpina3c逆转了肝