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武汉华尔纳生物科技有限公司
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绿/红色荧光-稳转株构建
1.服务说明:通过慢病毒转染目的细胞得到稳定表达绿/红色荧光的细胞。
2.服务周期:2-4周。
3.其他说明:带有嘌呤霉素筛选标记。




绿/红色荧光-稳转株构建
1.服务说明:通过慢病毒转染目的细胞得到稳定表达绿/红色荧光的细胞。
2.服务周期:2-4周。
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文献和实验电镜 纳米颗粒跟踪分析法:简称NTA,该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快,检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。 图四 NTA检测图 Western blot分子标志物检测:外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9、CD63和CD81;细胞质蛋白,如肌动蛋白(Actin)和钙磷脂结合蛋白(Annexins);参与生物功能的分子,如凋亡转接基因2互作蛋白X(ALIX)、肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)、热休克蛋白(HSP70、HSP90),以及细胞分泌的特异性蛋白。 图五
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
,并且 EST12-RACK1 诱导的细胞焦亡在 M.tb 诱导的免疫中起关键作用。 研究内容: 1、RD 区编码蛋白筛选:对 40 种 RD 区(RD1-3、11-14)重组蛋白进行筛选(巨噬细胞焦磷酸相关蛋白),通过 LDH 释放实验细胞毒性分析,发现 EST12 对巨噬细胞有显著焦解作用。 2、菌株构建:构建 M. tb H37Rv ΔEST12(Rv1579c 敲除菌株)、BCG-EST12(Rv1579c 过表达菌株)、M. smeg–EST12(Rv1579c 过表达菌株)。 3、小鼠
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