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- Xybio
- 上海
- P1724
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#22853
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：Lact-C2-GFP-p416牛源基因质粒
别称: Plasmid#22853
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：URA3
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：酵母菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：牛
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：URA3
荧光蛋白：
质粒简介
Lact-C2-GFP-p416牛源基因酵母表达质粒。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2919/pCDNA3.1-P53-N-GST人源基因质粒 |
| P2938/pCDNA3.1-P53-DB-GST人源基因质粒 |
| P0545/pCDNA3-mTOR人源基因质粒 |
| P0546/pCMV-FLAG-TRAF3人源基因质粒 |
| P0547/pCDEF-FLAG-β-catenin人源基因质粒 |
| P2671/pCDEF-FLAG-β-catenin-S675A人源基因质粒 |
| P0548/pCDEF-FLAG-IRF3人源基因质粒 |
| P0549/pCDNA3-NR3C1人源基因质粒 |
| P0550/C-Myc人源基因质粒 |
| P0551/SOX2人源基因质粒 |
| P0552/HA-p73α-pCDNA3人源基因质粒 |
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文献和实验疾病治疗中的作用 多项体外实验及在动物模型中进行的间接回体 (ex vivo) 和体内(in vivo) 实验均表明,肝细胞对LV 介导的基因转移易感,且转入的外源基因可长期表达。Zahler MH[8 ] 等研究发现,原代培养的胎儿肝细胞可以以30 %～40 %的效率被携带绿色荧光蛋白基因的LV (LV2GFP) 转导。同样的细胞经X 射线照射后,细胞复制减少,但LV 介导的基因转移未受影响。经多次传代后,细胞中仍有GFP 表达。当表达GFP 的细胞植入Balb/ C 严重
细胞和非分裂细胞均具有感染能力而具有更广的宿主范围。慢病毒载体还可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而实现持久表达。在感染能力方面可以有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，又很少引发机体免疫反应，能达到良好的基因治疗效果，具有广阔的应用前景。 随着人们对慢病毒载体的深入研究，为了提高慢病毒在临床上使用的安全性，慢病毒载体的优化也在不断的探讨中。慢病毒载体的发展经历了三个阶段，第一代慢病毒载体系统是以三质粒系统为代表，在构建时把HIV-1基因组中
基因片段大、免疫反应小等优点,在基因治疗中具有广泛的应用前景。现以HIV-1 为例,就慢病毒载体的生物学特征、慢病毒载体的构建、在基因治疗中的应用以及生物安全性等 方面作一综述。一、 慢病毒载体的生物学特征慢病毒包括灵长类慢病毒,如人 类免疫缺陷病毒(HIV) 和猴免疫缺陷病毒(SIV) ,以及非灵长类慢病毒如猫免疫缺陷病毒( FIV) 、马传染性贫血病毒(EIAV) 、牛免疫缺陷病毒(BIV) 和维斯纳-梅迪病毒(VMV)等。目 前,HIV-1、HIV-2、SIV、FIV 及EIAV被广泛研究用作基因
