- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1788
- 2025年07月14日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC-SPYNE(R)173
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUC-SPYNE(R)173植物双分子荧光质粒
别称: pUC-SPYNE(R)173
质粒属性
质粒简介
pUC-SPYNE(R)173是一个植物细胞双分子荧光BIFC质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4380 bp ds-DNA circular SYN 04-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4380
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 863..1208
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
CDS 1223..1741
/codon_start=1
/product="N-terminal fragment of mVenus for use in
bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and
Hu, 2010)"
/label=VN173
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTFGYGLQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIE"
CDS 1742..1771
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 1772..1831
/label=MCS
terminator 1842..2094
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
promoter 2593..2697
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 2698..3558
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3729..4317
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat
61 accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag
121 cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac
181 gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt gagttagctc
241 actcattagg caccccaggc tttacacttt atgcttccgg ctcgtatgtt gtgtggaatt
301 gtgagcggat aacaatttca cacaggaaac agctatgacc atgattacgc caagcttgca
361 tgcctgcagg tccccagatt agccttttca atttcagaaa gaatgctaac ccacagatgg
421 ttagagaggc ttacgcagca ggtctcatca agacgatcta cccgagcaat aatctccagg
481 aaatcaaata ccttcccaag aaggttaaag atgcagtcaa aagattcagg actaactgca
541 tcaagaacac agagaaagat atatttctca agatcagaag tactattcca gtatggacga
601 ttcaaggctt gcttcacaaa ccaaggcaag taatagagat tggagtctct aaaaaggtag
661 ttcccactga atcaaaggcc atggagtcaa agattcaaat agaggaccta acagaactcg
721 ccgtaaagac tggcgaacag ttcatacaga gtctcttacg actcaatgac aagaagaaaa
781 tcttcgtcaa catggtggag cacgacacac ttgtctactc caaaaatatc aaagatacag
841 tctcagaaga ccaaagggca attgagactt ttcaacaaag ggtaatatcc ggaaacctcc
901 tcggattcca ttgcccagct atctgtcact ttattgtgaa gatagtggaa aaggaaggtg
961 gctcctacaa atgccatcat tgcgataaag gaaaggccat cgttgaagat gcctctgccg
1021 acagtggtcc caaagatgga cccccaccca cgaggagcat cgtggaaaaa gaagacgttc
1081 caaccacgtc ttcaaagcaa gtggattgat gtgatatctc cactgacgta agggatgacg
1141 cacaatccca ctatccttcg caagaccctt cctctatata aggaagttca tttcatttgg
1201 agagaacacg ggggactcta gaatggtgag caagggcgag gagctgttca ccggggtggt
1261 gcccatcctg gtcgagctgg acggcgacgt aaacggccac aagttcagcg tgtccggcga
1321 gggcgagggc gatgccacct acggcaagct gaccctgaag ttcatctgca ccaccggcaa
1381 gctgcccgtg ccctggccca ccctcgtgac caccttcggc tacggcctgc agtgcttcgc
1441 ccgctacccc gaccacatga agcagcacga cttcttcaag tccgccatgc ccgaaggcta
1501 cgtccaggag cgcaccatct tcttcaagga cgacggcaac tacaagaccc gcgccgaggt
1561 gaagttcgag ggcgacaccc tggtgaaccg catcgagctg aagggcatcg acttcaagga
1621 ggacggcaac atcctggggc acaagctgga gtacaactac aacagccaca acgtctatat
1681 catggccgac aagcagaaga acggcatcaa ggtgaacttc aagatccgcc acaacatcga
1741 ggagcaaaag ttgatttctg aggaggatct tgggcccagg cctactagtg gatccgtcga
1801 cctcgagggt accgctcccg ggtaggagct cgaatttccc cgatcgttca aacatttggc
1861 aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc gatgattatc atataatttc
1921 tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg catgacgtta tttatgagat
1981 gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata cgcgatagaa aacaaaatat
2041 agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc tatgttacta gatcgggaat
2101 tcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat
2161 cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat
2221 cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc
2281 cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca ctctcagtac aatctgctct
2341 gatgccgcat agttaagcca gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg
2401 gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg
2461 tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc
2521 ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt
2581 cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat
2641 ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg
2701 agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt
2761 tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga
2821 gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa
2881 gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt
2941 attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc cgcatacact attctcagaa tgacttggtt
3001 gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt acggatggca tgacagtaag agaattatgc
3061 agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga
3121 ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat
3181 cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct
3241 gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta ttaactggcg aactacttac tctagcttcc
3301 cggcaacaat taatagactg gatggaggcg gataaagttg caggaccact tctgcgctcg
3361 gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc
3421 ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg
3481 acggggagtc aggcaactat ggatgaacga aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca
3541 ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta
3601 aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc
3661 aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa
3721 ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca
3781 ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta
3841 actggcttca gcagagcgca gataccaaat actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc
3901 caccacttca agaactctgt agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca
3961 gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta
4021 ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag
4081 cgaacgacct acaccgaact gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt
4141 cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc
4201 acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac
4261 ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac
4321 gccagcaacg cggccttttt acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUC-SPYNE(R)173植物双分子荧光质粒
别称: pUC-SPYNE(R)173
| 启动子: | 35s |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | NOS |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 植物 |
|---|---|
| 载体用途： | 双分子荧光 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pUC-SPYNE(R)173是一个植物细胞双分子荧光BIFC质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4380 bp ds-DNA circular SYN 04-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4380
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 863..1208
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
CDS 1223..1741
/codon_start=1
/product="N-terminal fragment of mVenus for use in
bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and
Hu, 2010)"
/label=VN173
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTFGYGLQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIE"
CDS 1742..1771
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 1772..1831
/label=MCS
terminator 1842..2094
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
promoter 2593..2697
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 2698..3558
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3729..4317
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat
61 accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag
121 cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac
181 gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt gagttagctc
241 actcattagg caccccaggc tttacacttt atgcttccgg ctcgtatgtt gtgtggaatt
301 gtgagcggat aacaatttca cacaggaaac agctatgacc atgattacgc caagcttgca
361 tgcctgcagg tccccagatt agccttttca atttcagaaa gaatgctaac ccacagatgg
421 ttagagaggc ttacgcagca ggtctcatca agacgatcta cccgagcaat aatctccagg
481 aaatcaaata ccttcccaag aaggttaaag atgcagtcaa aagattcagg actaactgca
541 tcaagaacac agagaaagat atatttctca agatcagaag tactattcca gtatggacga
601 ttcaaggctt gcttcacaaa ccaaggcaag taatagagat tggagtctct aaaaaggtag
661 ttcccactga atcaaaggcc atggagtcaa agattcaaat agaggaccta acagaactcg
721 ccgtaaagac tggcgaacag ttcatacaga gtctcttacg actcaatgac aagaagaaaa
781 tcttcgtcaa catggtggag cacgacacac ttgtctactc caaaaatatc aaagatacag
841 tctcagaaga ccaaagggca attgagactt ttcaacaaag ggtaatatcc ggaaacctcc
901 tcggattcca ttgcccagct atctgtcact ttattgtgaa gatagtggaa aaggaaggtg
961 gctcctacaa atgccatcat tgcgataaag gaaaggccat cgttgaagat gcctctgccg
1021 acagtggtcc caaagatgga cccccaccca cgaggagcat cgtggaaaaa gaagacgttc
1081 caaccacgtc ttcaaagcaa gtggattgat gtgatatctc cactgacgta agggatgacg
1141 cacaatccca ctatccttcg caagaccctt cctctatata aggaagttca tttcatttgg
1201 agagaacacg ggggactcta gaatggtgag caagggcgag gagctgttca ccggggtggt
1261 gcccatcctg gtcgagctgg acggcgacgt aaacggccac aagttcagcg tgtccggcga
1321 gggcgagggc gatgccacct acggcaagct gaccctgaag ttcatctgca ccaccggcaa
1381 gctgcccgtg ccctggccca ccctcgtgac caccttcggc tacggcctgc agtgcttcgc
1441 ccgctacccc gaccacatga agcagcacga cttcttcaag tccgccatgc ccgaaggcta
1501 cgtccaggag cgcaccatct tcttcaagga cgacggcaac tacaagaccc gcgccgaggt
1561 gaagttcgag ggcgacaccc tggtgaaccg catcgagctg aagggcatcg acttcaagga
1621 ggacggcaac atcctggggc acaagctgga gtacaactac aacagccaca acgtctatat
1681 catggccgac aagcagaaga acggcatcaa ggtgaacttc aagatccgcc acaacatcga
1741 ggagcaaaag ttgatttctg aggaggatct tgggcccagg cctactagtg gatccgtcga
1801 cctcgagggt accgctcccg ggtaggagct cgaatttccc cgatcgttca aacatttggc
1861 aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc gatgattatc atataatttc
1921 tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg catgacgtta tttatgagat
1981 gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata cgcgatagaa aacaaaatat
2041 agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc tatgttacta gatcgggaat
2101 tcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat
2161 cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat
2221 cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc
2281 cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca ctctcagtac aatctgctct
2341 gatgccgcat agttaagcca gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg
2401 gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg
2461 tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc
2521 ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt
2581 cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat
2641 ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg
2701 agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt
2761 tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga
2821 gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa
2881 gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt
2941 attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc cgcatacact attctcagaa tgacttggtt
3001 gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt acggatggca tgacagtaag agaattatgc
3061 agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga
3121 ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat
3181 cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct
3241 gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta ttaactggcg aactacttac tctagcttcc
3301 cggcaacaat taatagactg gatggaggcg gataaagttg caggaccact tctgcgctcg
3361 gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc
3421 ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg
3481 acggggagtc aggcaactat ggatgaacga aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca
3541 ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta
3601 aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc
3661 aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa
3721 ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca
3781 ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta
3841 actggcttca gcagagcgca gataccaaat actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc
3901 caccacttca agaactctgt agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca
3961 gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta
4021 ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag
4081 cgaacgacct acaccgaact gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt
4141 cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc
4201 acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac
4261 ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac
4321 gccagcaacg cggccttttt acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1364/pSNAP-tag(T7)2-His大肠表达质粒 |
| P2163/His-LacZ大肠报告质粒 |
| P3065/pSMART LCKan质粒 |
| P3220/pMIND质粒 |
| P0155/pCDNA3.0哺乳表达质粒 |
| P0942/pCDNA3-HA-N哺乳表达质粒 |
| P0156/pCDNA3.1(-)哺乳表达质粒 |
| P0157/pCDNA3.1(+)哺乳表达质粒 |
| P0417/pCDNA3.1-Zeo哺乳表达质粒 |
| P3066/pCDNA3.1-HA-Hygro哺乳表达质粒 |
| P1266/pCDNA3.1-Hygro哺乳表达质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
次数 理论上PCR扩增效率应为100%，PCR产物随着循环的进行成指数形成增长 实际上：DNA的每一次复制都不完全，即每一次扩增中，模板不是呈2倍增长。 Y= A（1+R）n R 代表扩增效率： R = 参与复制的模板/总模板 R在整个PCR扩增过程中不是固定不变的。 A 在 1～105拷贝,循环次数n≤20次：R 相对稳定，原始模板以相对固定的指数形式增加，适合定量分析 随着循环次数n的增加（>20次），R值逐渐减少，Y 呈非固定的指数形式增加，最后进入平台期 PCR反应的后期：PCR
一、质粒 绝大多数的生物都是以DNA的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication，或译为复制起点)，使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon，我们姑且把它译为为复制体吧！。原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。其中质粒的基因体和原核染色体类似，是由双绞炼DNA构成，并以超卷曲的形式存在。它们的基因体约
一、质粒绝大多数的生物都是以DNA 的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication，或译为复制起点)，使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon，我们姑且把它译为为复制体吧！原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。其中质粒的基因体和原核染色体类似，是由双绞炼DNA 构成，并以超卷曲的形式存在。它们的基因体约
pUC-SPYNE(R)173植物双分子荧光质粒
￥100 - 1000
