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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase聚合酶基因质粒
别称: pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase
启动子:CMV
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记:G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:Neo/G418
荧光蛋白:
质粒简介
pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase是一个哺乳细胞T7 RNA聚合酶表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8134 bp ds-DNA circular SYN 19-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8134
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
regulatory 913..922
/regulatory_class="other"
/note="vertebrate consensus sequence for strong initiation
of translation (Kozak, 1987)"
CDS 922..987
/codon_start=1
/product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an
enterokinase cleavage site"
/label=3xFLAG
/translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"
CDS 1033..3690
/codon_start=1
/label=T7 RNA polymerase
/translation="MNTINIAKNDFSDIELAAIPFNTLADHYGERLAREQLALEHESYE
MGEARFRKMFERQLKAGEVADNAAAKPLITTLLPKMIARINDWFEEVKAKRGKRPTAFQ
FLQEIKPEAVAYITIKTTLACLTSADNTTVQAVASAIGRAIEDEARFGRIRDLEAKHFK
KNVEEQLNKRVGHVYKKAFMQVVEADMLSKGLLGGEAWSSWHKEDSIHVGVRCIEMLIE
STGMVSLHRQNAGVVGQDSETIELAPEYAEAIATRAGALAGISPMFQPCVVPPKPWTGI
TGGGYWANGRRPLALVRTHSKKALMRYEDVYMPEVYKAINIAQNTAWKINKKVLAVANV
ITKWKHCPVEDIPAIEREELPMKPEDIDMNPEALTAWKRAAAAVYRKDKARKSRRISLE
FMLEQANKFANHKAIWFPYNMDWRGRVYAVSMFNPQGNDMTKGLLTLAKGKPIGKEGYY
WLKIHGANCAGVDKVPFPERIKFIEENHENIMACAKSPLENTWWAEQDSPFCFLAFCFE
YAGVQHHGLSYNCSLPLAFDGSCSGIQHFSAMLRDEVGGRAVNLLPSETVQDIYGIVAK
KVNEILQADAINGTDNEVVTVTDENTGEISEKVKLGTKALAGQWLAYGVTRSVTKRSVM
TLAYGSKEFGFRQQVLEDTIQPAIDSGKGLMFTQPNQAAGYMAKLIWESVSVTVVAAVE
AMNWLKSAAKLLAAEVKDKKTGEILRKRCAVHWVTPDGFPVWQEYKKPIQTRLNLMFLG
QFRLQPTINTNKDSEIDAHKQESGIAPNFVHSQDGSHLRKTVVWAHEKYGIESFALIHD
SFGTIPADAANLFKAVRETMVDTYESCDVLADFYDQFADQLHESQLDKMPALPAKGNLN
LRDILESDFAFAFA"
polyA_signal 3734..3958
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 4004..4432
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4446..4775
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 4626..4761
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
CDS 4842..5636
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 5810..5931
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(6382..6967)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7138..7998)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=Amp
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7999..8103)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc
901 gtttaaactt aagccaccat ggactacaaa gaccatgacg gtgattataa agatcatgac
961 atcgactaca aggatgacga tgacaagctt ggtaccgagc tcggatccac tagtccagtg
1021 tggtggaatt ctatgaacac gattaacatc gctaagaacg acttctctga catcgaactg
1081 gctgctatcc cgttcaacac tctggctgac cattacggtg agcgtttagc tcgcgaacag
1141 ttggcccttg agcatgagtc ttacgagatg ggtgaagcac gcttccgcaa gatgtttgag
1201 cgtcaactta aagctggtga ggttgcggat aacgctgccg ccaagcctct catcactacc
1261 ctactcccta agatgattgc acgcatcaac gactggtttg aggaagtgaa agctaagcgc
1321 ggcaagcgcc cgacagcctt ccagttcctg caagaaatca agccggaagc cgtagcgtac
1381 atcaccatta agaccactct ggcttgccta accagtgctg acaatacaac cgttcaggct
1441 gtagcaagcg caatcggtcg ggccattgag gacgaggctc gcttcggtcg tatccgtgac
1501 cttgaagcta agcacttcaa gaaaaacgtt gaggaacaac tcaacaagcg cgtagggcac
1561 gtctacaaga aagcatttat gcaagttgtc gaggctgaca tgctctctaa gggtctactc
1621 ggtggcgagg cgtggtcttc gtggcataag gaagactcta ttcatgtagg agtacgctgc
1681 atcgagatgc tcattgagtc aaccggaatg gttagcttac accgccaaaa tgctggcgta
1741 gtaggtcaag actctgagac tatcgaactc gcacctgaat acgctgaggc tatcgcaacc
1801 cgtgcaggtg cgctggctgg catctctccg atgttccaac cttgcgtagt tcctcctaag
1861 ccgtggactg gcattactgg tggtggctat tgggctaacg gtcgtcgtcc tctggcgctg
1921 gtgcgtactc acagtaagaa agcactgatg cgctacgaag acgtttacat gcctgaggtg
1981 tacaaagcga ttaacattgc gcaaaacacc gcatggaaaa tcaacaagaa agtcctagcg
2041 gtcgccaacg taatcaccaa gtggaagcat tgtccggtcg aggacatccc tgcgattgag
2101 cgtgaagaac tcccgatgaa accggaagac atcgacatga atcctgaggc tctcaccgcg
2161 tggaaacgtg ctgccgctgc tgtgtaccgc aaggacaagg ctcgcaagtc tcgccgtatc
2221 agccttgagt tcatgcttga gcaagccaat aagtttgcta accataaggc catctggttc
2281 ccttacaaca tggactggcg cggtcgtgtt tacgctgtgt caatgttcaa cccgcaaggt
2341 aacgatatga ccaaaggact gcttacgctg gcgaaaggta aaccaatcgg taaggaaggt
2401 tactactggc tgaaaatcca cggtgcaaac tgtgcgggtg tcgataaggt tccgttccct
2461 gagcgcatca agttcattga ggaaaaccac gagaacatca tggcttgcgc taagtctcca
2521 ctggagaaca cttggtgggc tgagcaagat tctccgttct gcttccttgc gttctgcttt
2581 gagtacgctg gggtacagca ccacggcctg agctataact gctcccttcc gctggcgttt
2641 gacgggtctt gctctggcat ccagcacttc tccgcgatgc tccgagatga ggtaggtggt
2701 cgcgcggtta acttgcttcc tagtgaaacc gttcaggaca tctacgggat tgttgctaag
2761 aaagtcaacg agattctaca agcagacgca atcaatggga ccgataacga agtagttacc
2821 gtgaccgatg agaacactgg tgaaatctct gagaaagtca agctgggcac taaggcactg
2881 gctggtcaat ggctggctta cggtgttact cgcagtgtga ctaagcgttc agtcatgacg
2941 ctggcttacg ggtccaaaga gttcggcttc cgtcaacaag tgctggaaga taccattcag
3001 ccagctattg attccggcaa gggtctgatg ttcactcagc cgaatcaggc tgctggatac
3061 atggctaagc tgatttggga atctgtgagc gtgacggtgg tagctgcggt tgaagcaatg
3121 aactggctta agtctgctgc taagctgctg gctgctgagg tcaaagataa gaagactgga
3181 gagattcttc gcaagcgttg cgctgtgcat tgggtaactc ctgatggttt ccctgtgtgg
3241 caggaataca agaagcctat tcagacgcgc ttgaacctga tgttcctcgg tcagttccgc
3301 ttacagccta ccattaacac caacaaagat agcgagattg atgcacacaa acaggagtct
3361 ggtatcgctc ctaactttgt acacagccaa gacggtagcc accttcgtaa gactgtagtg
3421 tgggcacacg agaagtacgg aatcgaatct tttgcactga ttcacgactc cttcggtacc
3481 attccggctg acgctgcgaa cctgttcaaa gcagtgcgcg aaactatggt tgacacatat
3541 gagtcttgtg atgtactggc tgatttctac gaccagttcg ctgaccagtt gcacgagtct
3601 caattggaca aaatgccagc acttccggct aaaggtaact tgaacctccg tgacatctta
3661 gagtcggact tcgcgttcgc gttcgcgtaa ctcgagtcta gagggcccgt ttaaacccgc
3721 tgatcagcct cgactgtgcc ttctagttgc cagccatctg ttgtttgccc ctcccccgtg
3781 ccttccttga ccctggaagg tgccactccc actgtccttt cctaataaaa tgaggaaatt
3841 gcatcgcatt gtctgagtag gtgtcattct attctggggg gtggggtggg gcaggacagc
3901 aagggggagg attgggaaga caatagcagg catgctgggg atgcggtggg ctctatggct
3961 tctgaggcgg aaagaaccag ctggggctct agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc
4021 gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc
4081 ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc
4141 cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc
4201 gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg
4261 gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact
4321 ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt
4381 tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttaattctgt
4441 ggaatgtgtg tcagttaggg tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc
4501 aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca ggtgtggaaa gtccccaggc tccccagcag
4561 gcagaagtat gcaaagcatg catctcaatt agtcagcaac catagtcccg cccctaactc
4621 cgcccatccc gcccctaact ccgcccagtt ccgcccattc tccgccccat ggctgactaa
4681 ttttttttat ttatgcagag gccgaggccg cctctgcctc tgagctattc cagaagtagt
4741 gaggaggctt ttttggaggc ctaggctttt gcaaaaagct cccgggagct tgtatatcca
4801 ttttcggatc tgatcaagag acaggatgag gatcgtttcg catgattgaa caagatggat
4861 tgcacgcagg ttctccggcc gcttgggtgg agaggctatt cggctatgac tgggcacaac
4921 agacaatcgg ctgctctgat gccgccgtgt tccggctgtc agcgcagggg cgcccggttc
4981 tttttgtcaa gaccgacctg tccggtgccc tgaatgaact gcaggacgag gcagcgcggc
5041 tatcgtggct ggccacgacg ggcgttcctt gcgcagctgt gctcgacgtt gtcactgaag
5101 cgggaaggga ctggctgcta ttgggcgaag tgccggggca ggatctcctg tcatctcacc
5161 ttgctcctgc cgagaaagta tccatcatgg ctgatgcaat gcggcggctg catacgcttg
5221 atccggctac ctgcccattc gaccaccaag cgaaacatcg catcgagcga gcacgtactc
5281 ggatggaagc cggtcttgtc gatcaggatg atctggacga agagcatcag gggctcgcgc
5341 cagccgaact gttcgccagg ctcaaggcgc gcatgcccga cggcgaggat ctcgtcgtga
5401 cccatggcga tgcctgcttg ccgaatatca tggtggaaaa tggccgcttt tctggattca
5461 tcgactgtgg ccggctgggt gtggcggacc gctatcagga catagcgttg gctacccgtg
5521 atattgctga agagcttggc ggcgaatggg ctgaccgctt cctcgtgctt tacggtatcg
5581 ccgctcccga ttcgcagcgc atcgccttct atcgccttct tgacgagttc ttctgagcgg
5641 gactctgggg ttcgaaatga ccgaccaagc gacgcccaac ctgccatcac gagatttcga
5701 ttccaccgcc gccttctatg aaaggttggg cttcggaatc gttttccggg acgccggctg
5761 gatgatcctc cagcgcgggg atctcatgct ggagttcttc gcccacccca acttgtttat
5821 tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca aatttcacaa ataaagcatt
5881 tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc aatgtatctt atcatgtctg
5941 tataccgtcg acctctagct agagcttggc gtaatcatgg tcatagctgt ttcctgtgtg
6001 aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa catacgagcc ggaagcataa agtgtaaagc
6061 ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt
6121 ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg
6181 cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt
6241 tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat ccacagaatc
6301 aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa
6361 aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa
6421 tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc
6481 ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc
6541 cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag
6601 ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga
6661 ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc
6721 gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac
6781 agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga agaacagtat ttggtatctg
6841 cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca
6901 aaccaccgct ggtagcggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg
6961 atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc
7021 acgttaaggg attttggtca tgagattatc aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa
7081 ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag tatatatgag taaacttggt ctgacagtta
7141 ccaatgctta atcagtgagg cacctatctc agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt
7201 tgcctgactc cccgtcgtgt agataactac gatacgggag ggcttaccat ctggccccag
7261 tgctgcaatg ataccgcgag acccacgctc accggctcca gatttatcag caataaacca
7321 gccagccgga agggccgagc gcagaagtgg tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc
7381 tattaattgt tgccgggaag ctagagtaag tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt
7441 tgttgccatt gctacaggca tcgtggtgtc acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag
7501 ctccggttcc caacgatcaa ggcgagttac atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt
7561 tagctccttc ggtcctccga tcgttgtcag aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat
7621 ggttatggca gcactgcata attctcttac tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt
7681 gactggtgag tactcaacca agtcattctg agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc
7741 ttgcccggcg tcaatacggg ataataccgc gccacatagc agaactttaa aagtgctcat
7801 cattggaaaa cgttcttcgg ggcgaaaact ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag
7861 ttcgatgtaa cccactcgtg cacccaactg atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt
7921 ttctgggtga gcaaaaacag gaaggcaaaa tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg
7981 gaaatgttga atactcatac tcttcctttt tcaatattat tgaagcattt atcagggtta
8041 ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc
8101 gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P3918/pCMV-SPORT6-PBLD(1同义突变)人源基因质粒 |
| P3919/pCMV-SPORT6-SRPRA人源基因质粒 |
| P3920/pCMV-SPORT6-FAM206A人源基因质粒 |
| P3921/pCMV-SPORT6-CLDN11人源基因质粒 |
| P3922/pCMV-SPORT6-CAST(52-2253bp)人源基因质粒 |
| P3923/pCMV-SPORT6-MFN2人源基因质粒 |
| P3924/pCMV-SPORT6-G0S2人源基因质粒 |
| P3925/pCMV-SPORT6-TUBG2人源基因质粒 |
| P3926/pCMV-SPORT6-UBLCP1人源基因质粒 |
| P3927/pCMV-SPORT6-TADA3人源基因质粒 |
| P3928/pCMV-SPORT6-PTS人源基因质粒 |
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板( template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关,所以也称转录酶。反应以下式示: n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成,合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由( 1) DNA与酶的结合
RNA 依赖性 DNA 聚合酶 RNA dependentDNA polymerase
RNA 依赖性 DNA 聚合酶 RNA dependentDNA polymerase 为依赖于 RNA合成 DNA的酶,亦称逆转录酶(反向转录酶, reverse transcriptase)。系包含在各种逆向病毒粒子中的酶。以病毒单链 RNA为模板合成与模板互补的核苷酸序列的 DNA。 1970年由坦明及巴尔的摩( H.M.Temin et al.和 D.Baltimore)各自独立的发现病毒的 RNA,首先通过此酶合成 RNA- DNA复合体,进而由这个复合体合成
模板链并引导RNA聚合酶在RNA链合成起始的合适部位(启动子部位)与模板结合起着重要的作用。在核心酶中加入σ可使酶和非启动子部位的亲和力减少约104 倍,因而增加它与启动子部位结合的专一性。其他原核生物的RNA聚合酶在亚基大小和组成上明显相似,一些病毒(如大肠杆菌T7噬菌体)的RNA聚合酶则完全不同。原核生物中主要的RNA都是由同一种RNA聚合酶催化合成的。已在真核生物中发现3种RNA聚合酶,分别催化各种RNA的合成。这些酶也是多亚基复合物,一般含两个较大的亚基(分子量~140000和~










