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- Xybio
- 上海
- P2301
- 2026年04月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_144958.4;BM-010;Ddx2a;Eif4
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pSV40-Eif4a1-m(11-1221bp)小鼠基因质粒
别称: NM_144958.4;BM-010;Ddx2a;Eif4
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：小鼠
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pSV40-Eif4a1-m(11-1221bp)质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3802/pECMV-3×FLAG-MED10人源基因质粒 |
| P4927/pECMV-3×FLAG-YTHDF3人源基因质粒 |
| P4928/pECMV-3×FLAG-EIF4G2(1同义突变）人源基因质粒 |
| P4892/pCDNA3.1-3×HA-HDAC4人源基因质粒 |
| P4933/pCDNA3.0-HA-KPNA1人源基因质粒 |
| P4941/pCDNA3.1-PINK1-Myc人源基因质粒 |
| P4942/pECMV-3×FLAG-METTL14人源基因质粒 |
| P4961/pLVML-Myc-KBTBD6-IRES-Puro人源基因质粒 |
| P4955/pCMV-HA-MICALL2(2同义突变）人源基因质粒 |
| P4956/pECMV-3×FLAG-METTL3（1同义突变）人源基因质粒 |
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文献和实验.含pUC18质粒的大肠杆菌 附：试剂的配制 1.溶液Ⅰ 50mmol/L 葡萄糖 5mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris) Tris·HCl (pH8.0) 10mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0) 2.溶液Ⅱ 0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合 3.溶液Ⅲ 5mmol/L 乙酸钾 60 ml 冰乙酸 11.5 ml 水
高速冷冻离心机 4．恒温摇床 5．恒温箱 6．消毒离心管 7．消毒tips 8．玻璃培养皿 直径90mm 9．玻璃涂布器 10．95%乙醇 11．标记笔 实验材料 1．人Bcl-2重组质粒 它是Eco R Ⅰ单酶切的pBluescriptⅡ KS(-)载体与EcoR Ⅰ单酶切的人Bcl-2 cDNA重组而成的，大小为4 861bp，前者是一种由pUC
完将上清迅速倒入已加的酚-氯仿-异戊醇中，充分混匀。小心不要将白色沉淀物倒入酚-氯仿-异戊醇中。10、12000 rpm离心4~5 min。 11、吸水相，加入已加好的无水乙醇中，颠倒混匀几次。小心不要吸入酚相，没把握时宁可放弃一些水相。 15、置于恒温器上干燥（55℃）至无色透明或无乙醇气味，大至要5~10 min。 16、加入30~40 μl 1×TE缓冲液溶解沉淀，－20℃储存备用。 小量快提质粒鉴定 1、取培养的菌液1 ml，12000 rpm离心30 sec，收集
