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- Xybio
- 上海
- P2008
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_016792.4;32kDa;TRP32;Txnl
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pSV40-Txnl1-m(10-855bp)小鼠基因质粒
别称: NM_016792.4;32kDa;TRP32;Txnl
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：小鼠
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pSV40-Txnl1-m(10-855bp)质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3997/pCMV-SPORT6-LUC7L2（1点突变）人源基因质粒 |
| P3998/pCMV-SPORT6-EFCAB7人源基因质粒 |
| P3999/pCMV-SPORT6-CTH人源基因质粒 |
| P4000/pCMV-SPORT6-EIF3D人源基因质粒 |
| P4001/pCMV-SPORT6-VAT1人源基因质粒 |
| P4002/pCMV-SPORT6-NR4A1人源基因质粒 |
| P4003/pCMV-SPORT6-KIAA0020人源基因质粒 |
| P4004/pCMV-SPORT6-KRCC1人源基因质粒 |
| P4005/pCMV-SPORT6-RPS2人源基因质粒 |
| P4006/pCMV-SPORT6-LCMT2人源基因质粒 |
| P4007/pCMV-SPORT6-LRRC40人源基因质粒 |
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文献和实验.含pUC18质粒的大肠杆菌 附：试剂的配制 1.溶液Ⅰ 50mmol/L 葡萄糖 5mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris) Tris·HCl (pH8.0) 10mmol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0) 2.溶液Ⅱ 0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合 3.溶液Ⅲ 5mmol/L 乙酸钾 60 ml 冰乙酸 11.5 ml 水
bobbymm 我在做hBrf1这个基因，目前是要构建4个质粒。 步骤： 1、PCR引物设计，加酶切位点，扩增产物2982+56bp，跑胶鉴定。 2、PCR产物跑胶，回收，phenol,chloroform,NaAc+Ethanol提纯。老板说如果测浓度太浪费sample 3、双酶切，体系100ul,两个酶分别为2ul。双酶切之后提纯。（已经双酶切PGL3-basic，酶切过的在LB
- 12特异片段 四种方法提取的质粒DNA扩增h IL - 12，其基因片段大小为1613bp，方法4提到的质粒没有扩增出h IL - 12，说明此法所提取的质粒DNA含蛋白质较多，见图2。 图2 四种方法提取的质粒DNA PCR扩增结果电泳图(1， 2， 3， 4: 分别用方法1， 2， 3， 4 所提取的质粒pB I121;M: DL2000Ma rke r) 3 讨论 碱裂解法提取质粒DNA的基本原理是溶液Ⅰ使细胞悬浮并且EDTA可以与Ca2 和Mg2 螯和，抑制DNase的活性
