pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒

pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒

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  • 上海
  • P1666
  • 2025年07月11日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Plasmid#1774;CMM9DKCA2DKCB4EST2PFBMF

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒
    别称: Plasmid#1774;CMM9DKCA2DKCB4EST2PFBMF
    启动子:CMV
    复制子: pUC
    原核抗性: Amp
    筛选标记:G418
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度

    质粒属性
    载体宿主:哺乳细胞
    载体用途:蛋白表达
    基因种属:
    基因类型:ORF
    原核抗性:Amp
    真核抗性:Neo/G418
    荧光蛋白:

    质粒简介
       pBABE-neo-hTERT是一个人源基因逆病毒表达质粒。

    质粒图谱
    pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒

    质粒序列
    LOCUS       Exported                8709 bp ds-DNA     circular SYN 03-DEC-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..8709
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         LTR             6..475
                         /note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia 
                         virus"
         misc_feature    540..739
                         /label=MMLV Psi
                         /note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus 
                         (MMLV)"
         CDS             940..1356
                         /label=gag (truncated)
                         /note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag 
                         gene lacking the start codon"
         CDS             1436..4834
                         /codon_start=1
                         /label=hTert
                         /translation="MPRAPRCRAVRSLLRSHYREVLPLATFVRRLGPQGWRLVQRGDPA
                         AFRALVAQCLVCVPWDARPPPAAPSFRQVSCLKELVARVLQRLCERGAKNVLAFGFALL
                         DGARGGPPEAFTTSVRSYLPNTVTDALRGSGAWGLLLRRVGDDVLVHLLARCALFVLVA
                         PSCAYQVCGPPLYQLGAATQARPPPHASGPRRRLGCERAWNHSVREAGVPLGLPAPGAR
                         RRGGSASRSLPLPKRPRRGAAPEPERTPVGQGSWAHPGRTRGPSDRGFCVVSPARPAEE
                         ATSLEGALSGTRHSHPSVGRQHHAGPPSTSRPPRPWDTC-PPVYAETKHFLYSSGDKEQ
                         LRPSFLLSSLRPSLTGARRLVETIFLGSRPWMPGTPRRLPRLPQRYWQMRPLFLELLGN
                         HAQCPYGVLLKTHCPLRAAVTPAAGVCAREKPQGSVAAPEEEDTDPRRLVQLLRQHSSP
                         WQVYGFVRACLRRLVPPGLWGSRHNERRFLRNTKKFISLGKHAKLSLQELTWKMSVRGC
                         AWLRRSPGVGCVPAAEHRLREEILAKFLHWLMSVYVVELLRSFFYVTETTFQKNRLFFY
                         RKSVWSKLQSIGIRQHLKRVQLRELSEAEVRQHREARPALLTSRLRFIPKPDGLRPIVN
                         MDYVVGARTFRREKRAERLTSRVKALFSVLNYERARRPGLLGASVLGLDDIHRAWRTFV
                         LRVRAQDPPPELYFVKVDVTGAYDTIPQDRLTEVIASIIKPQNTYCVRRYAVVQKAAHG
                         HVRKAFKSHVSTLTDLQPYMRQFVAHLQETSPLRDAVVIEQSSSLNEASSGLFDVFLRF
                         MCHHAVRIRGKSYVQCQGIPQGSILSTLLCSLCYGDMENKLFAGIRRDGLLLRLVDDFL
                         LVTPHLTHAKTFLRTLVRGVPEYGCVVNLRKTVVNFPVEDEALGGTAFVQMPAHGLFPW
                         CGLLLDTRTLEVQSDYSSYARTSIRASLTFNRGFKAGRNMRRKLFGVLRLKCHSLFLDL
                         QVNSLQTVCTNIYKILLLQAYRFHACVLQLPFHQQVWKNPTFFLRVISDTASLCYSILK
                         AKNAGMSLGAKGAAGPLPSEAVQWLCHQAFLLKLTRHRVTYVPLLGSLRTAQTQLSRKL
                         PGTTLTALEAAANPALPSDFKTILD"
         promoter        4851..5180
                         /label=SV40 promoter
                         /note="SV40 enhancer and early promoter"
         rep_origin      5031..5166
                         /label=SV40 ori
                         /note="SV40 origin of replication"
         CDS             5537..6331
                         /codon_start=1
                         /gene="aph(3')-II (or nptII)"
                         /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
                         /label=Neo
                         /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 
                         (Geneticin(R))"
                         /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
                         VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
                         SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
                         GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
                         LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
         LTR             7135..7604
                         /note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia 
                         virus"
         CDS             complement(7719..8579)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(8580..8684)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
    ORIGIN
            1 gcagcctgaa tatgggccaa acaggatatc tgtggtaagc agttcctgcc ccggctcagg
           61 gccaagaaca gatggaacag ctgaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc
          121 ctgccccggc tcagggccaa gaacagatgg tccccagatg cggtccagcc ctcagcagtt
          181 tctagagaac catcagatgt ttccagggtg ccccaaggac ctgaaatgac cctgtgcctt
          241 atttgaacta accaatcagt tcgcttctcg cttctgttcg cgcgcttctg ctccccgagc
          301 tcaataaaag agcccacaac ccctcactcg gggcgccagt cctccgattg actgagtcgc
          361 ccgggtaccc gtgtatccaa taaaccctct tgcagttgca tccgacttgt ggtctcgctg
          421 ttccttggga gggtctcctc tgagtgattg actacccgtc agcgggggtc tttcatttgg
          481 gggctcgtcc gggatcggga gacccctgcc cagggaccac cgacccacca ccgggaggca
          541 agctggccag caacttatct gtgtctgtcc gattgtctag tgtctatgac tgattttatg
          601 cgcctgcgtc ggtactagtt agctaactag ctctgtatct ggcggacccg tggtggaact
          661 gacgagttct gaacacccgg ccgcaaccct gggagacgtc ccagggactt tgggggccgt
          721 ttttgtggcc cgacctgagg aagggagtcg atgtggaatc cgaccccgtc aggatatgtg
          781 gttctggtag gagacgagaa cctaaaacag ttcccgcctc cgtctgaatt tttgctttcg
          841 gtttggaacc gaagccgcgc gtcttgtctg ctgcagcgct gcagcatcgt tctgtgttgt
          901 ctctgtctga ctgtgtttct gtatttgtct gaaaattagg gccagactgt taccactccc
          961 ttaagtttga ccttaggtca ctggaaagat gtcgagcgga tcgctcacaa ccagtcggta
         1021 gatgtcaaga agagacgttg ggttaccttc tgctctgcag aatggccaac ctttaacgtc
         1081 ggatggccgc gagacggcac ctttaaccga gacctcatca cccaggttaa gatcaaggtc
         1141 ttttcacctg gcccgcatgg acacccagac caggtcccct acatcgtgac ctgggaagcc
         1201 ttggcttttg acccccctcc ctgggtcaag ccctttgtac accctaagcc tccgcctcct
         1261 cttcctccat ccgccccgtc tctccccctt gaacctcctc gttcgacccc gcctcgatcc
         1321 tccctttatc cagccctcac tccttctcta ggcgccggcc ggatcccagt gtggtggtac
         1381 gtaggaattc gtcctgctgc gcacgtggga agccctggcc ccggccaccc ccgcgatgcc
         1441 gcgcgctccc cgctgccgag ccgtgcgctc cctgctgcgc agccactacc gcgaggtgct
         1501 gccgctggcc acgttcgtgc ggcgcctggg gccccagggc tggcggctgg tgcagcgcgg
         1561 ggacccggcg gctttccgcg cgctggtggc ccagtgcctg gtgtgcgtgc cctgggacgc
         1621 acggccgccc cccgccgccc cctccttccg ccaggtgtcc tgcctgaagg agctggtggc
         1681 ccgagtgctg cagaggctgt gcgagcgcgg cgcgaagaac gtgctggcct tcggcttcgc
         1741 gctgctggac ggggcccgcg ggggcccccc cgaggccttc accaccagcg tgcgcagcta
         1801 cctgcccaac acggtgaccg acgcactgcg ggggagcggg gcgtgggggc tgctgctgcg
         1861 ccgcgtgggc gacgacgtgc tggttcacct gctggcacgc tgcgcgctct ttgtgctggt
         1921 ggctcccagc tgcgcctacc aggtgtgcgg gccgccgctg taccagctcg gcgctgccac
         1981 tcaggcccgg cccccgccac acgctagtgg accccgaagg cgtctgggat gcgaacgggc
         2041 ctggaaccat agcgtcaggg aggccggggt ccccctgggc ctgccagccc cgggtgcgag
         2101 gaggcgcggg ggcagtgcca gccgaagtct gccgttgccc aagaggccca ggcgtggcgc
         2161 tgcccctgag ccggagcgga cgcccgttgg gcaggggtcc tgggcccacc cgggcaggac
         2221 gcgtggaccg agtgaccgtg gtttctgtgt ggtgtcacct gccagacccg ccgaagaagc
         2281 cacctctttg gagggtgcgc tctctggcac gcgccactcc cacccatccg tgggccgcca
         2341 gcaccacgcg ggccccccat ccacatcgcg gccaccacgt ccctgggaca cgccttgtcc
         2401 cccggtgtac gccgagacca agcacttcct ctactcctca ggcgacaagg agcagctgcg
         2461 gccctccttc ctactcagct ctctgaggcc cagcctgact ggcgctcgga ggctcgtgga
         2521 gaccatcttt ctgggttcca ggccctggat gccagggact ccccgcaggt tgccccgcct
         2581 gccccagcgc tactggcaaa tgcggcccct gtttctggag ctgcttggga accacgcgca
         2641 gtgcccctac ggggtgctcc tcaagacgca ctgcccgctg cgagctgcgg tcaccccagc
         2701 agccggtgtc tgtgcccggg agaagcccca gggctctgtg gcggcccccg aggaggagga
         2761 cacagacccc cgtcgcctgg tgcagctgct ccgccagcac agcagcccct ggcaggtgta
         2821 cggcttcgtg cgggcctgcc tgcgccggct ggtgccccca ggcctctggg gctccaggca
         2881 caacgaacgc cgcttcctca ggaacaccaa gaagttcatc tccctgggga agcatgccaa
         2941 gctctcgctg caggagctga cgtggaagat gagcgtgcgg ggctgcgctt ggctgcgcag
         3001 gagcccaggg gttggctgtg ttccggccgc agagcaccgt ctgcgtgagg agatcctggc
         3061 caagttcctg cactggctga tgagtgtgta cgtcgtcgag ctgctcaggt ctttctttta
         3121 tgtcacggag accacgtttc aaaagaacag gctctttttc taccggaaga gtgtctggag
         3181 caagttgcaa agcattggaa tcagacagca cttgaagagg gtgcagctgc gggagctgtc
         3241 ggaagcagag gtcaggcagc atcgggaagc caggcccgcc ctgctgacgt ccagactccg
         3301 cttcatcccc aagcctgacg ggctgcggcc gattgtgaac atggactacg tcgtgggagc
         3361 cagaacgttc cgcagagaaa agagggccga gcgtctcacc tcgagggtga aggcactgtt
         3421 cagcgtgctc aactacgagc gggcgcggcg ccccggcctc ctgggcgcct ctgtgctggg
         3481 cctggacgat atccacaggg cctggcgcac cttcgtgctg cgtgtgcggg cccaggaccc
         3541 gccgcctgag ctgtactttg tcaaggtgga tgtgacgggc gcgtacgaca ccatccccca
         3601 ggacaggctc acggaggtca tcgccagcat catcaaaccc cagaacacgt actgcgtgcg
         3661 tcggtatgcc gtggtccaga aggccgccca tgggcacgtc cgcaaggcct tcaagagcca
         3721 cgtctctacc ttgacagacc tccagccgta catgcgacag ttcgtggctc acctgcagga
         3781 gaccagcccg ctgagggatg ccgtcgtcat cgagcagagc tcctccctga atgaggccag
         3841 cagtggcctc ttcgacgtct tcctacgctt catgtgccac cacgccgtgc gcatcagggg
         3901 caagtcctac gtccagtgcc aggggatccc gcagggctcc atcctctcca cgctgctctg
         3961 cagcctgtgc tacggcgaca tggagaacaa gctgtttgcg gggattcggc gggacgggct
         4021 gctcctgcgt ttggtggatg atttcttgtt ggtgacacct cacctcaccc acgcgaaaac
         4081 cttcctcagg accctggtcc gaggtgtccc tgagtatggc tgcgtggtga acttgcggaa
         4141 gacagtggtg aacttccctg tagaagacga ggccctgggt ggcacggctt ttgttcagat
         4201 gccggcccac ggcctattcc cctggtgcgg cctgctgctg gatacccgga ccctggaggt
         4261 gcagagcgac tactccagct atgcccggac ctccatcaga gccagtctca ccttcaaccg
         4321 cggcttcaag gctgggagga acatgcgtcg caaactcttt ggggtcttgc ggctgaagtg
         4381 tcacagcctg tttctggatt tgcaggtgaa cagcctccag acggtgtgca ccaacatcta
         4441 caagatcctc ctgctgcagg cgtacaggtt tcacgcatgt gtgctgcagc tcccatttca
         4501 tcagcaagtt tggaagaacc ccacattttt cctgcgcgtc atctctgaca cggcctccct
         4561 ctgctactcc atcctgaaag ccaagaacgc agggatgtcg ctgggggcca agggcgccgc
         4621 cggccctctg ccctccgagg ccgtgcagtg gctgtgccac caagcattcc tgctcaagct
         4681 gactcgacac cgtgtcacct acgtgccact cctggggtca ctcaggacag cccagacgca
         4741 gctgagtcgg aagctcccgg ggacgacgct gactgccctg gaggccgcag ccaacccggc
         4801 actgccctca gacttcaaga ccatcctgga ctgagtcgac cctgtggaat gtgtgtcagt
         4861 tagggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca
         4921 attagtcagc aaccaggtgt ggaaagtccc caggctcccc agcaggcaga agtatgcaaa
         4981 gcatgcatct caattagtca gcaaccatag tcccgcccct aactccgccc atcccgcccc
         5041 taactccgcc cagttccgcc cattctccgc cccatggctg actaattttt tttatttatg
         5101 cagaggccga ggccgcctcg gcctctgagc tattccagaa gtagtgagga ggcttttttg
         5161 gaggcctagg cttttgcaaa aagcttcacg ctgccgcaag cactcagggc gcaagggctg
         5221 ctaaaggaag cggaacacgt agaaagccag tccgcagaaa cggtgctgac cccggatgaa
         5281 tgtcagctac tgggctatct ggacaaggga aaacgcaagc gcaaagagaa agcaggtagc
         5341 ttgcagtggg cttacatggc gatagctaga ctgggcggtt ttatggacag caagcgaacc
         5401 ggaattgcca gctggggcgc cctctggtaa ggttgggaag ccctgcaaag taaactggat
         5461 ggctttcttg ccgccaagga tctgatggcg caggggatca agatctgatc aagagacagg
         5521 atgaggatcg tttcgcatga ttgaacaaga tggattgcac gcaggttctc cggccgcttg
         5581 ggtggagagg ctattcggct atgactgggc acaacagaca atcggctgct ctgatgccgc
         5641 cgtgttccgg ctgtcagcgc aggggcgccc ggttcttttt gtcaagaccg acctgtccgg
         5701 tgccctgaat gaactgcagg acgaggcagc gcggctatcg tggctggcca cgacgggcgt
         5761 tccttgcgca gctgtgctcg acgttgtcac tgaagcggga agggactggc tgctattggg
         5821 cgaagtgccg gggcaggatc tcctgtcatc tcaccttgct cctgccgaga aagtatccat
         5881 catggctgat gcaatgcggc ggctgcatac gcttgatccg gctacctgcc cattcgacca
         5941 ccaagcgaaa catcgcatcg agcgagcacg tactcggatg gaagccggtc ttgtcgatca
         6001 ggatgatctg gacgaagagc atcaggggct cgcgccagcc gaactgttcg ccaggctcaa
         6061 ggcgcgcatg cccgacggcg aggatctcgt cgtgacccat ggcgatgcct gcttgccgaa
         6121 tatcatggtg gaaaatggcc gcttttctgg attcatcgac tgtggccggc tgggtgtggc
         6181 ggaccgctat caggacatag cgttggctac ccgtgatatt gctgaagagc ttggcggcga
         6241 atgggctgac cgcttcctcg tgctttacgg tatcgccgct cccgattcgc agcgcatcgc
         6301 cttctatcgc cttcttgacg agttcttctg agcgggactc tggggttcgc atcgatgcat
         6361 cgatgcggcg ggtgtggtgg ttacgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc
         6421 taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg
         6481 gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg ttcttctagt gtagccgtag ttaggccacc
         6541 acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg
         6601 ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg
         6661 ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa
         6721 cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc acgcttcccg
         6781 aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga
         6841 gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct
         6901 gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca
         6961 gcaacgcatc gataaaataa aagattttat ttagtctcca gaaaaagggg ggaatgaaag
         7021 accccacctg taggtttggc aagctagctt aagtaacgcc attttgcaag gcatggaaaa
         7081 atacataact gagaatagag aagttcagat caaggtcagg aacagatgga acagctgaat
         7141 atgggccaaa caggatatct gtggtaagca gttcctgccc cggctcaggg ccaagaacag
         7201 atggaacagc tgaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc tgccccggct
         7261 cagggccaag aacagatggt ccccagatgc ggtccagccc tcagcagttt ctagagaacc
         7321 atcagatgtt tccagggtgc cccaaggacc tgaaatgacc ctgtgcctta tttgaactaa
         7381 ccaatcagtt cgcttctcgc ttctgttcgc gcgcttctgc tccccgagct caataaaaga
         7441 gcccacaacc cctcactcgg ggcgccagtc ctccgattga ctgagtcgcc cgggtacccg
         7501 tgtatccaat aaaccctctt gcagttgcat ccgacttgtg gtctcgctgt tccttgggag
         7561 ggtctcctct gagtgattga ctacccgtca gcgggggtct ttcacatgca gcatgtatca
         7621 aaattaattt ggtttttttt cttaagtatt tacattaaat ggccatagtg cggccgcaaa
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    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒
    pBABE-neo-hTERT人源基因逆病毒质粒
    P1281/pECMV-3×FLAG-LONP2人源基因质粒
    P1563/pECMV-3×FLAG-Survium人源基因质粒
    P1565/pECMV-3×FLAG-RLN2人源基因质粒
    P1853/pECMV-3×FLAG-IL8人源基因质粒
    P1854/pECMV-3×FLAG-IL17A人源基因质粒
    P1882/pECMV-3×FLAG-PKM人源基因质粒
    P4107/pECMV-3×FLAG-SLC25A10人源基因质粒
    P4108/pECMV-3×FLAG-CLDN12人源基因质粒
    P4109/pECMV-3×FLAG-C2orf49人源基因质粒
    P4110/pECMV-3×FLAG-CBR4人源基因质粒
    P4111/pECMV-3×FLAG-ANXA8L1人源基因质粒

     

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