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- 上海
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- 2026年01月21日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#28046;RAB5
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：EGFP-Rab5A Q79L人源基因质粒
别称: Plasmid#28046;RAB5
启动子：CMV
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：绿色
质粒简介：详询
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6748 bp ds-DNA circular SYN 27-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6748)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6748
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
polyA_signal 270..391
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
CDS complement(565..1359)
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
promoter complement(1426..1755)
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 1440..1575
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
rep_origin complement(1769..2197)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 2243..2467
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
promoter 2493..2511
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
misc_feature complement(2547..3194)
/label=Rab5A Q79L
CDS complement(3201..3917)
/codon_start=1
/product="enhanced GFP"
/label=EGFP
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
EFVTAAGITLGMDELYK"
promoter complement(3931..3949)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter complement(3994..4197)
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
enhancer 4198..4577
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 4843..4947
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 4948..5808
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 5979..6567
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc
61 acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtgagttagc
121 tcactcatta ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc ggctcgtatg ttgtgtggaa
181 ttgtgagcgg ataacaattt cacacaggaa acagctatga ccatgattac gccaagctct
241 agctagaggt cgacggtata cagacatgat aagatacatt gatgagtttg gacaaaccac
301 aactagaatg cagtgaaaaa aatgctttat ttgtgaaatt tgtgatgcta ttgctttatt
361 tgtaaccatt ataagctgca ataaacaagt tggggtgggc gaagaactcc agcatgagat
421 ccccgcgctg gaggatcatc cagccggcgt cccggaaaac gattccgaag cccaaccttt
481 catagaaggc ggcggtggaa tcgaaatctc gtgatggcag gttgggcgtc gcttggtcgg
541 tcatttcgaa ccccagagtc ccgctcagaa gaactcgtca agaaggcgat agaaggcgat
601 gcgctgcgaa tcgggagcgg cgataccgta aagcacgagg aagcggtcag cccattcgcc
661 gccaagctct tcagcaatat cacgggtagc caacgctatg tcctgatagc ggtccgccac
721 acccagccgg ccacagtcga tgaatccaga aaagcggcca ttttccacca tgatattcgg
781 caagcaggca tcgccatggg tcacgacgag atcctcgccg tcgggcatgc gcgccttgag
841 cctggcgaac agttcggctg gcgcgagccc ctgatgctct tcgtccagat catcctgatc
901 gacaagaccg gcttccatcc gagtacgtgc tcgctcgatg cgatgtttcg cttggtggtc
961 gaatgggcag gtagccggat caagcgtatg cagccgccgc attgcatcag ccatgatgga
1021 tactttctcg gcaggagcaa ggtgagatga caggagatcc tgccccggca cttcgcccaa
1081 tagcagccag tcccttcccg cttcagtgac aacgtcgagc acagctgcgc aaggaacgcc
1141 cgtcgtggcc agccacgata gccgcgctgc ctcgtcctgc agttcattca gggcaccgga
1201 caggtcggtc ttgacaaaaa gaaccgggcg cccctgcgct gacagccgga acacggcggc
1261 atcagagcag ccgattgtct gttgtgccca gtcatagccg aatagcctct ccacccaagc
1321 ggccggagaa cctgcgtgca atccatcttg ttcaatcatg cgaaacgatc ctcatcctgt
1381 ctcttgatca gatccgaaaa tggatataca agctcccggg agctttttgc aaaagcctag
1441 gcctccaaaa aagcctcctc actacttctg gaatagctca gaggcagagg cggcctcggc
1501 ctctgcataa ataaaaaaaa ttagtcagcc atggggcgga gaatgggcgg aactgggcgg
1561 agttaggggc gggatgggcg gagttagggg cgggactatg gttgctgact aattgagatg
1621 catgctttgc atacttctgc ctgctgggga gcctggggac tttccacacc tggttgctga
1681 ctaattgaga tgcatgcttt gcatacttct gcctgctggg gagcctgggg actttccaca
1741 ccctaactga cacacattcc acagaattaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca
1801 ttttttaacc aataggccga aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag
1861 atagggttga gtgttgttcc agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc
1921 aacgtcaaag ggcgaaaaac cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc
1981 taatcaagtt ttttggggtc gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc
2041 ccccgattta gagcttgacg gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa
2101 gcgaaaggag cgggcgctag ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc
2161 acacccgccg cgcttaatgc gccgctacag ggcgcgtggg gataccccct agagccccag
2221 ctggttcttt ccgcctcaga agccatagag cccaccgcat ccccagcatg cctgctattg
2281 tcttcccaat cctccccctt gctgtcctgc cccaccccac cccccagaat agaatgacac
2341 ctactcagac aatgcgatgc aatttcctca ttttattagg aaaggacagt gggagtggca
2401 ccttccaggg tcaaggaagg cacgggggag gggcaaacaa cagatggctg gcaactagaa
2461 ggcacagtcg aggctgatca gcgagctcta gcatttaggt gacactatag aatagggccc
2521 tctagatgca tgctcgagcg gccgcctcag ttactacaac actgattcct ggttggttgt
2581 gtgggttcgg taaggtctac tcctcttcct ctggcagaat ttgctcctgg attttgtggt
2641 tcattctttg gcaatttttt agctattgcc atgaatattt catttacatt cattgatgtt
2701 ttagcggatg tctccatgaa taataaacta ttgtcatctg cataggactg tgcttcctgg
2761 aaatctactg ctcttttatt tgctaggtcg gccttgtttc ccgataaagc tattacaatg
2821 ttaggacttg cttgcctctg aagttcttta acccaatttt ttgctcttgc aaaggactcc
2881 tcatttgtga tatcatatac aactatggct gcttgtgctc ctctgtagta cattggtgct
2941 aggctatggt atcgttctag accagctgta tcccatattt caaactttac tgtagtgtca
3001 tcaagacata cagtttgggt tagaaaagca gccccaatgg tactctcttg aaattcatga
3061 aattggcctt tcacaaaacg aagcactagg cttgatttgc caacagcgga ctctcccaga
3121 agtactagtt tgaactggca tattttattt ccagtatttg gcccgttggg tcttgttgcg
3181 cctcgactag ccatggatcc cttgtacagc tcgtccatgc cgagagtgat cccggcggcg
3241 gtcacgaact ccagcaggac catgtgatcg cgcttctcgt tggggtcttt gctcagggcg
3301 gactgggtgc tcaggtagtg gttgtcgggc agcagcacgg ggccgtcgcc gatgggggtg
3361 ttctgctggt agtggtcggc gagctgcacg ctgccgtcct cgatgttgtg gcggatcttg
3421 aagttcacct tgatgccgtt cttctgcttg tcggccatga tatagacgtt gtggctgttg
3481 tagttgtact ccagcttgtg ccccaggatg ttgccgtcct ccttgaagtc gatgcccttc
3541 agctcgatgc ggttcaccag ggtgtcgccc tcgaacttca cctcggcgcg ggtcttgtag
3601 ttgccgtcgt ccttgaagaa gatggtgcgc tcctggacgt agccttcggg catggcggac
3661 ttgaagaagt cgtgctgctt catgtggtcg gggtagcggc tgaagcactg cacgccgtag
3721 gtcagggtgg tcacgagggt gggccagggc acgggcagct tgccggtggt gcagatgaac
3781 ttcagggtca gcttgccgta ggtggcatcg ccctcgccct cgccggacac gctgaacttg
3841 tggccgttta cgtcgccgtc cagctcgacc aggatgggca ccaccccggt gaacagctcc
3901 tcgcccttgc tcaccataag cttgggtctc cctatagtga gtcgtattaa tttcgataag
3961 ccagtaagca gtgggttctc tagttagcca gagagctctg cttatataga cctcccaccg
4021 tacacgccta ccgcccattt gcgtcaatgg ggcggagttg ttacgacatt ttggaaagtc
4081 ccgttgattt tggtgccaaa acaaactccc attgacgtca atggggtgga gacttggaaa
4141 tccccgtgag tcaaaccgct atccacgccc attgatgtac tgccaaaacc gcatcaccat
4201 ggtaatagcg atgactaata cgtagatgta ctgccaagta ggaaagtccc ataaggtcat
4261 gtactgggca taatgccagg cgggccattt accgtcattg acgtcaatag ggggcgtact
4321 tggcatatga tacacttgat gtactgccaa gtgggcagtt taccgtaaat actccaccca
4381 ttgacgtcaa tggaaagtcc ctattggcgt tactatggga acatacgtca ttattgacgt
4441 caatgggcgg gggtcgttgg gcggtcagcc aggcgggcca tttaccgtaa gttatgtaac
4501 gcggaactcc atatatgggc tatgaactaa tgaccccgta attgattact attaataact
4561 agtcaataat caatgtcaac gcgtatatct ggcccgtaca tcgcgaagca gcgcaaaacg
4621 cctaacccta agcagattct tcatgcaatt gtcggtcaag ccttgccttg ttgtagctta
4681 aattttgctc gcgcactact cagcgacctc caacacacaa gcagggagca gatactggct
4741 taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac cataggggat cgggagatct
4801 cccgatccgt cgacgtcagg tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt
4861 ttatttttct aaatacattc aaatatgtat ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg
4921 cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt
4981 cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta
5041 aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc
5101 ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa
5161 gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc
5221 cgcatacact attctcagaa tgacttggtt gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt
5281 acggatggca tgacagtaag agaattatgc agtgctgcca taaccatgag tgataacact
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5401 aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata
5461 ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta
5521 ttaactggcg aactacttac tctagcttcc cggcaacaat taatagactg gatggaggcg
5581 gataaagttg caggaccact tctgcgctcg gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat
5641 aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc ggtatcattg cagcactggg gccagatggt
5701 aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg acggggagtc aggcaactat ggatgaacga
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5881 gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac
5941 tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc
6001 gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat
6061 caagagctac caactctttt tccgaaggta actggcttca gcagagcgca gataccaaat
6121 actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc caccacttca agaactctgt agcaccgcct
6181 acatacctcg ctctgctaat cctgttacca gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt
6241 cttaccgggt tggactcaag acgatagtta ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg
6301 gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag cgaacgacct acaccgaact gagataccta
6361 cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg
6421 gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg
6481 tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc
6541 tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac gccagcaacg cggccttttt acggttcctg
6601 gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat
6661 aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc
6721 agcgagtcag tgagcgagga agcggaag
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：EGFP-Rab5A Q79L人源基因质粒
别称: Plasmid#28046;RAB5
启动子：CMV
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：绿色
质粒简介：详询
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6748 bp ds-DNA circular SYN 27-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6748)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6748
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
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(Geneticin(R))"
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SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
promoter complement(1426..1755)
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 1440..1575
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
rep_origin complement(1769..2197)
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/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 2243..2467
/label=bGH poly(A) signal
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promoter 2493..2511
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
misc_feature complement(2547..3194)
/label=Rab5A Q79L
CDS complement(3201..3917)
/codon_start=1
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KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
EFVTAAGITLGMDELYK"
promoter complement(3931..3949)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter complement(3994..4197)
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
enhancer 4198..4577
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
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/label=AmpR promoter
CDS 4948..5808
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EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
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LIKHW"
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ORIGIN
1 agcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc
61 acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtgagttagc
121 tcactcatta ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc ggctcgtatg ttgtgtggaa
181 ttgtgagcgg ataacaattt cacacaggaa acagctatga ccatgattac gccaagctct
241 agctagaggt cgacggtata cagacatgat aagatacatt gatgagtttg gacaaaccac
301 aactagaatg cagtgaaaaa aatgctttat ttgtgaaatt tgtgatgcta ttgctttatt
361 tgtaaccatt ataagctgca ataaacaagt tggggtgggc gaagaactcc agcatgagat
421 ccccgcgctg gaggatcatc cagccggcgt cccggaaaac gattccgaag cccaaccttt
481 catagaaggc ggcggtggaa tcgaaatctc gtgatggcag gttgggcgtc gcttggtcgg
541 tcatttcgaa ccccagagtc ccgctcagaa gaactcgtca agaaggcgat agaaggcgat
601 gcgctgcgaa tcgggagcgg cgataccgta aagcacgagg aagcggtcag cccattcgcc
661 gccaagctct tcagcaatat cacgggtagc caacgctatg tcctgatagc ggtccgccac
721 acccagccgg ccacagtcga tgaatccaga aaagcggcca ttttccacca tgatattcgg
781 caagcaggca tcgccatggg tcacgacgag atcctcgccg tcgggcatgc gcgccttgag
841 cctggcgaac agttcggctg gcgcgagccc ctgatgctct tcgtccagat catcctgatc
901 gacaagaccg gcttccatcc gagtacgtgc tcgctcgatg cgatgtttcg cttggtggtc
961 gaatgggcag gtagccggat caagcgtatg cagccgccgc attgcatcag ccatgatgga
1021 tactttctcg gcaggagcaa ggtgagatga caggagatcc tgccccggca cttcgcccaa
1081 tagcagccag tcccttcccg cttcagtgac aacgtcgagc acagctgcgc aaggaacgcc
1141 cgtcgtggcc agccacgata gccgcgctgc ctcgtcctgc agttcattca gggcaccgga
1201 caggtcggtc ttgacaaaaa gaaccgggcg cccctgcgct gacagccgga acacggcggc
1261 atcagagcag ccgattgtct gttgtgccca gtcatagccg aatagcctct ccacccaagc
1321 ggccggagaa cctgcgtgca atccatcttg ttcaatcatg cgaaacgatc ctcatcctgt
1381 ctcttgatca gatccgaaaa tggatataca agctcccggg agctttttgc aaaagcctag
1441 gcctccaaaa aagcctcctc actacttctg gaatagctca gaggcagagg cggcctcggc
1501 ctctgcataa ataaaaaaaa ttagtcagcc atggggcgga gaatgggcgg aactgggcgg
1561 agttaggggc gggatgggcg gagttagggg cgggactatg gttgctgact aattgagatg
1621 catgctttgc atacttctgc ctgctgggga gcctggggac tttccacacc tggttgctga
1681 ctaattgaga tgcatgcttt gcatacttct gcctgctggg gagcctgggg actttccaca
1741 ccctaactga cacacattcc acagaattaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca
1801 ttttttaacc aataggccga aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag
1861 atagggttga gtgttgttcc agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc
1921 aacgtcaaag ggcgaaaaac cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc
1981 taatcaagtt ttttggggtc gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc
2041 ccccgattta gagcttgacg gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa
2101 gcgaaaggag cgggcgctag ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc
2161 acacccgccg cgcttaatgc gccgctacag ggcgcgtggg gataccccct agagccccag
2221 ctggttcttt ccgcctcaga agccatagag cccaccgcat ccccagcatg cctgctattg
2281 tcttcccaat cctccccctt gctgtcctgc cccaccccac cccccagaat agaatgacac
2341 ctactcagac aatgcgatgc aatttcctca ttttattagg aaaggacagt gggagtggca
2401 ccttccaggg tcaaggaagg cacgggggag gggcaaacaa cagatggctg gcaactagaa
2461 ggcacagtcg aggctgatca gcgagctcta gcatttaggt gacactatag aatagggccc
2521 tctagatgca tgctcgagcg gccgcctcag ttactacaac actgattcct ggttggttgt
2581 gtgggttcgg taaggtctac tcctcttcct ctggcagaat ttgctcctgg attttgtggt
2641 tcattctttg gcaatttttt agctattgcc atgaatattt catttacatt cattgatgtt
2701 ttagcggatg tctccatgaa taataaacta ttgtcatctg cataggactg tgcttcctgg
2761 aaatctactg ctcttttatt tgctaggtcg gccttgtttc ccgataaagc tattacaatg
2821 ttaggacttg cttgcctctg aagttcttta acccaatttt ttgctcttgc aaaggactcc
2881 tcatttgtga tatcatatac aactatggct gcttgtgctc ctctgtagta cattggtgct
2941 aggctatggt atcgttctag accagctgta tcccatattt caaactttac tgtagtgtca
3001 tcaagacata cagtttgggt tagaaaagca gccccaatgg tactctcttg aaattcatga
3061 aattggcctt tcacaaaacg aagcactagg cttgatttgc caacagcgga ctctcccaga
3121 agtactagtt tgaactggca tattttattt ccagtatttg gcccgttggg tcttgttgcg
3181 cctcgactag ccatggatcc cttgtacagc tcgtccatgc cgagagtgat cccggcggcg
3241 gtcacgaact ccagcaggac catgtgatcg cgcttctcgt tggggtcttt gctcagggcg
3301 gactgggtgc tcaggtagtg gttgtcgggc agcagcacgg ggccgtcgcc gatgggggtg
3361 ttctgctggt agtggtcggc gagctgcacg ctgccgtcct cgatgttgtg gcggatcttg
3421 aagttcacct tgatgccgtt cttctgcttg tcggccatga tatagacgtt gtggctgttg
3481 tagttgtact ccagcttgtg ccccaggatg ttgccgtcct ccttgaagtc gatgcccttc
3541 agctcgatgc ggttcaccag ggtgtcgccc tcgaacttca cctcggcgcg ggtcttgtag
3601 ttgccgtcgt ccttgaagaa gatggtgcgc tcctggacgt agccttcggg catggcggac
3661 ttgaagaagt cgtgctgctt catgtggtcg gggtagcggc tgaagcactg cacgccgtag
3721 gtcagggtgg tcacgagggt gggccagggc acgggcagct tgccggtggt gcagatgaac
3781 ttcagggtca gcttgccgta ggtggcatcg ccctcgccct cgccggacac gctgaacttg
3841 tggccgttta cgtcgccgtc cagctcgacc aggatgggca ccaccccggt gaacagctcc
3901 tcgcccttgc tcaccataag cttgggtctc cctatagtga gtcgtattaa tttcgataag
3961 ccagtaagca gtgggttctc tagttagcca gagagctctg cttatataga cctcccaccg
4021 tacacgccta ccgcccattt gcgtcaatgg ggcggagttg ttacgacatt ttggaaagtc
4081 ccgttgattt tggtgccaaa acaaactccc attgacgtca atggggtgga gacttggaaa
4141 tccccgtgag tcaaaccgct atccacgccc attgatgtac tgccaaaacc gcatcaccat
4201 ggtaatagcg atgactaata cgtagatgta ctgccaagta ggaaagtccc ataaggtcat
4261 gtactgggca taatgccagg cgggccattt accgtcattg acgtcaatag ggggcgtact
4321 tggcatatga tacacttgat gtactgccaa gtgggcagtt taccgtaaat actccaccca
4381 ttgacgtcaa tggaaagtcc ctattggcgt tactatggga acatacgtca ttattgacgt
4441 caatgggcgg gggtcgttgg gcggtcagcc aggcgggcca tttaccgtaa gttatgtaac
4501 gcggaactcc atatatgggc tatgaactaa tgaccccgta attgattact attaataact
4561 agtcaataat caatgtcaac gcgtatatct ggcccgtaca tcgcgaagca gcgcaaaacg
4621 cctaacccta agcagattct tcatgcaatt gtcggtcaag ccttgccttg ttgtagctta
4681 aattttgctc gcgcactact cagcgacctc caacacacaa gcagggagca gatactggct
4741 taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac cataggggat cgggagatct
4801 cccgatccgt cgacgtcagg tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt
4861 ttatttttct aaatacattc aaatatgtat ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg
4921 cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt
4981 cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta
5041 aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc
5101 ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa
5161 gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc
5221 cgcatacact attctcagaa tgacttggtt gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt
5281 acggatggca tgacagtaag agaattatgc agtgctgcca taaccatgag tgataacact
5341 gcggccaact tacttctgac aacgatcgga ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac
5401 aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata
5461 ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta
5521 ttaactggcg aactacttac tctagcttcc cggcaacaat taatagactg gatggaggcg
5581 gataaagttg caggaccact tctgcgctcg gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat
5641 aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc ggtatcattg cagcactggg gccagatggt
5701 aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg acggggagtc aggcaactat ggatgaacga
5761 aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa
5821 gtttactcat atatacttta gattgattta aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag
5881 gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac
5941 tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc
6001 gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat
6061 caagagctac caactctttt tccgaaggta actggcttca gcagagcgca gataccaaat
6121 actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc caccacttca agaactctgt agcaccgcct
6181 acatacctcg ctctgctaat cctgttacca gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt
6241 cttaccgggt tggactcaag acgatagtta ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg
6301 gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag cgaacgacct acaccgaact gagataccta
6361 cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg
6421 gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg
6481 tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc
6541 tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac gccagcaacg cggccttttt acggttcctg
6601 gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat
6661 aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc
6721 agcgagtcag tgagcgagga agcggaag
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P0520/FUW-tetO-hMYC人源基因质粒 |
| P0521/FUW-M2rtTA人源基因质粒 |
| P0522/pMXs-hSOX2人源基因质粒 |
| P1613/pLVML-ECMV-DDIT3人源基因质粒 |
| P0592/pLVML-ECMV-IRX5人源基因质粒 |
| P0593/pLVML-ECMV-PCSK9人源基因质粒 |
| P0667/pCMV6-CD19人源基因质粒 |
| P0670/pLVML-ECMV-V5-IRX5人源基因质粒 |
| P0672/mEos3.2-Clathrin-15人源基因质粒 |
| P0691/pCMVβ-p300-myc人源基因质粒 |
| P0710/pLVX-CTSD-10×His-Puro人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
【求助】SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE
gtwyx 慢病毒包装质粒SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE，求图谱。 gtwyx-fd@163.com希望得到各位战友的帮助！ freecell Write to author for it. http://www.nature.com/mt/journal/v3/n1/abs/mt200115a.html gtwyx 谢谢楼上的战友。我想知道国内有没有
【求助】【求助】积分换质粒，急求pIRES2-EGFP，pBudCE4.1
lwjssry 【求助】积分换质粒，急求pIRES2-EGFP，pBudCE4.1 求pIRES2-EGFP，pBudCE4.1，积分交换，详见 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=133&id=11398213&sty=1&tpg=1&age=0 kaige88 支持把，获得pIRES2-EGFP可要通知我哦！也想用到此质粒，呵呵。。。 lwjssry
Map of pLP-EGFP-C1 Vector. Unique restriction sites are shown in bold. Note: The vector sequence file has been compiled from information in the sequence database, published literature
EGFP-Rab5A Q79L人源基因质粒
￥100 - 1000
