相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#56450
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:EGFP-Tubulin-6人源基因质粒
别称: Plasmid#56450
启动子: CMV
复制子: pUC
质粒分类: 基因文库质粒
原核抗性: Kan
筛选标记: G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:人
基因类型:ORF
原核抗性:Kan
真核抗性:Neo/G418
荧光蛋白:绿色
质粒简介
Homo sapiens tubulin alpha 1b (TUBA1B), mRNA
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6045 bp ds-DNA circular SYN 24-FEB-2018
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6045
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 61..364
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 365..568
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 613..1329
/codon_start=1
/product="enhanced GFP"
/label=EGFP
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
EFVTAAGITLGMDELYK"
misc_feature 1348..2700
/label=Tubulin
polyA_signal 2833..2954
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2961..3416)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3443..3547
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
promoter 3549..3906
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 3757..3892
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
CDS 3941..4735
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 4967..5014
/label=HSV TK poly(A) signal
/note="herpes simplex virus thymidine kinase
polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
rep_origin 5343..5931
/direction=RIGHT
/label=pUC ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcgcta
601 ccggtcgcca ccatggtgag caagggcgag gagctgttca ccggggtggt gcccatcctg
661 gtcgagctgg acggcgacgt aaacggccac aagttcagcg tgtccggcga gggcgagggc
721 gatgccacct acggcaagct gaccctgaag ttcatctgca ccaccggcaa gctgcccgtg
781 ccctggccca ccctcgtgac caccctgacc tacggcgtgc agtgcttcag ccgctacccc
841 gaccacatga agcagcacga cttcttcaag tccgccatgc ccgaaggcta cgtccaggag
901 cgcaccatct tcttcaagga cgacggcaac tacaagaccc gcgccgaggt gaagttcgag
961 ggcgacaccc tggtgaaccg catcgagctg aagggcatcg acttcaagga ggacggcaac
1021 atcctggggc acaagctgga gtacaactac aacagccaca acgtctatat catggccgac
1081 aagcagaaga acggcatcaa ggtgaacttc aagatccgcc acaacatcga ggacggcagc
1141 gtgcagctcg ccgaccacta ccagcagaac acccccatcg gcgacggccc cgtgctgctg
1201 cccgacaacc actacctgag cacccagtcc gccctgagca aagaccccaa cgagaagcgc
1261 gatcacatgg tcctgctgga gttcgtgacc gccgccggga tcactctcgg catggacgag
1321 ctgtacaagt ccggactcag atctcgagtg cgtgagtgca tctccatcca cgttggccag
1381 gctggtgtcc agattggcaa tgcctgctgg gagctctact gcctggaaca cggcatccag
1441 cccgatggcc agatgccaag tgacaagacc attgggggag gagatgactc cttcaacacc
1501 ttcttcagtg agacgggcgc tggcaagcac gtgccccggg ctgtgtttgt agacttggaa
1561 cccacagtca ttgatgaagt tcgcactggc acctaccgcc agctcttcca ccctgagcag
1621 ctcatcacag gcaaggaaga tgctgccaat aactatgccc gagggcacta caccattggc
1681 aaggagatca ttgaccttgt gttggaccga attcgcaagc tggctgacca gtgcaccggt
1741 cttcagggct tcttggtttt ccacagcttt ggtgggggaa ctggttctgg gttcacctcc
1801 ctgctcatgg aacgtctctc agttgattat ggcaagaagt ccaagctgga gttctccatt
1861 tacccagcac cccaggtttc cacagctgta gttgagccct acaactccat cctcaccacc
1921 cacaccaccc tggagcactc tgattgtgcc ttcatggtag acaatgaggc catctatgac
1981 atctgtcgta gaaacctcga tatcgagcgc ccaacctaca ctaaccttaa ccgccttatt
2041 agccagattg tgtcctccat cactgcttcc ctgagatttg atggagccct gaatgttgac
2101 ctgacagaat tccagaccaa cctggtgccc tacccccgca tccacttccc tctggccaca
2161 tatgcccctg tcatctctgc tgagaaagcc taccatgaac agctttctgt agcagagatc
2221 accaatgctt gctttgagcc agccaaccag atggtgaaat gtgaccctcg ccatggtaaa
2281 tacatggctt gctgcctgtt gtaccgtggt gacgtggttc ccaaagatgt caatgctgcc
2341 attgccacca tcaaaaccaa gcgcagcatc cagtttgtgg attggtgccc cactggcttc
2401 aaggttggca tcaactacca gcctcccact gtggtgcctg gtggagacct ggccaaggta
2461 cagagagctg tgtgcatgct gagcaacacc acagccattg ctgaggcctg ggctcgcctg
2521 gaccacaagt ttgacctgat gtatgccaag cgtgcctttg ttcactggta cgtgggtgag
2581 gggatggagg aaggcgagtt ttcagaggcc cgtgaagata tggctgccct tgagaaggat
2641 tatgaggagg ttggtgtgga ttctgttgaa ggagagggtg aggaagaagg agaggaatac
2701 taaggatcca ccggatctag ataactgatc ataatcagcc ataccacatt tgtagaggtt
2761 ttacttgctt taaaaaacct cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa aatgaatgca
2821 attgttgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt acaaataaag caatagcatc
2881 acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta gttgtggttt gtccaaactc
2941 atcaatgtat cttaacgcgt aaattgtaag cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa
3001 tttttgttaa atcagctcat tttttaacca ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa
3061 atcaaaagaa tagaccgaga tagggttgag tgttgttcca gtttggaaca agagtccact
3121 attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc
3181 actacgtgaa ccatcaccct aatcaagttt tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa
3241 tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc
3301 gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt
3361 cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtcagg
3421 tggcactttt cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc
3481 aaatatgtat ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag
3541 gaagagtcct gaggcggaaa gaaccagctg tggaatgtgt gtcagttagg gtgtggaaag
3601 tccccaggct ccccagcagg cagaagtatg caaagcatgc atctcaatta gtcagcaacc
3661 aggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat
3721 tagtcagcaa ccatagtccc gcccctaact ccgcccatcc cgcccctaac tccgcccagt
3781 tccgcccatt ctccgcccca tggctgacta atttttttta tttatgcaga ggccgaggcc
3841 gcctcggcct ctgagctatt ccagaagtag tgaggaggct tttttggagg cctaggcttt
3901 tgcaaagatc gatcaagaga caggatgagg atcgtttcgc atgattgaac aagatggatt
3961 gcacgcaggt tctccggccg cttgggtgga gaggctattc ggctatgact gggcacaaca
4021 gacaatcggc tgctctgatg ccgccgtgtt ccggctgtca gcgcaggggc gcccggttct
4081 ttttgtcaag accgacctgt ccggtgccct gaatgaactg caagacgagg cagcgcggct
4141 atcgtggctg gccacgacgg gcgttccttg cgcagctgtg ctcgacgttg tcactgaagc
4201 gggaagggac tggctgctat tgggcgaagt gccggggcag gatctcctgt catctcacct
4261 tgctcctgcc gagaaagtat ccatcatggc tgatgcaatg cggcggctgc atacgcttga
4321 tccggctacc tgcccattcg accaccaagc gaaacatcgc atcgagcgag cacgtactcg
4381 gatggaagcc ggtcttgtcg atcaggatga tctggacgaa gagcatcagg ggctcgcgcc
4441 agccgaactg ttcgccaggc tcaaggcgag catgcccgac ggcgaggatc tcgtcgtgac
4501 ccatggcgat gcctgcttgc cgaatatcat ggtggaaaat ggccgctttt ctggattcat
4561 cgactgtggc cggctgggtg tggcggaccg ctatcaggac atagcgttgg ctacccgtga
4621 tattgctgaa gagcttggcg gcgaatgggc tgaccgcttc ctcgtgcttt acggtatcgc
4681 cgctcccgat tcgcagcgca tcgccttcta tcgccttctt gacgagttct tctgagcggg
4741 actctggggt tcgaaatgac cgaccaagcg acgcccaacc tgccatcacg agatttcgat
4801 tccaccgccg ccttctatga aaggttgggc ttcggaatcg ttttccggga cgccggctgg
4861 atgatcctcc agcgcgggga tctcatgctg gagttcttcg cccaccctag ggggaggcta
4921 actgaaacac ggaaggagac aataccggaa ggaacccgcg ctatgacggc aataaaaaga
4981 cagaataaaa cgcacggtgt tgggtcgttt gttcataaac gcggggttcg gtcccagggc
5041 tggcactctg tcgatacccc accgagaccc cattggggcc aatacgcccg cgtttcttcc
5101 ttttccccac cccacccccc aagttcgggt gaaggcccag ggctcgcagc caacgtcggg
5161 gcggcaggcc ctgccatagc ctcaggttac tcatatatac tttagattga tttaaaactt
5221 catttttaat ttaaaaggat ctaggtgaag atcctttttg ataatctcat gaccaaaatc
5281 ccttaacgtg agttttcgtt ccactgagcg tcagaccccg tagaaaagat caaaggatct
5341 tcttgagatc ctttttttct gcgcgtaatc tgctgcttgc aaacaaaaaa accaccgcta
5401 ccagcggtgg tttgtttgcc ggatcaagag ctaccaactc tttttccgaa ggtaactggc
5461 ttcagcagag cgcagatacc aaatactgtc cttctagtgt agccgtagtt aggccaccac
5521 ttcaagaact ctgtagcacc gcctacatac ctcgctctgc taatcctgtt accagtggct
5581 gctgccagtg gcgataagtc gtgtcttacc gggttggact caagacgata gttaccggat
5641 aaggcgcagc ggtcgggctg aacggggggt tcgtgcacac agcccagctt ggagcgaacg
5701 acctacaccg aactgagata cctacagcgt gagctatgag aaagcgccac gcttcccgaa
5761 gggagaaagg cggacaggta tccggtaagc ggcagggtcg gaacaggaga gcgcacgagg
5821 gagcttccag ggggaaacgc ctggtatctt tatagtcctg tcgggtttcg ccacctctga
5881 cttgagcgtc gatttttgtg atgctcgtca ggggggcgga gcctatggaa aaacgccagc
5941 aacgcggcct ttttacggtt cctggccttt tgctggcctt ttgctcacat gttctttcct
6001 gcgttatccc ctgattctgt ggataaccgt attaccgcca tgcat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P4067/pCMV-SPORT6-RPL13(2同义突变)人源基因质粒 |
| P4068/pCMV-SPORT6-RNF208人源基因质粒 |
| P4069/pCMV-SPORT6-UBE2F人源基因质粒 |
| P4070/pCMV-SPORT6-IMP3(1同义突变)人源基因质粒 |
| P4071/pCMV-SPORT6-SNX12(1-477bp)人源基因质粒 |
| P4072/pCMV-SPORT6-CENPH(1同义突变)人源基因质粒 |
| P4073/pCMV-SPORT6-CHURC1(10-420bp)人源基因质粒 |
| P4074/pCMV-SPORT6-TRIR人源基因质粒 |
| P4075/pCMV-SPORT6-NLRP1人源基因质粒 |
| P4076/pCMV-SPORT6-RFK人源基因质粒 |
| P4077/pCMV-SPORT6-CXCL1人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【求助】【求助】积分换质粒,急求pIRES2-EGFP,pBudCE4.1
lwjssry 【求助】积分换质粒,急求pIRES2-EGFP,pBudCE4.1 求pIRES2-EGFP,pBudCE4.1,积分交换,详见 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=133&id=11398213&sty=1&tpg=1&age=0 kaige88 支持把,获得pIRES2-EGFP可要通知我哦!也想用到此质粒,呵呵。。。 lwjssry
Map of pLP-EGFP-C1 Vector. Unique restriction sites are shown in bold. Note: The vector sequence file has been compiled from information in the sequence database, published literature
在基因功能研究过程中,常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达(transient expression),以流式细胞仪检测细胞周期的变化,观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同,转基因的效率也不同,往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因,没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测,是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染;在共转染时,加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒











